分光光度法測(cè)定白酒中甲醛

汪 昕，金 蓉

（麗水市質(zhì)量檢驗(yàn)檢測(cè)研究院，浙江麗水 323000）

白酒作為蒸餾酒重要的一個(gè)分支，以其悠久的歷史，獨(dú)特的風(fēng)味，深受國(guó)內(nèi)外消費(fèi)者歡迎。每年各地市場(chǎng)監(jiān)管部門都會(huì)對(duì)預(yù)包裝白酒和散裝白酒進(jìn)行大量監(jiān)督抽檢，不合格的項(xiàng)目主要集中在衛(wèi)生指標(biāo)氰化物、甲醇以及食品添加劑的非法添加[1-2]。隨著人們對(duì)白酒品質(zhì)的關(guān)注度越來越高，其他監(jiān)督檢驗(yàn)未涉及的有害物質(zhì)如甲醛含量等指標(biāo)開始受到重視。2006年，甲醛被國(guó)際癌癥研究機(jī)構(gòu)（International Agency for Research on Cancer，IARC）確認(rèn)為Ⅰ類致癌物[3]。美國(guó)環(huán)境保護(hù)局（US Environment Protection Agency，US EPA）規(guī)定了甲醛的每日可接受攝取量（Acceptable Daily Intake，ADI）為 0.2 mg/kg[4]。測(cè)定酒中微量甲醛的方法主要有乙酰丙酮比色法和4-氨基-3-聯(lián)氨-5-巰基-1-2-4-三氮雜茂分光光度法。另外，有研究報(bào)道了采用高效液相色譜法和氣相色譜法衍生后檢測(cè)食品、空氣等樣品中的甲醛含量[5]。本文依據(jù)乙酰丙酮顯色法的原理，旨在建立一套分光光度法檢測(cè)白酒中甲醛的方法，并驗(yàn)證其可行性。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

甲醛，上海安譜公司，含量10 000 mg/L水溶液；乙酰丙酮，上海凌峰化學(xué)試劑有限公司，純度99.0%；乙酸銨，江蘇強(qiáng)盛公司，純度98.0%；冰乙酸，麥克林公司，純度99.5%。

1.2 儀器與設(shè)備

北京普析通用儀器T9CS雙光束紫外分光光度計(jì)；梅特勒-托利多ME204電子天平。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 實(shí)驗(yàn)原理

甲醛在過量乙酸銨的存在下，與乙酰丙酮和氨離子生成黃色的2,6-二甲基-3,5-二乙酰基-1,4-二氫吡啶化合物，在波長(zhǎng)415 nm處有最大吸收，在一定濃度范圍內(nèi)，其吸光度與甲醛含量成正比，與標(biāo)準(zhǔn)系列比較定量[6]。

1.3.2 試劑的配制

乙酰丙酮溶液。稱取乙酰丙酮0.4 g、乙酸銨25 g、冰乙酸3 mL溶于水中，用水定容至200 mL容量瓶中備用，臨用現(xiàn)配。

甲醛標(biāo)準(zhǔn)溶液。準(zhǔn)確移取0.5 mL的10 000 mg/L甲醛標(biāo)準(zhǔn)溶液至50 mL容量瓶中，用水定容至刻度，配制成100 mg/L甲醛儲(chǔ)備液，準(zhǔn)確移取0.5 mL的100 mg/L甲醛儲(chǔ)備液至50 mL容量瓶中，用水定容至刻度，配制成1 mg/L甲醛標(biāo)準(zhǔn)溶液備用。

1.3.3 檢測(cè)方法

移取2.0 mL白酒于25 mL比色管中，加水至10 mL后加入2 mL新配制的乙酰丙酮溶液，搖勻后在沸水浴中加熱10 min，取出用水沖至常溫后于415 nm測(cè)定吸光度。

2 結(jié)果與分析

2.1 標(biāo)曲線性范圍及線性相關(guān)系數(shù)

分別準(zhǔn)確吸取1.0 μg/mL的甲醛標(biāo)準(zhǔn)溶液0 mL、0.50 mL、1.00 mL、2.00 mL、5.00 mL、10.00 mL及100.0 μg/mL的甲醛標(biāo)準(zhǔn)溶液0.20 mL、0.50 mL、1.00 mL、2.00 mL和5.00 mL于25 mL比色管中，加水至10 mL刻度，后加入2 mL乙酰丙酮溶液，沸水浴中加熱10 min，取出冷卻后測(cè)定吸光度，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。各濃度甲醛溶液的吸光度及散點(diǎn)圖見表1和圖1。

表1 甲醛標(biāo)準(zhǔn)溶液系列吸光度

圖1 甲醛標(biāo)準(zhǔn)溶液含量與吸光度散點(diǎn)圖

分析上述數(shù)據(jù)可知甲醛含量在0～200 μg均有較好的線性表現(xiàn)，其線性擬合的相關(guān)系數(shù)均不低于0.999，進(jìn)一步比較可知在甲醛含量0～10 μg有最佳的擬合曲線，其截距最接近于零點(diǎn)，工作曲線為y=0.019 4x-0.000 2，線性相關(guān)系數(shù)R2=0.999 7。通過分析可以得出該方法具有檢測(cè)范圍廣，線性表現(xiàn)良好等特點(diǎn)。

2.2 加標(biāo)回收率與精密度實(shí)驗(yàn)

分別進(jìn)行3組高中低濃度的加標(biāo)實(shí)驗(yàn)，加標(biāo)量分別為 1 μg、5 μg和20 μg，并同時(shí)做 6組平行樣，得到的結(jié)果見表2。

由表2可知，高中低3組加標(biāo)實(shí)驗(yàn)的平均回收率分別為98.98%、96.26%和95.53%，6組平行樣結(jié)果的標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為0.011%、0.014%和0.028%。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明該檢測(cè)方法在工作曲線全范圍內(nèi)均有較好的加標(biāo)回收率，且實(shí)驗(yàn)平行性好，精密度高。

表2 加標(biāo)回收率與精密度實(shí)驗(yàn)結(jié)果

2.3 檢出限的測(cè)定

實(shí)驗(yàn)以色譜級(jí)無水乙醇代替白酒樣品作為空白樣品，平行測(cè)定11份空白樣品溶液，以測(cè)定空白溶液響應(yīng)值的3倍標(biāo)準(zhǔn)偏差所對(duì)應(yīng)的甲醛含量作為檢出限。標(biāo)準(zhǔn)偏差s，標(biāo)準(zhǔn)曲線斜率k。方法檢出限為3s/k。由表3可知，該方法的檢出限為0.078 μg，以樣品取樣量2 mL計(jì)算，其檢出限濃度為0.039 mg/L，標(biāo)準(zhǔn)偏差為5.05×10-4。

表3 實(shí)驗(yàn)測(cè)定結(jié)果

3 結(jié)論

通過參考國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中發(fā)酵酒中甲醛的檢測(cè)方法，本文順利建立了分光光度法測(cè)定白酒中甲醛的檢測(cè)方法，并對(duì)該方法的可行性進(jìn)行了論證，結(jié)果表明該方法能夠?qū)崿F(xiàn)白酒中甲醛的檢測(cè)目標(biāo)，適用于白酒的檢測(cè)與研究。