紫杉醇聯合順鉑對晚期食管癌患者癌細胞增殖及侵襲活性的影響

賀軍領

洛陽市第六人民醫院腫瘤科，河南 洛陽 471003

食管癌（EC）為臨床發病率較高的一種消化道腫瘤，嚴重影響患者生命健康。由于EC早期診斷率較低，故大部分患者病情在確診時已發展至晚期階段，已錯過手術治療的最佳時機，具有較高的病死率［1］。化療為晚期食管癌（AEC）的主要治療手段之一，其主要目的在于延長患者生存期，5氟尿嘧啶聯合順鉑為AEC患者常用化療方案，可有效控制局部腫瘤進展，但毒副反應相對較多。紫杉醇是一種新型抗微管藥物，在乳腺癌、肺癌等多種惡性腫瘤中應用廣泛，具有良好抗腫瘤效果，同時毒副反應相對較少，有助于改善患者生存質量［2-3］。本研究旨在分析紫杉醇聯合順鉑治療AEC患者對癌細胞增殖及侵襲活性的影響，現報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

按照依據住院病歷號將洛陽市第六人民醫院腫瘤科2018年7月—2020年5月接收的80例AEC患者分為對照組與觀察組，每組各40例。對照組男性23例，女性17例；年齡42～70歲，平均年齡（58.62±3.25）歲；病程11個月～35個月，平均病程（21.23±3.02）個月；腫瘤直徑1～8 cm，平均腫瘤直徑（4.06±1.16）cm；體重指數18～25 kg/m2，平均體重指數（21.63±1.27）kg/m2；癌胚抗原（CEA）水平4～51 mg/mL，平均CEA水平（26.73±5.82）ng/mL；病理類型：鱗癌17例，腺癌21例，其他2例。觀察組男性24例，女性16例；年齡43～71歲，平均年齡（58.69±3.32）歲；病程12個月～35個月，平均病程（21.36±3.08）個月；腫瘤直徑1～9 cm，平均腫瘤直徑（4.13±1.22）cm；體重指數18～26 kg/m2，平均體重指數（21.58±1.32）kg/m2；CEA水平3～53 mg/mL，平均CEA水平（27.18±5.96）ng/mL；病理類型：鱗癌16例，腺癌22例，其他2例。兩組患者一般資料具有可比性（P＞0.05）。本研究經樣本醫院醫學倫理委員會批準。

1.2 入選標準

（1）納入標準：①經病理檢查確診為AEC。②首次接受治療。③預計生存時間＞6個月。④配合度理想。⑤自愿簽署知情同意書。（2）排除標準：①對本研究藥物過敏。②伴有其他系統惡性腫瘤。③嚴重肝腎功能不全。④合并高血壓、糖尿病。⑤合并全身急慢性感染疾病。⑥精神異常、認知功能障礙。

1.3 方法

對照組患者給予5氟尿嘧啶聯合順鉑治療，第1～3 d，將30 mg/m2順鉑（齊魯制藥有限公司，生產批號：20180211、20190105，規格為10 mg）加入100 mL生理鹽水稀釋后靜脈滴注，滴注時間為2 h；第1～5 d，將500 mg/m25氟尿嘧啶（上海旭東海普藥業有限公司，生產批號：20180215、20190412，規格為10mL：0.25 g×5支）與500 mL葡萄糖溶液混合靜脈滴注治療，滴注時間為6～8 h，21 d為1個周期，連續治療2個周期。觀察組患者給予紫杉醇聯合順鉑治療，第1 d：將140 mg/m2的紫杉醇（哈藥集團生物工程有限公司，生產批號： 20180210、20190303，規格為5 mL：30 mg）加入500 mL生理鹽水稀釋后靜脈滴注，滴注時間為3 h，第1～3 d，將30 mg/m2順鉑加入100 mL生理鹽水稀釋后靜脈滴注，滴注時間為2 h，21 d為1個周期，連續治療2個周期。

1.4 評價指標

治療前與治療2個周期后，分別使用胃鏡取食管腫瘤組織標本，使用熒光定量PCR法檢測兩組患者增殖基因與侵襲基因表達量。增殖基因包括MACC1、Nucleostemin、DEC1、PTPN14、TRAF4；侵襲基因包括EphA2、Snail、PTEN、RACK1、PFN2。

1.5 統計學方法

采用SPSS 24.0軟件進行統計分析。計量資料以均數±標準差（±s）表示，組間比較采用t檢驗。計數資料以例數和百分比（%）表示，組間比較采用χ2檢驗。以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組患者治療前、治療2個周期后增殖基因表達量情況

治療2個周期后，兩組MACC1、Nucleostemin、TRAF4較治療前低，DEC1、PTPN14較治療前高，且觀察組MACC1、 Nucleostemin、 TRAF4低 于 對 照 組， DEC1、PTPN14高于對照組，差異有統計學意義（P＜0.05），見表1。

表1 兩組患者治療2個周期后增殖基因表達量情況（±s）

表1 兩組患者治療2個周期后增殖基因表達量情況（±s）

a表示與同組治療前相比，P＜0.05。

組別治療前觀察組（n=40）對照組（n=40）MACC1 Nucleostemin 1-Dec PTPN14 TRAF4 t值P值123.69±14.26 123.45±14.31 0.075 0.94 119.68±10.35 120.01±10.44 0.142 0.888 81.46±9.54 81.96±9.06 0.24 0.811 79.56±7.68 80.12±7.34 0.333 0.74 102.35±9.82 101.47±10.28 0.392 0.697治療2個周期后觀察組（n=40）對照組（n=40）t值P值70.23±6.24a 92.66±8.94a 13.012＜0.001 68.12±5.13a 90.45±9.86a 12.706＜0.001 124.36±11.24a 102.24±10.45a 9.116＜0.001 127.85±14.21a 93.21±9.43a 12.846＜0.001 73.86±8.54a 82.14±8.49a 4.349＜0.001

2.2 兩組患者治療前、治療2個周期后侵襲基因表達量情況

治療2個周期后，兩組EphA2、Snail、PFN2較治療前低，PTEN、RACK1較治療前高，且觀察組EphA2、Snail、PFN2低于對照組，PTEN、RACK1高于對照組，差異有統計學意義（P＜0.05），見表2。

表2 兩組患者治療2個周期后侵襲基因表達量情況（±s）

表2 兩組患者治療2個周期后侵襲基因表達量情況（±s）

b表示與同組治療前相比，P＜0.05。

組別治療前觀察組（n=40）對照組（n=40）EphA2 Snail PTEN RACK1 PFN2 t值P值112.36±9.46 112.71±9.34 0.167 0.868 115.69±8.68 116.23±8.47 0.282 0.779 52.36±5.24 52.78±5.16 0.361 0.719 78.58±4.25 78.33±4.20 0.265 0.792 99.86±11.48 100.56±12.39 0.262 0.794治療2個周期后觀察組（n=40）對照組（n=40）t值P值51.03±6.75b 80.26±7.49b 18.335＜0.001 53.96±5.84b 90.64±8.79b 21.982＜0.001 103.25±12.15b 75.49±8.62b 11.785＜0.001 114.56±11.74b 90.36±8.64b 10.500＜0.001 73.64±8.49b 81.24±9.02b 3.880＜0.001

3 討論

EC的主要發病機制為食管鱗狀上皮、腺上皮發生病理性增生，導致惡性病變，且具有較高的惡性程度。AEC患者很難治愈，故如何延長生存時間，提高生存率為臨床研究的熱點。以往臨床多采用5氟尿嘧啶聯合順鉑治療該疾病，能夠有效阻止腫瘤繼續擴散或抑制腫瘤發生轉移，該方案在治療后會引起嚴重的毒副反應，影響治療效果［4］。近年來，紫杉醇聯合順鉑已逐漸成為AEC患者首選化療方案。紫杉醇具有顯著的抗腫瘤作用，主要作用機制為通過與微管蛋白結合，促進其聚合，形成不具有活性，且結構穩定的微管聚合物，并且能夠阻止微管網重組，干擾癌細胞的有絲分裂M期，使癌細胞快速凋亡［5-6］。順鉑為常見的一種化療藥物，其化學結構能夠有效破壞癌細胞增殖過程，進而起到抑制腫瘤作用，促進癌細胞衰亡［7-8］。紫杉醇與順鉑聯合使用，可有效增強化療療效。

癌細胞的增殖與侵襲活性均能夠反映腫瘤的惡性程度。MACC1、Nucleostemin、DEC1、PTPN14、TRAF4均為增殖基因，且MACC1、Nucleostemin、TRAF4屬于促增殖基因，其中MACC1是原癌基因，其在結腸癌、宮頸癌等多種惡性腫瘤組織中呈異常升高表達，可對PI3K/AKT信號通路產生激活作用，刺激腫瘤細胞增長；Nucleostemin在正常分化成熟的組織中不表達，主要存在于多種惡性腫瘤組織及干細胞中，其表達量與腫瘤細胞增殖活性呈正相關；TRAF4是重要胞質銜接蛋白，在腫瘤壞死因子受體家族的信號傳導中發揮重要作用，此外TRAF4可直接或間接與TRAF胞質相結合，調節多種信號通路，參與腫瘤細胞的存活、分化、增殖及凋亡。有研究指出，抑制TRAF4表達可控制腫瘤細胞增殖轉移。DEC1、PTPN14屬于抗增殖基因，前者為生長發育基因，高表達DEC1對抑制癌細胞增殖具有積極作用，后者表達量與癌細胞增殖成反比。本研究結果顯示紫杉醇聯合順鉑可改善AEC患者增殖基因表達，抑制腫瘤進展。究其原因在于，紫杉醇可破壞微管蛋白及微管蛋白二聚體動態平衡，誘導微管蛋白聚合，穩定微管并抑制癌細胞又是分裂，觸發細胞凋亡；此外，紫杉醇與順鉑均可對酪氨酸激酶活性產生抑制作用，使細胞周期停滯于DNA合成前期，阻斷細胞分裂，抑制腫瘤細胞增殖，誘導腫瘤細胞凋亡。

除腫瘤細胞增殖外，腫瘤細胞侵襲與轉移也是增加EC惡性程度的重要因素之一，不利于患者預后。抗侵襲基因與促侵襲基因表達失衡是改變腫瘤細胞侵襲活性的直接原因，可有效反應AEC患者臨床治療效果。EphA2、Snail、PTEN、RACK1均屬于侵襲基因，且EphA2、Snail屬于促侵襲基因，前者高表達量可促進癌細胞脫落，增強癌細胞侵襲性，后者在上皮－間質轉型中具有重要作用，能夠加強癌細胞侵襲活性，PTEN、RACK1屬于抗侵襲基因，前者是一種典型的抑癌基因，后者屬于胞質內錨定蛋白，均可有效降低癌細胞侵襲活性［9-10］。本研究結果顯示，紫杉醇聯合順鉑可以有效抑制AEC患者癌細胞侵襲的活性。分析其原因，紫杉醇與順鉑還可干擾轉化生長因子、血管內皮生長因子、基質金屬蛋白酶表達，抑制腫瘤新生血管生成，阻礙腫瘤細胞向周圍組織侵襲及轉移。

綜上所述，AEC患者采用紫杉醇聯合順鉑治療具有顯著的臨床效果，對降低癌細胞增殖與侵襲活性均具有重要作用，在臨床中值得廣泛推廣應用。