妊娠期HPV感染孕婦CD4+、CD8+和CD4+CD8+水平與母嬰結局的關系

梁雪靜 黃金 蔡貞玉

人乳頭瘤病毒（Human papillomavirus，HPV）是以人類為唯一宿主的DNA 病毒，傳播途徑以性接觸傳播為主，具有極強的傳染性，可導致生殖器尖銳濕疣、誘發宮頸癌等［1?2］。HPV 感染多好發于育齡期女性，近年來，HPV 引發的感染尤其是在孕婦生殖道感染的發病率呈逐漸上升趨勢［3］。相關報道顯示，隨著女性年齡增長，免疫功能、內分泌功能逐漸衰退，對HPV 的清除與抵御能力亦隨之變弱，加之生殖道微生態環境紊亂，可能導致HPV持續感染［4］。HPV 感染及其進展過程與可能人體免疫功能下降存在密切聯系。淋巴細胞是人體重要免疫細胞之一，本研究通過檢測妊娠期HPV 感染孕婦的T 淋巴細胞亞群水平，旨在分析其T 淋巴細胞亞群水平變化情況及與母嬰結局的關系。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集2018年10月至2020年10月航空總醫院收治的96 例HPV 感染孕婦納入HPV 組，平均年齡（30.85±3.88）歲。納入標準：①17 種高危型人HPV核酸檢測陽性者；②具有完整資料者；③在本院建卡、按規定進行產檢并隨訪至分娩；④分娩孕周≥28周，單胎妊娠；排除標準：①意識、溝通障礙者；②合并心、肝、肺等臟器惡性疾病者；③合并陰道出血、多囊卵巢綜合征等；④伴有各種急慢性疾病、免疫性疾病者。另選取同期76 例HPV 陰性的正常孕婦作為對照組，平均年齡（29.67±2.47）歲。兩組一般資料比較差異無統計學意義（P>0.05）。本研究經院醫學倫理委員會批準通過，受試者均簽署知情同意書。

1.2 方法

1.2.1 T 淋巴細胞亞群檢測

抽取兩組孕婦清晨空腹靜脈血3 mL，置入肝素鈉抗凝管內，顛倒混勻3 次，標本鑒定合格后，編管；隨后在試管中加入標準抗體，同時加入標準量的抗凝全血至管底，振蕩混勻，陰暗處放置15～20 min；加入溶血素，溶解紅細胞；避光室溫至完全溶血，24 h內檢測T 淋巴細胞亞群。采用貝克曼流式細胞儀檢測患者外周血T 淋巴細胞亞群，詳細操作按配套試劑盒進行檢測。參考范圍［5］：CD4+<35%為降低；CD8+>20%為增高；CD4+CD8+<1.4 為降低。

1.2.2 母嬰結局

根據母嬰結局情況將HPV 組分為不良妊娠組與正常妊娠組。不良妊娠結局：早產、胎膜早破、胎兒生長受限、新生兒呼吸窘迫綜合征、產后出血、產褥感染、死胎等［6］。

1.3 統計學方法

采用SPSS 22.0 統計軟件進行統計分析，計量資料以（）表示，采用t檢驗；計數資料以n（%）表示，行χ2檢驗；采用ROC 曲線分析CD4+、CD8+、CD4+CD8+對HPV 感染孕婦母嬰結局的預測價值；采用多元Logistic 回歸分析影響HPV 感染孕婦母嬰結局的獨立危險因素，以P<0.05 為差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組CD4+、CD8+、CD4+CD8+水平比較

HPV 組CD4+、CD4+CD8+水平均低于對照組，CD8+明顯高于對照組，差異均有統計學意義（P<0.05）。見表1。

表1 兩組CD4+、CD8+、CD4+CD8+水平比較（±s）Table 1 Comparison of CD4+，CD8+，CD4+CD8+levels between the two groups（±s）

表1 兩組CD4+、CD8+、CD4+CD8+水平比較（±s）Table 1 Comparison of CD4+，CD8+，CD4+CD8+levels between the two groups（±s）

組別HPV 組對照組t 值P 值n 96 76 CD4+（%）23.41±4.14 31.25±7.32 8.860<0.001 CD8+（%）30.41±6.15 22.34±3.62 10.131<0.001 CD4+CD8+（%）0.51±0.32 1.78±0.24 28.774<0.001

2.2 HPV 感染孕婦母嬰結局情況及其單因素分析

96 例HPV 感染孕婦中，不良妊娠結局發生率為20.83%（20/96），其中早產3 例，胎膜早破6 例，胎兒生長受限5 例，新生兒呼吸窘迫綜合征6 例。單因素分析顯示，不良妊娠組妊娠年齡、高危型HPV 感染、CD4+、CD8+、CD4+CD8+水平與正常妊娠組比較具有統計學意義（P<0.05）。見表2。

表2 HPV 感染孕婦母嬰結局情況及其單因素分析［n（%）］Table 2 Maternal and infant outcomes of pregnant women infected with HPV and its univariate analysis［n（%）］

2.3 影響HPV 感染孕婦母嬰結局的多因素logis?tic 回歸分析

經非條件多因素logistic 回歸模型分析得，年齡>35 歲、高危型HPV 感染、CD4+降低、CD8+增高、CD4+CD8+降低是導致HPV 感染孕婦母嬰不良結局的獨立危險因素（P<0.05）。見表3。

表3 影響HPV 感染孕婦母嬰結局的多因素logistic 回歸分析Table 3 Multivariate logistic regression analysis of the maternal and infant outcomes of pregnant women with HPV infection

2.4 CD4+、CD8+、CD4+CD8+對HPV 感染孕婦母嬰結局的預測價值

ROC 曲線顯示，CD4+、CD8+及CD4+CD8+聯合檢測曲線下面積（AUC）、敏感度、特異度均高于各項指標單獨檢測（P<0.05）。見表4、圖1。

表4 CD4+、CD8+、CD4+CD8+對HPV 感染孕婦母嬰結局的預測價值Table 4 The predictive value of CD4+，CD8+，CD4+CD8+on the maternal and infant outcome of HPV?infected pregnant women

圖1 ROC 曲線分析Figure 1 The ROC curve

3 討論

女性HPV 感染在婦科臨床較為常見，尤其是妊娠期女性。妊娠期是女性的特殊時期，母體機體免疫功能尤其是細胞介導的免疫功能受到抑制，大大降低了機體抗病毒的能力；其次妊娠期盆腔血供豐富，體內雌孕激素水平增高，機體免疫功能下降，使得病毒、細菌易感性增高［7］。據相關資料顯示，我國女性HPV 感染率約為25%左右，孕婦HPV 感染率約為16.8%［8］。國內外報道認為，細胞免疫是抗病毒免疫的主要方式，而淋巴細胞是細胞免疫系統的主要細胞［9?10］。T 淋巴細胞是一組免疫細胞，參與機體細胞免疫反應并起主導調節作用。

HPV 病毒感染會激發機體的特異性免疫，細胞免疫在控制HPV 的激活與消退中起主要調節作。Donmez 等［11］認為，對HPV 病毒清除起較大作用的是T 淋巴細胞亞群。CD4+細胞是T 淋巴細胞亞群之一，可通過直接或分泌腫瘤壞死因子、干擾素等細胞因子，抑制病毒復制。當機體發生免疫病理改變時，CD4+細胞數量會明顯減少、細胞功能受損。李琦等［12］亦發現，與正常對照組比較，HPV感染組CD4+明顯降低。此外，機體異常免疫改變還表現在CD8+細胞表達增高。CD8+細胞具有很好的監控和殺傷功能。在HPV 感染早期，CD8+表達常高于正常人，且患者免疫功能亦會出現異常［13］。CD4+/CD8+比值則是重要的免疫狀態的檢測指標，其比例的降低與免疫系統損傷的程度相關［14］。在正常人群中CD4+/CD8+比值為0.7～2.8，當<0.20 時，HPV 感染者機會性感染率會明顯增高，且隨病情進展同時發生多種機會性感染的風險會大大增高［15］。本研究中，與正常孕婦相比，HPV 組孕婦CD4+、CD4+CD8+均降低，CD8+明顯增高，與上述文獻報道相符。說明HPV 感染孕婦的免疫平衡遭到破壞，容易出現免疫紊亂情況。

由于妊娠期生殖系統功能的特殊性，導致生殖道HPV 感染不僅會對母體造成影響，還可能通過垂直傳播的方式造成胎兒及新生兒感染，進而誘發不良妊娠結局［16?17］。符劍花等［18］發現，HPV感染孕婦不良妊娠結局發生率為25%左右。本研究略低于上述報道，推測可能與納入樣本量、孕婦自身差異等因素有關。進一步logistic 回歸模型分析發現，T 細胞淋巴亞群CD4+、CD8+、CD4+CD8+是導致HPV 感染孕婦發生不良妊娠結局的危險因素。推測其原因可能是由于相關蛋白酶釋放失衡、免疫系統功能紊亂導致細胞外基質降解，破壞宮頸完整性，導致其軟化并擴張，發生胎膜早破、早產等，且免疫平衡的破壞對妊娠的建立及維持均有不利影響［19?20］。ROC曲線分析結果顯示，CD4+、CD8+、CD4+CD8+均可有效預測HPV 感染孕婦母嬰結局，且聯合檢測預測效能更佳。

綜上所述，妊娠期HPV 感染孕婦CD4+、CD8+、CD4+CD8+水平存在異常表達，免疫功能紊亂，三者可作為預測HPV 感染孕婦母嬰結局的輔助指標。