內脂素在穩定性冠心病及ST段抬高性心肌梗死患者血清中表達水平的研究

董 哲，劉曉飛，張 虎，王 放，李 菁

（中日友好醫院 心臟科，北京 100029）

冠心病在我國發病率呈逐年升高趨勢，已成為嚴重危害國民生命健康安全的重要疾病之一。眾多的研究發現，脂肪組織分泌的脂肪因子，在冠狀動脈硬化的發生、進展中發揮著至關重要的作用。在這些脂肪因子中，血清內脂素（visfatin）因其分布的廣泛性及生物功能的多樣性而備受關注。內脂素是2005年由Fukuhara 等在內臟脂肪組織中首次發現的高表達脂肪細胞因子。目前的研究證實其與糖脂代謝、胰島素抵抗、肥胖、炎癥、動脈粥樣硬化等多種病程密切相關[1]。本研究回顧分析了我院心臟科就診的急、慢性胸痛患者的外周動脈血清中內脂素的表達水平，旨在探討內脂素與冠心病病情進展程度的相關性。

1 資料與方法

1.1 研究對象

選取2016年1月～2017年1月在中日友好醫院心臟科就診的急、慢性胸痛患者共297 例，所有入選患者均接受了冠脈造影檢查。其中196 例根據心肌梗死全球統一定義（第三版）診斷為ST 段抬高性心肌梗死（ST-segment elevation myocardial infarction，STEMI）而入選STEMI 組，41 例慢性胸痛患者經冠脈造影證實冠狀動脈至少1 支血管存在50%～90%的固定狹窄，結合患者勞力性心絞痛的癥狀診斷為穩定性冠心病（stable coronary artery disease，SCAD）而入選SCAD 組，60 例患者經冠脈造影證實冠狀動脈不存在固定狹窄而入選對照組。所有患者均簽署研究入組知情同意書。本研究經過中日友好醫院倫理委員會審核批準（倫理編號2019-67-K46）。

1.2 研究方法

整理收集各組入選病例入院時的年齡、性別、BMI（體重指數）、收縮壓、舒張壓、吸煙史、煙酒史、糖尿病病史、高血壓病史等信息。獲取入院時即刻抽取的外周靜脈血的生化化驗中的總膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇（low-density lipoprotein cholesterol，LDL-C）、甘油三酯、糖化血紅蛋白等指標水平。生化指標的檢測由檢驗科生化室在生化自動分析儀上（美國貝克曼AU5800）完成。

1.3 外周血血清內脂素水平檢測

所有入選患者均在導管室完成了冠脈造影檢查以評估冠脈病變水平。造影前，在完成動脈入路（橈動脈或股動脈）的穿刺并置入鞘管后，立即經鞘管抽取動脈血樣標本20ml（經鞘管給予肝素抗凝前完成標本抽取），離心并獲得血清，-80℃冰箱保存，使用ELISA 法（ab267658，Abcam，英國）測量血清中內脂素水平。

1.4 統計學方法

應用SPSS25.0 統計學軟件分析研究數據。正態分布的連續變量表示為均數±標準差（±s），組間比較采用方差分析；非正態分布的連續變量表示為中位數M（P25，P75），組間比較采用非參數秩和檢驗。分類變量以頻數及頻率（%）表示，組間比較采用χ2檢驗或Fisher 精確檢驗比較。通過單因素和多因素Logistic 回歸分析篩選STEMI 的獨立危險因素，將單因素分析中有統計學意義（P＜0.1）的變量納入多因素回歸分析。血清內脂素水平與診斷相關性比較采用ROC曲線進行描述。

2 結果

2.1 研究對象的基線資料

表1示，3 組研究對象的年齡、BMI、入院舒張壓水平、飲酒史、高血壓病史、糖化血紅蛋白水平均無統計學差異。STEMI 組的男性患者、吸煙史患者較對照組占比更高，與SCAD 組相比無統計學差異。STEMI 組的甘油三酯水平較SCAD 組更高，與對照組比較無統計學差異。STEMI 組的入院收縮壓水平、總膽固醇水平、低密度脂蛋白膽固醇水平較對照組和SCAD 組均顯著升高（P＜0.01）。SCAD 組有糖尿病病史的患者較正常對照組比例更高（P＜0.01）。

表1 3組患者的基線資料比較

2.2 內脂素水平與冠心病病情程度相關

與正常對照組相比，SCAD 組和STEMI 組的血清內脂素水平均顯著升高，且分別具有統計學意義（P＜0.01）。同時，STEMI 組患者血清內脂素水平（9.1ng/ml）是3組中最高的（P＜0.01）（表1）。

2.3 內脂素水平升高是冠心病患者發生STEMI的獨立危險因素

進一步對SCAD 組與STEMI 組患者進行單因素分析（表2）。選取有意義（P＜0.1）的變量（男性、糖尿病、總膽固醇、LDL-C、甘油三酯和內脂素）進行多因素Logistic 回歸分析。發現內脂素水平（OR：1.268，95%CI：1.138～1.413，P＜0.01）與LDLC 水平（OR：1.907，95%CI：1.180～3.308，P＜0.01）是冠心病患者發生STEMI 的獨立危險因素（表3）。內脂素每升高1ng/ml，冠心病患者發生STEMI的風險增加27%。

表2 穩定性冠心病與STEMI患者的單因素分析

表3 冠心病患者發生STEMI的多因素logistic回歸分析

2.4 內脂素水平具有良好的STEMI診斷價值

進一步評價外周血內脂素水平診斷STEMI的價值，ROC曲線分析顯示，外周血內脂素水平診斷冠心病患者發生STEMI 的曲線下面積為0.766（95%CI：0.695～0.837，P＜0.01）（圖1）。當外周血內脂素水平截斷值為8.3ng/ml時，診斷STEMI的敏感度是60.2%，特異度為82.9%，陽性似然比為3.5，陰性似然比為0.48，提示其用于診斷冠心病患者發生STEMI時具有良好的診斷效能。

圖1 外周血內脂素診斷冠心病患者發生STEMI的ROC曲線

3 討論

1994年，Samal 從人外周淋巴細胞cDNA 基因庫中分離出一種有利于B 細胞前體克隆擴增和分化的蛋白，當時命名為前B 細胞集落增強因子（pre-B cell colony enhancing factor，PBEF）[2]。此后，該蛋白被證實是一種與細胞周期密切相關的細胞內蛋白，是煙酰胺腺嘌呤二核苷酸（nicotinamide-adenine dinucleotide，NAD）生物合成的限速酶，因而被命名為尼克酰胺磷酸核糖轉移酶（nicotinamide phosphoribosyltransferase，Nampt）[3]。2005年，Fukuhara 等在Science 雜志報道了一種由內臟脂肪組織特異性高表達并分泌的脂肪細胞因子，當時命名為內臟脂肪素，簡稱內脂素，因其具有類胰島素效應而引起了廣泛關注[1]。經測序證實，visfatin 的cDNA 片段與PBEF 的5’端非編碼區的基因序列一致，這說明visfatin、PBEF、Nampt 是同一種蛋白的不同名稱，而visfatin、PBEF 則是Nampt的細胞外蛋白分泌形式，本文中將上述3種統一簡稱為內脂素。

內脂素分布極為廣泛，除在各種脂肪組織如內臟脂肪、血管外膜脂肪組織、心包脂肪組織表達外，還可在活化的淋巴細胞、巨噬細胞、肝臟、脾臟、胰腺、心肌細胞、神經元細胞等多種人體組織與細胞內表達和分泌[4～8]。內脂素的廣泛分布說明了其具有復雜而多樣的生物學功能，而其諸多生物學功能均與動脈粥樣硬化發生、發展密切相關。首先，內脂素在整個脂質代謝過程中發揮著重要作用，它可通過旁分泌作用于人體內脂肪組織，促進脂肪組織的合成、分化和積聚[4，8]。血清內脂素水平可以作為一項獨立變量與腰臀比、總膽固醇水平及LDL-C 水平呈正相關，并且與HDL-C 水平呈負相關，這提示內脂素可能通過參與脂質代謝影響AS 粥樣斑塊的發生及發展[9，10]。其次，血清內脂素水平在肥胖、類風濕關節炎、敗血癥等多種急慢性炎癥疾病中均明顯升高，并且與人單核細胞趨化蛋白1（MCP-1）、白細胞介素-6、超敏C 反應蛋白（hs-CRP）等炎癥標志物呈顯著正相關，提示內脂素可能作為敏感的炎癥反應標志物，反映機體的炎癥水平及疾病程度[11～15]。第三，既往針對54 例STEMI 患者的小樣本臨床研究觀察到，血清內脂素的水平在STEMI 患者中顯著升高，其峰值在急診經皮冠狀動脈介入治療（primary percutaneous coronary intervention，

PPCI）后24h左右，在PPCI后1周左右回落至正常范圍。此外，入院時基線內脂素水平與患者的冠脈病變數存在相關性，并且與肌鈣蛋白I、肌酸激酶-MB（CK-MB）、腦鈉肽（BNP）的峰值相關，這提示STEMI患者入院基線內脂素水平可能反映其冠脈病情及預后情況[16]。更為重要的是，近期的研究還在體外動物試驗中證實了內脂素可以通過加劇機體炎癥反應水平，直接促進動脈粥樣硬化的進展[17]。

本研究發現SCAD 組和STEMI 組研究對象血清內脂素水平較正常對照組均顯著升高，STEMI的患者血清內脂素水平較SCAD 組進一步升高，證實內脂素可以作為一項有意義的生物學標志物來反映冠心病的發生及病情程度。隨后，我們證實了內脂素水平升高是冠心病患者發生STEMI的獨立危險因素，內脂素每升高1ng/ml，冠心病患者發生STEMI 風險增加28%。最后，我們通過ROC曲線分析證實了內脂素升高對于STEMI的診斷具有良好的診斷價值，說明血清內脂素水平可以用于診斷STEMI的發生。近期研究還發現內脂素的升高水平與STEMI 患者2年的心血管不良事件發生率密切相關，從而提示內脂素具有預測STEMI患者預后的價值[18]。當然，本研究是一個單中心小樣本研究，仍需要更大樣本的研究驗證。