灘羊血淋巴結形態結構的研究

王淵博，牛文琪，張珠明，汪仁莉

（寧夏大學農學院，寧夏 銀川 750021）

應對體內外環境致病因素損傷時，動物機體依靠免疫系統的作用起到防御性保護。在各免疫器官中，淋巴結對淋巴竇內的淋巴進行過濾，脾臟則對流過血竇的血液進行過濾。血淋巴結屬于次級淋巴器官，與淋巴結結構相似，具有產生抗體和過濾血液的作用。因此，關于血淋巴結是解剖器官還是免疫器官，仍備受爭議。

灘羊是一種多用途的地方優良綿羊品種，于2000年被列入國家二級保護品種。關于灘羊的解剖和組織學結構已有較多研究報道[1-3]，但關于其免疫器官，尤其是血淋巴結的存在以及形態特征的資料較匱乏。本文選取灘羊腹主動脈附近的血淋巴結進行形態學方面的初步研究，以期為灘羊局部與全身免疫系統的進一步研究提供新資料，豐富免疫病理學和比較解剖學的理論知識。

1 材料與方法

1.1 樣品采集

于鹽池寧鑫牧場內選擇健康灘羊4只（2~3歲，雌、雄各半），常規屠宰，打開腹腔，采集腹主動脈附近的血淋巴結和淋巴結，以10%福爾馬林溶液固定。

1.2 試劑與儀器

主要試劑：無水乙醇、二甲苯、鹽酸以及H.E染色試劑套裝等均購自北京索萊寶科技有限公司。

主要儀器：生物組織烤片臺（金華市益迪醫療設備有限公司）、輪轉式切片機（浙江金華科迪儀器設備有限公司）、數碼顯微鏡（廈門麥克奧迪顯微鏡公司）；組織包埋冷凍臺、包埋機（常州派斯杰醫療設備有限公司）。

1.3 試驗方法

1.3.1 血淋巴結的大體解剖學觀察

觀察并記錄分布于灘羊腹主動脈附近血淋巴結的解剖學特征。

1.3.2 血淋巴結的組織學觀察

將上述固定好的血淋巴結，應用常規石蠟切片的制作方法和H.E染色方法制成組織切片，在數碼顯微鏡下觀察并拍照。

2 結果與分析

2.1 灘羊血淋巴結大體解剖學觀察（見圖1）

由圖1可知，血淋巴結沿腹主動脈分布較多，尤其是在腹主動脈背側，腎動脈與髂內動脈之間的區域，緊靠血管集中分布。血淋巴結呈扁圓形或橢圓形，約20~22個，大小不一，小如針尖，大如黃豆。小的血淋巴結多分布于脂肪表面，呈淺或深的暗紅色，觸之較軟，表面光滑；切面不平整、濕潤，存在較多暗紅色血液。鄰近的淋巴結遠大于血淋巴結，呈灰白色。

圖1 灘羊血淋巴結大體解剖學觀察Fig.1 Grossanatomical observation of hemolymph nodesin Tan sheep

2.2 灘羊血淋巴結組織學觀察

2.2.1 低倍鏡下灘羊淋巴結與血淋巴結的結構（見圖2）

由圖2（a）可知，與鄰近淋巴結相比，血淋巴結體積小，外觀也截然不同。

由圖2（b）可知，血淋巴結由被膜和實質組成，且被膜厚薄不一，實質呈紅藍相間的顏色分布，與脾臟相似。血淋巴結皮質位于外周，髓質位于中央。在血淋巴結一側有一個不明顯的門部，可以觀察到動脈、靜脈以及淋巴管等結構分布。

圖2 低倍鏡下灘羊淋巴結與血淋巴結的結構比較（H.E染色）Fig.2 Structural comparison of Tan sheep lymph nodeand hemolymph nodeunder low magnification microscope(H.Estain)

2.2.2 高倍鏡下灘羊淋巴結與血淋巴結的結構（見圖3、圖4）

由圖3（a）可知，灘羊血淋巴結被膜厚薄不一，由平滑肌和致密淋巴組織形成。被膜深入實質較淺，實質內小梁不多見或小梁不發達，未將實質分割成明顯的小葉。被膜下血竇充滿血液，沿皮質內血竇延伸向髓質。

由圖3（b）可知，血淋巴結實質由皮質和髓質組成，兩者之間通過副皮質區過渡。皮質的致密淋巴組織較多，形成大小不一、數量不等的淋巴小結，發育成熟的淋巴小結可見明區和暗區，淋巴小結間可見較多充滿血液的血竇。

由圖3（c）可知，血淋巴結副皮質區內可見較多細胞形態，包括淋巴細胞、漿細胞和紅細胞等，結構與脾臟的邊緣區相似度很高，部分淋巴竇內未見血液存在。

由圖3（d）可知，血淋巴結髓質中血竇分布較多，竇內充滿紅細胞和白細胞，血竇間有彌散的淋巴組織分布，淋巴細胞呈條索狀分布，細胞以淋巴細胞為主。

由圖4（a）可知，與血淋巴結的門部相對一側，被膜內可見數量少、管徑小的淋巴管。由圖4（b）可知，靠近輸入淋巴管一側被膜附近的血管中只有毛細血管充滿血液。由圖4（c）可知，皮質的淋巴小結中可見毛細血管，其內部充滿血液或有少許血液。由圖4（d）可知，髓質中血竇分布更多，切片中觀察到的小動脈和小靜脈內部無血液，大部分髓索間的淋巴竇狹窄，竇內血量較少或無血。

圖4 灘羊血淋巴結的淋巴管和毛細血管（H.E染色）Fig.4 Lymphatic vessels and capillaries of Tan sheep hemolymph node(H.Estaining)

3 討論

關于灘羊血淋巴結的相關內容在文獻中尚未見報道，本文旨在對灘羊血淋巴結的存在和形態結構進行初步的研究。在前期已有的工作基礎上，不難發現腹主動脈沿線的血淋巴結數量較多，故本試驗選擇該區域的血淋巴結進行初步觀察和研究。灘羊血淋巴結的組織結構與已經報道的其他動物的淋巴器官相似，在本文的描述中也沿用已有的專業名詞。

3.1 血淋巴結的分布

并非所有動物體內均存在血淋巴結。已有報道指出，人類[4-5]、牛[6]、綿羊[7]、雙峰駝[8]、山羊[9]、犬[10]、大鼠[11]等體內有血淋巴結的存在，且腹腔中分布較多，軀干等處分布較少。本試驗前期工作中也發現灘羊血淋巴結在大網膜、腸系膜、腹主動脈附近、腎動脈附近等區域均有分布，并非主要分布于皮膚下的疏松結締組織中[8]，且可能在分布區域上存在較大的種屬差異性。

3.2 血淋巴結的形態結構

灘羊血淋巴結大小不一，小的血淋巴結分布于脂肪內或附近，肉眼不易分辨[4]，很難取材，切片制作過程中容易丟失；大的血淋巴結則因顏色更容易分辨。灘羊血淋巴結特征為暗紅色，呈扁圓形、橢圓形，與上述文獻一致。與大多數動物的血淋巴結相同，灘羊的血淋巴結被膜內有平滑肌和致密結締組織，起到協助調節血竇血量的作用。但灘羊血淋巴結的被膜深入實質的部分較少，實質內小梁比淋巴結少。被膜內以及被膜附近可見淋巴管分布，但數量少、管徑小[11]；被膜外的淋巴管和附近的較大的血管均無明顯的充血表現。因此，血淋巴結并不等同于充血的淋巴結[12-13]，而是獨立的淋巴器官。被膜附近可見充滿血液毛細血管，與其鄰近的被膜下也充滿血液，推測紅細胞進入實質后，通過淋巴小結內部或外部的淋巴管和毛細血管之間的吻合進入淋巴管[9,14]。

血淋巴結實質內通過周圍集中分布的淋巴小結和中央彌散的髓索及血竇，可以較清楚地區分外周皮質和內部髓質，皮質和髓質內的血竇充滿血液[4-7]，與其他動物具有異質性[8]。淋巴結的淋巴小結向髓質過渡區域是副皮質區，在灘羊血淋巴結中，類似的區域反而更像脾臟的邊緣區，由紅細胞、淋巴細胞以及其他細胞組成，淋巴小結內的毛細血管充滿血液。該部位毛細血管所起作用是否與毛細血管后微靜脈作用相同，與血液的過濾和淋巴細胞的再循環相關，仍需進一步研究。上述兩種與淋巴結不同的結構，可能即為一般認為的血淋巴結的功能介于淋巴結和脾臟之間的組織學基礎之一。組織切片中可以觀察到，部分皮質和髓質血管內沒有血液，可能是在過濾過程中，血液過濾和淋巴過濾途徑不同，只有部分血管參與輸送紅細胞至血竇或者淋巴竇。

3.3 與血淋巴結的功能和存在相關的疑問

淋巴結并非一成不變，會隨著機體免疫狀態改變，出現、增大、縮小，甚至萎縮消失[15]。與淋巴結具有諸多相似之處的血淋巴結也存在個體大小差異明顯，可能也是因所處免疫狀態不同，出現新生和消亡的變化。靜脈接種病原菌、腫瘤等異物，大鼠的胸腺旁等區域可見血淋巴結出現[16]。一些應激反應過程中，也會在腎上腺、胰腺和胸腺處出現血淋巴結，但這種血淋巴結被認為是淋巴結內含有較多的含鐵血黃素細胞。因此，部分血淋巴結有可能是免疫反應的產物[17]，或是過濾紅細胞的淋巴結[9]。

腹腔淋巴結多與黏膜免疫和局部免疫有關，但血淋巴結的作用并未得到明確肯定。炎癥的擴散和腫瘤的轉移會通過淋巴管蔓延。在腹腔器官發生惡性腫瘤后的治療中，淋巴結清掃程度與治療效果以及惡性腫瘤的復發密切相關[18]，但血淋巴結在腫瘤發生或轉移過程中的角色和作用未見研究報道。血淋巴結過濾血液還是過濾淋巴，血淋巴結、淋巴結和血結是同一結構還是獨立存在，自發現起便爭議不斷，有學者質疑是否因研究者的組織學觀察結果較片面，因而產生了混淆[19]。因此，若能夠應用標記技術或者示蹤定位技術[20-21]對血淋巴結的歸屬進行研究，或許可以解答世紀疑問。

4 結論

綜上所述，結合大體解剖學和組織學的觀察，可以證實灘羊體內存在獨立的淋巴器官——血淋巴結，其形態結構與其他動物既有相似，又有差異。灘羊腹主動脈附近的血淋巴結由被膜和實質構成，血液廣泛地分布于被膜下與實質間的血竇內。灘羊血淋巴結實質由皮質和髓質組成，皮質內有較多的淋巴小結組成，髓質由較多的血竇和彌散淋巴組織組成。