貴州某地綠茶理化品質分析

楊 丹，徐家法

（六盤水師范學院，貴州六盤水 553000）

茶葉是山茶科、山茶屬灌木，嫩枝無毛。葉革質，橢圓形，茶葉指茶樹的葉子或芽，能夠用開水直接泡飲，茶葉飲品被譽為“世界三大飲料之一”。茶葉含兒茶素、咖啡堿、肌醇和葉酸等成分，有利于人體健康。貴州屬于亞熱帶高原季風濕潤氣候，冬無嚴寒、四季分明、雨熱同季，得天獨厚的地理環境以及適宜的氣候，使得貴州省成為國內綠茶主要產區。

茶葉中對人體有益的物質較多，其中茶多酚，氨基酸最為重要。茶多酚是茶葉中一類羥基酚類化合物的總稱，茶多酚類化合物又稱為類黃酮化合物，是茶葉中一類主要的化學成分[1]。茶多酚中又屬兒茶素最重要，其具有多種生物作用。根據李寧[2]的研究，兒茶素對化學致癌物為誘因的各種器官腫瘤均有防治作用。根據吳瓊潔[3]、劉波靜等[4]的研究顯示，茶多酚有調整血脂及抗脂質氧化作用；閻金海等[5]研究發現茶多酚有抗癌，抑癌作用。而茶氨酸具有加強腦波中α波強度，使人產生輕松感和提高記憶力等作用[6]；YOKOGOSHI等[7]研究顯示，茶氨酸具有降血壓的作用。故探索茶葉理化性質對研究茶葉的藥用功效具有非常高的價值和實際意義。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

實驗所用樣品與試劑如表1和表2所示。

表1 實驗樣品

表2 實驗試劑

1.2 儀器與設備

實驗所用儀器設備如表3所示。

表3 實驗主要儀器與設備

1.3 實驗方法

1.3.1 樣品處理、樣液的制備

（1）樣品處理。分別取某地明前茶、明后茶和水城春3種樣品100 g，用磨碎機磨碎，并使用60目篩子篩選，收集篩選好的樣品粉末，使用磨口錐形瓶加蓋保存。

（2）樣液制備。分別在電子分析天平上稱取3種處理好的樣品1.5 g（準確至0.001 g），放置于3個標號且干燥好的圓底燒瓶中，加入沸騰蒸餾水100 mL，立即移入沸水浴，浸提40 min（每10 min搖晃一次，使得茶葉充分浸提），再將浸提液及茶渣減壓過濾（濾紙干燥并稱取質量），用沸蒸餾水洗滌茶渣數次，濾液冷卻后用蒸餾水定容于250 mL容量瓶，得到3瓶250 mL的樣液備用。

1.3.2 氨基酸總量的測定

（1）測定方法。本文采用國標GB/T 8314—2013[8]方法，氨基酸在pH 8.0的環境下與茚三酮共熱形成紫色絡合物，在570 nm處有特定吸收峰。

（2）標準曲線制作。稱取質量250 mg的谷氨酸，溶解，定容至25 mL容量瓶中，作為標準儲備液，濃度為10 mg/mL，再從儲備液中分別取0 mL、0.5 mL、1.0 mL、1.5 mL、2.0 mL、2.5 mL和3.0 mL于50 mL容量瓶中并定容，配成濃度分別為0 mg/mL、0.1 mg/mL、0.2 mg/mL、0.3 mg/mL、0.4 mg/mL、0.5 mg/mL和0.6 mg/mL的標準工作液。吸取谷氨酸標準工作液各1 mL于一組7只25 mL的比色管中，加入0.5 mL pH為8.0的磷酸緩沖溶液和0.5 mL 2%的茚三酮溶液，沸水浴15 min，待冷卻后定容至25 mL，放置10 min，在570 nm處測定吸光度。以吸光度為縱坐標，濃度為橫坐標制作標準曲線。

（3）樣品測定。各取1.0 mL制備好的3種樣液，加入0.5 mL pH為8.0的磷酸緩沖溶液和0.5 mL 2%的茚三酮溶液，沸水浴15 min，待冷卻后定容至25 mL，放置10 min，在570 nm處測定吸光度，每組樣品取3個平行樣，取平均值。按照公式計算游離氨基酸總量：

游離氨基酸總量（以茶氨酸或谷氨酸計）=

式中：C為根據測定的吸光度從標準曲線上查到的茶氨酸或谷氨酸的毫克數，mg；V1為試液總量，mL；V2為測定用試液量，mL；m為試樣用量，g；ω為試樣干物質含量，%。

1.3.3 茶多酚的測定

（1）測定方法。本文采用GB/T 8313—2018中方法[9]，多酚物質溶于70%乙醇，福林酚試劑氧化茶多酚中的-OH，形成藍色絡合物，在675 nm處有獨特吸收峰。

（2）標準曲線制作。稱取0.110 g（準確至0.001 g）沒食子酸，定容于100 mL容量瓶，再分別取0 mL、1.0 mL、2.0 mL、3.0 mL、4.0 mL和5.0 mL于100 mL容量瓶中，得到濃度為0 μg/mL、10.0 μg/mL、20.0 μg/mL、30.0 μg/mL、40.0 μg/mL 和 50.0 μg/mL 的標液，各取以上濃度標液1.0 mL于10 mL容量瓶中，加入5.0 mL 10%福林酚，4.0 mL 7.5% Na2CO3，定容至10 mL，室溫放置60 min，675 nm處測定吸光度。以吸光度為縱坐標，濃度為橫坐標制作標準曲線。

（3）樣液制作與測定。分別取磨碎試樣0.2 g（準確到0.000 1 g）于圓底燒瓶中，加入70 ℃的70%甲醇，并且70 ℃水浴，回流提取4 h，過濾定容于10 mL容量瓶，取提取液1.0 mL于100 mL容量瓶中，定容。取此樣液1.0 mL于10 mL容量瓶中，加入5.0 mL 10%福林酚，4.0 mL 7.5% Na2CO3，定容至10 mL，室溫放置60 min，675 nm處測定吸光度。每個樣液3組平行樣，取平均值。按照公式計算茶多酚含量：

式中：C為根據試樣測得吸光度，從標準曲線上查出茶多酚相應含量，μg/mL；K為沒食子酸標準曲線的斜率；m為樣品干物質含量，%；m1為樣品質量，g。

2 結果與分析

2.1 氨基酸總量的測定

根據上述實驗方法，以谷氨酸吸光度為縱坐標，濃度（mg/mL）為橫坐標制作標準曲線，氨基酸標準曲線如圖1所示。

圖1 谷氨酸標準曲線

根據標準曲線得到線性回歸方程y=0.014x+0.009 4，相關系數R2為0.999 2，以國標方法測定樣品吸光度，代入方程計算含量，得到表1樣品氨基酸含量。

由表4可知，清明前的樣品氨基酸含量明顯比清明后的高，說明季節不同明顯影響茶葉的氨基酸含量，而與水城春比較可知，待測樣品氨基酸含量明顯低于水城春。

表4 3種樣品氨基酸含量

2.2 茶多酚含量的測定

根據上述實驗方法測得茶多酚含量相關數據，以沒食子酸吸光度為縱坐標，濃度（μg/mL）為橫坐標制作標準曲線，制作沒食子酸標準曲線，如圖2所示。

圖2 沒食子酸標準曲線

根據標準曲線得到線性回歸方程y=85.047x+0.138 0，相關系數R2為0.999 2，以國標方法測定樣品吸光度，代入方程計算含量，得到表2樣品茶多酚含量。

根據表5可知，清明前的茶多酚含量高于清明后的，證明季節對樣品茶多酚含量有影響，與水城春比，樣品茶葉茶多酚含量明顯低于水城春。

表5 茶多酚含量

3 結論

所測樣品明前茶、明后茶和水城春氨基酸含量分別為65.89%、46.19%和82.85%；明前茶、明后茶和水城春樣品茶多酚含量分別為13.83%、10.76%和26.02%。總體上，農戶自制茶葉與市場售賣水城春相比，氨基酸和茶多酚含量均較少，但農戶自制茶葉明前茶的氨基酸和茶多酚含量均高于明后茶。