產婦Rh血型系統抗體的檢出特點分析其與新生兒溶血病之間的關系并制定臨床輸血應對對策分析

曲 執 郭美玲

（1 葫蘆島市中心血站，遼寧 葫蘆島 125000；2 葫蘆島市中心醫院，遼寧 葫蘆島 125000）

Rh血型系統較為復雜，已被檢測出的抗原54種，Rh血型抗體檢出率比較高且常會造成免疫溶血性輸血反應，導致交叉配血困難和紅細胞輸注無效，新生兒溶血病中Rh系統占有達到35.00%，不利于新生兒生長和發育。為了更好地進行輸血和后續的治療，本文針對本院2016年12月至2019年12月期間進行備血的孕產婦作為觀察對象，分析孕產婦Rh血型系統抗體的檢出特點，和新生兒溶血病之間聯系，并制訂出正確的輸血方案。

1 資料與方法

1.1 一般資料 本文的105例孕產婦數據均是選取于在本院進行備血的孕產婦，所選時間區間為2016年12月至2019年12月。其中，年齡上限在44歲，下限在25歲，平均年齡在（28.5±6.00）歲，妊娠2～4次，妊娠（2.30±1.10）次。參與研究過程的對象知情同意并簽署知情同意書，本研究已獲得我院倫理委員會的批準。

1.2 試驗方法 選擇不規則的抗體細胞Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和譜紅細胞、抗人球蛋白微柱凝膠卡以及專業的血型孵育器、離心機，各種單克隆抗-D、C、c、E、e。主要的檢測方式如下。

1.2.1 紅細胞不規則抗體檢測 孕產婦本身的紅細胞參照管和Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ不存在凝集者沒有檢測出紅細胞不規則抗體；本身參照管沒有凝集，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ之間有一個管出現了凝集，即說明進行檢測的對象血清或者血漿中存在免疫性紅細胞不規則抗體[1]。

1.2.2 紅細胞不規則抗體特異性鑒定方式 取出凝柱凝膠抗球蛋白卡兩個，將12個微孔分別標為1～10、本身參照、陽性參照，之后在已經標好的1～10個微孔里依次加入1～10號配對的譜紅細胞，分別為50 μL，本身參照中加入含量為1%的紅細胞懸液50 μL，陽性參照中加入含量為1%O型RhD陽性紅細胞懸液50 μL，在標好的1～10和本身參照的微孔中加入進行試驗對象的血清或者血漿50 μL，陽性參照孔中加入IgG抗-D試劑[2]，劑量為50 μL，倘若12個微孔全部為陽性為非特異性抗體或者是伴有特異性抗體。1～10號中的微孔有一個或者多個呈現出陽性，則為特異性抗體，可依據陰、陽性反應的格局，參照譜紅細胞抗原普鑒定抗體的特異性。

1.2.3 孕產婦Rh血型抗體免疫球蛋白的區別 采用鹽水介質法鑒定IgM血型抗體的效價，效價和裂解前和相同血型抗原紅細胞沒有產生變化的試驗者則為IgG抗體，有變化的則為IgM類，效價和裂解之前出現了明顯的下降，且會有凝集反應，則歸為IgG+IgM抗體[3]。

1.2.4 孕產婦Rh血型抗體效價的鑒定 將已經裂解的血清，按照比例進行稀釋（1∶8、1∶16、1∶32、1∶64、1∶128、1∶256、1∶512、1∶1 024），再選擇相對應的抗球蛋白加入，離心后記錄結果[4]。

1.2.5 新生兒溶血試驗 選擇新生兒的50 μL紅細胞懸液，洗滌之后進行抗球蛋白的試驗；并且也需要進行紅細胞放散試驗，方法如下：選擇新生兒積壓的紅細胞1～2 mL，用生理鹽水進行洗滌，一共洗滌4次，最后一次洗滌完將其放在另一個試管內，列為參照，之后用洗滌之后的壓積紅細胞在溫度為56 ℃下進行熱放散。微柱凝膠抗球蛋白血漿和紅細胞放散液依次和篩選的細胞進行反應，對于紅細胞的不規則抗體檢查的方式和“1.2.2”相同。

1.3 觀察指標 ①記錄產婦Rh血型不規則抗在本院備血標本的檢出率和分布情況。②記錄孕產婦檢出Rh血型不規則抗體特異性分布，包含：抗-E、抗-D、抗-c、抗-cE、抗-C。③記錄50例Rh血型抗體類型以及檢出Rh血型抗體的效價情況、新生兒溶血病的結果。

1.4 統計學處理 將本次研究中的105例孕產婦數據應用于SPSS19.0進行軟件處理，計數資料采用率（%）表示，P＜0.05說明數據間差異較大，具有統計學意義。

2 結果

2.1 產婦Rh血型不規則抗在本院備血標本的檢出率和分布情況 105例就診的孕產婦中，早期Rh血型抗體陽性檢出50例，檢出率為47.62%，20例為妊娠史，占比40.00%，妊娠超過兩次以上的13例，占比26.00%；輸血史4例，占比8.00%，既有妊娠史也有輸血史的1例，占比2.00%。

2.2 孕產婦檢出Rh血型不規則抗體特異性分布 30例為抗-E，8例為抗-D、6例為抗-c、4例為抗-cE、2例抗-C。見表1。

表1 孕產婦檢出Rh血型不規則抗體特異性分布

2.3 50例Rh血型抗體類型 50例孕婦抗體免疫球蛋白類型分別是28例為IgG，占比56.00%，15例為IgG+IgM，占比30.00%，7例為IgM，占比14.00%，在37 ℃下都會和相應的紅細胞產生凝集反應，即說明臨床有意義。

2.4 檢出Rh血型抗體的效價情況 IgG效價為512、256、128、64、32、16的孕產婦分別為3、5、8、15、16、3例。50例抗-E，抗-D、抗-c、抗-cE、抗-C效價在16～512，且效價在64以上的全部為IgG。

2.5 新生兒溶血病的結果 50例Rh血型抗體陽性的孕產婦中，新生兒進行紅細胞直接抗球蛋白試驗和紅細胞放散試驗，結果均為陽性，新生兒溶血病的試驗結果鑒定放散液抗體和母親的Rh血型抗體完全吻合，證明8例新生兒的血清抗體能夠通過胎盤進行凝結破壞了胎兒的紅細胞，3例為IgG抗-D，2例為IgG抗-E、2例為IgG抗-c，1例為IgG抗-cE。見表2。

表2 新生兒溶血病的結果

3 討論

人體紅細胞有30多個血型系統，其中Rh血型系統最復雜，表達的血型抗原就達到54個，目前試驗已經確定最為密切的抗原為D、E、C、c、e，五種抗原D最強，且還會存在弱D和部分的D等變異，進行輸血也比較復雜。母體妊娠時候胎兒紅細胞通過胎盤進入母體或者是RhCE非同輸血等相同的免疫刺激產生了相同的抗體，嚴重者會導致免疫溶血性輸血反應，增加了新生兒溶血病的概率。不規則抗體陽性和嚴重的新生兒溶血病一般都是Rh抗體造成的[5]，新生兒會出現惡性貧血、水腫、黃疸，病情嚴重的患兒還會出現核黃疸。新生兒溶血的發病和Rh血型抗體的數量、效價等有著緊密的關系。初期進行新生兒溶血病的檢查采用羊水穿刺進行，這存在一定的危險性[6-9]。因此對于妊娠史、輸血史等夫婦Rh血型檢測和產前動態的檢測孕產婦體內的Rh血型抗體的變化有關系。

在輸血的時候應當將RhE列為孕婦常規檢測且進行RhDE同型輸血，這會減少抗-E產生概率，避免不良事件的發生[10-13]，并且對于檢出高效價的IgG型Rh抗體的孕婦，在妊娠中晚期需要每2周進行一次監測[14-16]，當效價超過512則需要進行血漿置換治療；另外還需要針對既有妊娠史也有輸血史的孕產婦、反復輸血的孕產婦等，提高Rh血型抗原的分析，確定抗原E、C、c、e的分布頻率，組建抗-c、抗-e稀有的血液供血群，確保輸血安全，降低Rh-HDN的發生。

綜上所述，妊娠或者輸血等是造成Rh血型抗體的主要因素，母親的Rh血型抗體會造成Rh-HDN，在輸血的時候應當檢測夫婦RhCE抗原常規檢測，選擇相同的血型進行輸血，以此減少意外抗體的概率。