綿陽市2021年春季重大動物疫病免疫抗體的監測與分析

張 輝，何慶雄，黃燕平，陳宇航，王正義，周小藝*

（1.四川省動物疫病預防控制中心，四川 成都 610041；2.四川省綿陽市動物疫病預防控制中心，四川 綿陽 621000）

1 材料與方法

1.1 試劑及儀器 高致病性禽流感H5、H7 檢測抗原，均為哈爾濱維科生物技術有限公司生產。豬瘟病毒抗體檢測試劑盒，口蹄疫免疫抗體檢測競爭ELISA 試劑盒，羊小反芻獸疫抗體檢測試劑盒，均為武漢科前生物股份有限公司生產。酶標儀型號及廠家：iMark?Microplate Reader，美國伯樂（Bio-Rad）公司生產。

1.2 樣品采集與檢測

1.2.1 研究類型 橫斷面研究。

1.2.2 抽樣策略 本次監測采用分層抽樣的策略，按規模養殖場、散養戶、活禽交易場所分為3個層，在各個縣分別對規模場、散養戶、交易場所等地點隨機采樣。

每個縣抽查2 個規模養禽場（1 個雞場、1 個水禽場），2 個規模養畜場（原則上1 個豬場、1 個牛場或羊場），每個規模養殖場采集血清樣品15份；每個縣抽查2個鄉鎮，每個鄉鎮隨機抽查至少5 個散養戶，分別采集牛（羊）、禽血清樣品各10份，對抽查的散養戶逐戶登記采樣；每個縣抽查2個活禽交易場所，每個交易場所采集家禽血清樣品10份。本次監測剔除編號不規范、包裝不合格的樣品后共計血清樣品1 248份。

1.2.3 抗體檢測及結果判定 通過ELISA 試驗對豬瘟、口蹄疫、小反芻獸疫進行抗體檢測，通過血凝與血凝抑制試驗對高致病性禽流感進行抗體檢測。高致病性禽流感根據《高致病性禽流感診斷技術》（GB/T 18936-2020）標準，采用血凝抑制試驗（HI）方法進行抗體檢測，抗體效價≥24判為合格。豬瘟根據《豬瘟診斷技術》（GB/T 16551-2020）標準，采用單抗酶聯免疫吸附試驗進行檢測，按照試劑廠商說明書判定是否合格。口蹄疫根據《口蹄疫診斷技術》（GB/T 18935-2018）標準，采用間接酶聯免疫吸附試驗進行檢測，按照試劑廠商說明書判定是否合格。小反芻獸疫按照《小反芻獸疫診斷技術》（GB/T 27982-2011）標準，采用單抗酶聯免疫吸附試驗進行檢測，按照試劑廠商說明書判定是否合格。

1.2.4 抗體水平合格率 合格數與檢測數的比值即為合格率，再使用@Risk 軟件通過β分布進行仿真模擬（@Risk 版本7.52，仿真迭代10 000次）取得95%置信區間（95%CI）上下限。P＜0.01表示差異極顯著，P＜0.05表示差異顯著，P＞0.05表示無顯著差異。

2 結果

2.1 規模場抗體合格率 綿陽市規模場免疫抗體總體合格率達到87.57%（95%CI：83.80%～92.50%）。其中，抗體合格率最高的是雞H5亞型高致病性禽流感，合格率為98.46%（95%CI：95.60%～99.40%），最低的是水禽H7亞型高致病性禽流感，合格率為70.83%（95%CI：66.70%～74.20%），達到農業農村部規定標準（表1）。

表1 規模場抗體合格率

2.2 散養戶抗體合格率 綿陽市散養戶免疫抗體總體合格率達到82.66%（95%CI：75.10%～88.40%）。其中，抗體合格率最高的病種是牛O型口蹄疫，合格率為95.50%（95%CI：89.90%～98.00%），最低的是牛A 型口蹄疫，合格率為74.73%（95%CI：64.90%～82.50%），達到農業農村部規定標準（表2）。

表2 散養戶抗體合格率

2.3 活禽交易場所的抗體合格率 綿陽市活禽交易場所的免疫抗體總體合格率達到90.88%（95%CI：86.40%～95.00%）。其中，抗體合格率最高的病種是雞HPAI（H5），合格率為93.63%（95%CI：88.70%～96.50%），最低的是水禽HPAI（H7），合格率為76.92%（95%CI：73.00%～80.10%）。經計算，不同病種抗體合格率方差為0.05，離散情況較明顯（表3）。

表3 活禽交易場所的抗體合格率

2.4 群間分布 表4中，按照抗體合格率由高到低排序，活禽交易場所（90.88%）＞規模場（87.57%）＞散養戶（82.66%）。3個類型養殖單元間的抗體合格率在統計學上有差異（P＜0.05）。

表4 不同類型養殖單元抗體合格率的群間分布

表5中，按照抗體合格率由高到低排序，高致病性禽流感（88.00%）＞羊小反芻獸疫（87.05%）＞口蹄疫（83.84%）＞豬瘟（81.58%）。4個動物病種的抗體合格率在統計學上有差異（P＜0.05）。

表5 不同病種抗體合格率的群間分布

3 討論

3.1 整體抗體合格率達到規定標準 重大動物疫病嚴重威脅我國畜禽養殖業平穩發展，目前國家、省級要求對口蹄疫、高致病性禽流感、豬瘟、小反芻獸疫等動物疫病進行強制免疫，通過提高個體免疫抗體水平、提升群體免疫密度的方式減少易感動物感染率。及時掌握免疫抗體情況，對科學評估本地區的強制免疫效果十分重要［1-2］。根據相關要求，重大動物疫病群體免疫密度應常年維持在90%以上，免疫抗體合格率保持在70%以上。從檢測結果看，綿陽市4 個強制免疫病種的抗體合格率均在70%以上，達到國家規定要求，表明全市2021 年春季集中免疫工作達到了預期效果。

3.2 規模場免疫效果好于散養戶 監測結果顯示，規模化養殖場均有較高的抗體合格率，其中規模化養牛場、養羊場和養禽場的免疫抗體平均合格率為88.41%，比散養戶高出5.75 個百分點，規模化養殖場的免疫效果明顯好于散養戶。一方面原因是相較于中小養殖場，規模化養殖場具有高效益、精細化管理和科學化飼養等方面的優勢［3-4］；第二方面原因是規模化養殖場有較強的生物安全防護意識，而散養戶的防疫主體意識較為淡薄，科學養殖意識不足［5］；第三方面原因是規模化養殖場的駐場獸醫師的年齡結構、專業知識和技術水平都優于村級動物防疫員，從側面反映出基層動物防疫體系建設亟待加強。

3.3 禽流感多價滅活疫苗顯示出不同的免疫效果 監測數據顯示，禽類H5 亞型的免疫抗體合格率明顯高于H7 亞型。經調查，綿陽市各地高致病性禽流感強制免疫均使用重組禽流感病毒（H5＋H7）三價滅活疫苗，說明此疫苗中H5 亞型的免疫原性更佳。謝向萌等［6］進行的重組禽流感（H5＋H7）二價滅活疫苗田間試驗表明，在免疫后21 d，H5 亞型和H7 亞型的抗體合格率分別為93%、53%，但在免疫后35 d（加強免疫后14 d），二者均達到100%，說明在免疫21 d 后再加強免疫的效果明顯。

3.4 水禽禽流感免疫效果尚有差距 高致病性禽流感的總體抗體合格率為88.00%，其中雞的合格率為90.37%，水禽的合格率為80.12%。水禽免疫抗體合格率較低是由于肉鴨等飼養周期短，且平時放養于稻田及水塘，導致免疫工作開展難度大［7］，另外，綿陽市位于野鳥遷徙路線，轄區內涪江流域是野鳥棲息地，存在一定的禽流感傳播風險［10］。

4 小結

從總體情況來看，2021 年春季綿陽市重大動物疫病強制免疫抗體水平超過農業農村部規定的標準（70%）。不同類型養殖單元的抗體水平差異較大，不同病種之間免疫效果的差異也較大。在今后的防控策略制定中，應重點加強村級動物防疫員的業務技術培訓和散養戶防疫主體意識的養成教育，免疫工作應強化林下養殖、水禽養殖、家禽散養等薄弱環節。■