紫稔止血合劑的制備工藝研究

游宏成，郭亞蕾，3，岑敏貴，謝達爍

（1.廣西中醫藥大學，廣西南寧 530200；2.廣西中醫藥大學賽恩斯新醫藥學院，廣西南寧 530022；3.廣西國際壯醫醫院，廣西南寧 530201）

食管、胃、十二指腸或膽胰等臟器病變引發的出血，稱為上消化道出血，多數為中等動脈出血，難以自止。主要臨床癥狀表現為嘔血和黑便，重癥或伴有急性周圍循環衰竭等。據相關統計，我國上消化道出血病死率高達8%～13%，是臨床最常見的急危重癥之一，若不及時搶救和積極治療可危及患者性命[1]。所以快速、有效地止血是臨床救治的關鍵環節。目前西醫針對本病的治療仍局限于止血藥配合抑酸藥，停藥后復發率高，療效并不令人滿意[2]。而采用內鏡止血雖然得到臨床上廣泛的肯定，但對老年患者群體，因其具有合并癥多，以及休克、血紅蛋白低、十二指腸后壁潰瘍、出血速度快遮蓋潰瘍等缺陷，不利于內鏡止血術的順利操作，仍要以藥物治療為主[3]。中醫學對此病具有豐富的理論研究與臨床經驗，歷經數年檢驗療效確切，故目前學界也將治療上消化道出血的研究投向了中醫藥這一偉大的寶庫。

上消化道出血在中醫學中被歸納至“吐血”“嘔血”“便血”等范疇，亦多屬危重癥。其中醫證型可細分為胃熱熾盛證、瘀阻胃絡證、肝火犯胃證、肝胃陰虛證和脾不統血證等[4]。病因多由胃絡損傷所致，概因胃腑本身或他臟受邪而導致胃絡受損，血不循經，溢于胃腸，迫使胃氣上逆，或血隨氣逆，從口吐出，或是隨大便而下。治療血證中醫基本原則有三：治火、治氣、治血，對于血證歷代醫家已有大量論述，如清·唐容川《血證論》中所提出的止血、消瘀、寧血、補虛仍是目前治血應當遵循的四原則。

紫稔止血方經過長期的醫學臨床驗證，功效顯著，療效確切，是上消化道出血中醫治療的常用經驗處方。處方由裸花紫珠、崗稔子、鳳尾草等三味藥物組成，具有清熱化瘀、涼血止血的功效，主治因濕熱困脾、胃中積熱、灼傷胃絡、迫血妄行所致的上消化道出血。本研究擬將紫稔止血方制備成合劑，為該處方的進一步研究與開發奠定實驗基礎。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

電磁爐、湯鍋、水浴鍋、蒸發皿、干燥器、電子秤、計時器、毛細玻管、剪刀、濾紙等。

1.2 材料

裸花紫珠、崗稔子、鳳尾草、紫稔止血合劑（中試樣品）。

2 方法

2.1 紫稔止血湯處方

具體處方：裸花紫珠30g，崗稔子15g，鳳尾草30g。上述3味藥材經本院藥師鑒定均為真品，且符合2020年版《中華人民共和國藥典》以及相關藥品標準對其外觀性狀的描述。

2.2 正交試驗優化提取工藝參數[5]

2.2.1 藥材比例的量取

設計正交試驗因素水平表（如表1所示），依處方比例量取藥材。

表1 中藥復方提取工藝正交試驗因素水平表

2.2.2 出膏率影響因素的考察

按照各對應條件煎煮、濾過、合并濾液（如表2所示），依次置于已干燥到恒重的蒸發皿中行水浴蒸干，行105℃干燥3h，移入干燥器，待冷卻至室溫，迅速精密稱量重量，依據干燥品重量對各對應條件下出膏率進行計算，以出膏率為評價指標，選用L9（34）正交表考察煎煮時間（A）、提取次數（B）、加水倍數（C）對出膏率的影響。

表2 正交試驗設計安排

2.3 驗證試驗

依據正交試驗法所獲得最佳工藝條件再行3次驗證試驗。

2.4 中試試驗[6]

2.4.1 試驗方法

依照處方用量擴大10倍取裸花紫珠300g、崗稔子150g、鳳尾草300g。紫稔止血合劑樣品依照上述已優選出的最佳制備工藝進行制備，分別測定樣品出膏量，并觀察其澄明度，共開展3批試驗。

2.4.2 檢查

參照2020年版《中華人民共和國藥典》附錄合劑項下規定，檢查中試樣品。

2.5 穩定性試驗

選定中試試驗所得到3批成品，每批成品取樣3份，于溫度25℃±2℃，相對濕度60%±10%的環境中放置6個月，分別在0個月、1個月、2個月、3個月、6個月進行取樣，檢測出膏量，完成紫稔止血合劑穩定性研究，考察成品在0、1、2、3、6月份的質量變化。

2.6 數據處理

本研究所獲得的實驗數據均采用SPSS26.0軟件進行數據處理和分析，利用方差分析在制備工藝研究中優選出最佳提取工藝，中試研究、穩定性研究中計量資料均采用“均數±標準差（）”表示。P＜0.05認為有統計學差異。

3 實驗結果

3.1 正交試驗結果

經由表3、表4可知，因素A、B、C 對出膏率的影響顯著（P＜0.05）。結合極差分析、生產成本及生產效率等多方面因素，得出最佳提取工藝為A3B3C2，即：加水8倍量，煎煮1.5h，提取3次。

表3 正交試驗結果

表4 提取工藝方差分析

3.2 驗證試驗結果

通過測定得到出膏率為8.55%±0.11%。

3.3 中試試驗結果

中試試驗3批次出膏量詳見表5。中試樣品檢查符合2020年版《中華人民共和國藥典》附錄合劑項下規定。

表5 中試試驗出膏量（）

表5 中試試驗出膏量（）

3.4 穩定性試驗結果

紫稔止血合劑成品在0、1、2、3、6月出膏量質量變化詳見表6。

表6 穩定性試驗（，單位：g）

表6 穩定性試驗（，單位：g）

3.5 討論

根據紫稔止血方藥物的化學性質和現代藥理研究成果文獻，本處方中裸花紫珠、崗稔子、鳳尾草均為止血類中藥。方中君藥裸花紫珠的止血活性藥效成分以苯乙醇苷類和黃酮類為主，通過影響內源性凝血途徑，或通過同時影響內、外源性凝血途徑起到止血功能[7]。臣藥鳳尾草中的主要成分為黃酮、倍半萜、苯丙素、生物素和揮發油等，藥理研究證實其具備良好的止血、升高血小板的功能，止血機理正是通過升高血小板數量來完成，也是其治療血小板減少性出血的藥理學基礎[8]。方中使藥崗稔子則主要含有桃金娘酚A、沒食子酸、楊梅素等化合物，藥理研究表明該藥能促進血栓形成和血小板聚集，其機制可能為下調血小板環磷酸鳥苷、環磷酸腺苷和一氧化氮水平[9][10]。三藥配伍，能有效促進消化性潰瘍患者的血小板聚集，增強血管收縮，從而發揮本方止血、凝血功效[11]。

經本實驗驗證，通過正交試驗可使試驗次數大幅減少。通過比較極差大小可明確各因素對試驗的影響順序。試驗結果和因素的極差成正比。本次正交試驗設計中極差最大為因素A（煎煮時間），其次為因素B（提取次數），極差最小為因素C（加水倍數）。上述3因素和其交互作用的顯著性可通過試驗誤差SSe2進行檢驗。優選出的最佳提取工藝可以使有效成分得到最大程度保留，生產成本亦得到最大程度節約。本試驗對測定出膏率進行3次重復性試驗，在一定程度上使試驗誤差值減小。

本次中試研究采用經正交試驗優選出的最佳制備工藝進行處方用量擴大10倍的研究，理論上出膏量應約為64g，批次2的出膏量最為接近，批次1的出膏量過少，批次3的出膏量過多，或與3批次所選用藥材原料不同有關。

采用留樣觀察法進行穩定性試驗，本次穩定性研究中9份樣品均具備良好的穩定性，可持續放置12個月乃至更長時間。

4 結語

紫稔止血方作為臨床經驗方，運用于臨床治療的形式大多采用湯劑，現為求改進和創新本處方劑型，以提高臨床應用效率與治療效果，能更廣泛地適用于臨床場景，故進行本次紫稔止血合劑的最優制備工藝研究。本實驗的工藝路線設計為水煎煮提取，盡可能保留原方湯藥劑型優勢。水提工藝過程中，煎煮時間、提取次數和加水倍數等是影響提取效果的主要因素。本實驗設置出膏率為評價指標，針對上述因素的影響著重進行研究。

實驗結果表明，紫稔止血合劑依照裸花紫珠、崗稔子、鳳尾草加8倍水，煎煮1.5h，提取3次的制備工藝提取具備高穩定性，依照上述制備工藝流程進行中試生產亦具備良好的穩定性和可行性，是本合劑的最優制備工藝。經驗證，本工藝設計科學，合理可行，穩定便捷，適用于紫稔止血合劑的制備，可應用于社會工業化生產，并為紫稔止血方的后續研究開發提供實驗依據。