危害鵝掌楸的中國巨基葉蜂屬(膜翅目： 葉蜂科)一新種*

李澤建 劉萌萌 牛耕耘 魏美才

(1.浙江省麗水市林業局 華東藥用植物園科研管理中心 省級博士后科研工作站 麗水 323000；2.麗水學院生態學院 麗水 323000； 3.江西師范大學生命科學學院 南昌 330022)

鵝掌楸(Liriodendronchinense)是木蘭科(Magnoliaceae)重要珍貴樹種，被列入《世界自然保護聯盟瀕危物種紅色名錄》的近危(NT)種類(IUCN， 2012)，也是中國國家二級重點珍稀瀕危保護植物。該種分布于中國中南部和越南北部。國內散見于陜西秦嶺、安徽大別山以南和四川、云南以東地區(吳征鎰等， 2003)。歐陽貴明等(1993)最早發現并研究報道了鵝掌楸葉蜂及其生物學習性。同年，蕭剛柔(1993)報道了一新種： 鵝掌楸葉蜂(MegabelesesliriodendrovoraxG. Xiao, 1993)。

巨基葉蜂屬MegabelesesTakeuchi, 1952隸屬于膜翅目(Hymenoptera)、葉蜂亞目(Tenthredinomorpha)、葉蜂科(Tenthredinidae)、巨基葉蜂亞科(Megabelesinae)，模式種為M.crassitarsisTakeuchi, 1952(Takeuchi, 1952)。Wei(2010)厘訂了本屬世界種類，描述了5種，其中中國分布3種： 鵝掌楸巨基葉蜂M.liriodendrovoraxG. Xiao, 1993、木蘭巨基葉蜂M.magnoliaeWei, 2010、肖氏巨基葉蜂M.xiaoiWei, 2010； 日本分布2種：M.crassitarsisTakeuchi, 1952、M.tsurugiensisTogashi, 2008(Togashi, 2008)。Hara(2016)報道了M.crassitarsis的幼蟲生物學特性，并將M.tsurugiensisTogashi降為M.crassitarsisTakeuchi的次異名，但該次異名的處理尚缺少直接支持證據，需要后續進一步研究確定。

本文報道新種鳳陽巨基葉蜂M.fengyangshanaLi, Liu & Wei, sp. nov.，其幼蟲取食鵝掌楸的葉片，當蟲口密度較大時，可將寄主葉片蠶食殆盡，影響植株生長，對寄主造成嚴重危害。

1 材料與方法

1.1 材料

新種模式標本采自浙江麗水龍泉市鳳陽山。正模標本和部分副模標本保存于亞洲葉蜂博物館(ASMN，江西南昌)，部分副模標本保存于華東藥用植物園科研管理中心模式標本室(formerly LSAF，浙江麗水)。

1.2 術語和縮寫

構造描述術語采用Ross(1945)和Niu等(2010)。正文中使用術語縮寫目錄如下： POL(postocellar line)： 側單眼距，2個側單眼內緣之間的距離； OOL(ocular-ocellar line)： 復眼單眼距，即側單眼與復眼之間的距離； OCL(ocellar-occipital carina line)： 單眼后頭距，側單眼與后頭邊緣之間的距離。

1.3 圖片拍攝和處理

本研究使用體視顯微鏡Motic-SMZ-171對針插標本進行形態學觀察； 成蟲的圖片通過尼康相機D700拍攝獲得，局部特征圖片由徠卡Z16APO圖像采集系統拍攝。所有圖片經由合成軟件Helicon Focus和修圖軟件Adobe Photoshop CS 6.0進行處理。幼蟲和寄主植物照片使用蘋果8plus手機拍攝。

1.4 線粒體基因組序列測序和分析

本研究使用二代測序獲得了鳳陽巨基葉蜂新種(CSCS-Hym-MC0236，雄蟲)的基因組。樣品采集自浙江龍泉鳳陽山鳳陽湖(119.180°E，27.877°N，1 549 m， 2017.V.19，李澤建，劉萌萌，高凱文，LSAF17072)，標本鑒定人為魏美才。樣品殘體保存于亞洲葉蜂博物館。

試驗樣品均取胸部肌肉組織，采用Qiagen試劑盒(DNeasy Blood & Tissue Kit)提取基因組DNA。使用Illumina Hiseq 4000 platform進行二代測序。原始數據經質檢、修剪后獲得clean reads。分別利用MitoZ軟件(Mengetal.， 2019)進行無參組裝，利用Geneious(https:∥www.geneious.com)軟件使用近緣種作為參考序列進行組裝，對無參組裝結果進行檢驗。利用MITOS Web Server(http:∥mitos.bioinf.uni-leipzig.de/index.py)對tRNA進行注釋，根據與近緣種的比較研究，確定蛋白質編碼基因(PCG)和rRNA的起止位置。

1.5 基因組比較分析研究

使用MEGA7計算鵝掌楸巨基葉蜂、木蘭巨基葉蜂和鳳陽巨基葉蜂的遺傳距離。選取巨基葉蜂屬的姊妹群枝膜葉蜂屬(Cladiucha)的3個種作為外群，使用TranslatorX (Abascaletal.， 2010)對蛋白質編碼基因進行比對，應用IQtree軟件(Nguyenetal., 2015)基于最大似然法對聯合數據集進行系統發育關系推斷，參數設置為默認。

2 結果與分析

2.1 鳳陽巨基葉蜂Megabeleses fengyangshana Li, Liu & Wei, sp. nov.(圖1)

雄： 體長8～8.5 mm(圖1a)； 體黑色，具弱金屬藍色光澤，后足基節外側下部具1個大白斑； 前中足股節前側大部、前中足跗節和脛節端距淺褐色，口須中部污褐色。體毛銀色； 翅端半部弱煙褐色，翅痣和翅脈黑色。

頭部背側光澤強烈，額區、內眶中部和唇基刻點粗大密集，間隙狹窄(圖1b)； 單眼后區中部、后眶大部區域和后眶下部具稀疏大刻點； 前胸背板前角大部光滑，前胸背板除前角外和中胸背板具明顯小刻點，刻點間隙具細弱刻紋； 中胸小盾片前側區域光滑，幾乎無刻點，小盾片側緣、后緣和附片中央大部區域具密集刻點，刻點間隙具明顯刻紋； 中胸前側片刻點十分密集，刻點間幾乎無光滑間隙； 中胸后上側片無明顯大刻點，刻紋細密； 中胸后下側片前后緣光滑，無刻紋，刻點稀疏，中部區域具致密刻紋； 后胸前側片上部刻紋和刻點粗密，中下部刻點十分稀疏，刻紋細弱； 后胸后側片前半部刻點稀疏，大部光滑，后半部具粗大刻點，刻紋粗糙(圖1g)； 后足基節外側刻點較為密集，刻點間隙等寬于刻點直徑，腹側刻點較為稀疏，刻點間隙寬于刻點直徑，刻紋細弱； 腹部第1背板兩側條形區域高度光滑，其余區域刻點較密集，其余背板刻點較第1背板稀疏，刻點間隙光滑，無明顯刻紋(圖1e)； 腹板刻點較密集(圖1f)。

營改增的政策執行以來，極大增加了企業對財務的管理風險。營改增涉及的企業財務管理內容需要進行調整，然而，相當數量的企業財務人員囿于自身水平粗淺且沒有對營改增的內容進行充分的系統化的業務學習，使得他們并不能對營改增政策的指定初衷有明確的認知，由此便無法知曉營改增政策的相關內容和細節，從而無法利用好營改增的政策利好為企業發展帶來的紅利，反而會由于對營改增的不了解容易造成在企業財務管理中的風險。

唇基前緣缺口淺弧形，深度約為唇基1/8～1/10長(圖1c)； 顎眼距寬線狀，約0.3倍于中單眼直徑； 觸角窩間距幾乎等寬于觸角窩至復眼間距(32∶ 30)； 中窩寬深，側窩窄淺； 額脊寬，稍隆起； 單眼后區中部微弱隆起，寬長比約為1.5； 單眼后溝細淺，側溝寬淺，向后弱分歧； 背面觀后頭短于復眼1/2長，側緣向后稍收窄(圖1b)； 觸角明顯長于腹部(25∶ 17)，短于頭、胸及腹部之和(25∶ 35)，第3節等長于第4節，第3～9節長度之比為31∶ 31∶ 30∶ 28∶ 21∶ 15∶ 11(圖1 d)； 中胸小盾片寬約等于長，前緣三角形突出，后緣橫脊明顯，后緣兩側角稍突出； 淡漠區間距約2.5倍于淡漠區寬； 腹部第1背板內緣長度約為外緣長度的1/2； 后足基節端部伸達第5腹板； 后足脛節外側具淺弱長縱溝，內端距約1/4倍于后足基跗節長； 后足基跗節約等長于其后4跗分節之和，爪內齒長于外齒(圖1 h)； 前翅cu-a脈與1 M室基部不頂接，2r脈交于2Rs室近中部，2 m-cu與1r-m脈頂接，1Rs和2Rs室內均具明顯翅疤； 后翅臀室柄約等長于cu-a脈的1/5長(圖1a)； 下生殖板寬近等于長，端部圓鈍(圖1f)； 生殖鋏如圖1i，抱器長明顯大于寬，內緣中部凹； 陽莖瓣(圖1j)頭葉長大于寬，背頂角稍突出，無缺口，中脊較寬，腹側淡色區短于深色區。

雌： 未見。

分布： 中國(浙江)。

寄主： 木蘭科的鵝掌楸(俗名馬褂木)。幼蟲取食狀見圖2。

圖2 鳳陽巨基葉蜂，新種Megabeleses fengyangshana Li, Liu & Wei, sp. nov. 幼蟲取食鵝掌楸葉片Fig. 2 Larva of Megabeleses fengyangshana Li, Liu & Wei, sp. nov. feeding on leaves of Liriodendron chinense

詞源： 新種模式產地為浙江麗水龍泉市鳳陽山，特以新種模式產地命名。

鑒別特征： 本新種與鵝掌楸巨基葉蜂M.liriodendrovoraxG. Xiao, 1993在外部形態構造方面十分近似，除陽莖瓣構造細節有差別外，只有前翅2Rs室具明顯的翅疤、中胸前側片刻點較密集等與之不同，但本種在線粒體基因組各編碼基因序列上均與后者差異顯著，其中K2P最小差距為5.2%，最大差距為13.6%，可以確認二者非同種(參見2.2節)。

2.2 鳳陽巨基葉蜂線粒體基因組及比較

二代測序產出原始reads共計16 G。MitoZ獲得組裝序列1條，經驗證獲得線粒體基因組序列1條，包含37個基因(Genbank號是MW617897)。參考鵝掌楸巨基葉蜂和木蘭巨基葉蜂以及其他葉蜂科種類，完成蛋白質編碼基因的注釋。分別對13個蛋白質編碼基因進行比對，并對巨基葉蜂屬內3個種類進行兩兩遺傳距離測算，結果見表1。以每個蛋白質編碼間的P距離作為樣本繪制雷達圖(圖3)，巨基葉蜂屬內蛋白質編碼基因的遺傳距離為5.15%(nad4l:M.liriodendrovorax/M.fengyangshana)到20.75%(atp8:M.liriodendrovorax/M.magnoliae)之間。其中兩兩差異的最大值均為atp8的遺傳距離。鳳陽巨基葉蜂和鵝掌楸巨基葉蜂間的蛋白質編碼基因P距離(均值=8.29)低于木蘭巨基葉蜂與其二者的差距(均值分別為12.28和12.73)，這與各種間形態差異程度一致(參見分種檢索表)。

將比對后的13個蛋白質編碼基因串聯后獲得總序列長度為11 235 bp的6種類數據集?；谧畲笏迫环ǐ@得系統發育關系分支圖(圖4)，所有分支支持度均為100。該結果顯示： 巨基葉蜂屬3種構成單系群，其中鵝掌楸巨基葉蜂和鳳陽巨基葉蜂關系更近，二者是姊妹種，然后再與木蘭巨基葉蜂組成單系群； 外群枝膜葉蜂屬3種構成單系群。

2.3 巨基葉蜂屬已知種分種檢索表

1 體無金屬光澤； 腹部背板無刻點，具密集細刻紋； 小盾片的附片白色，后足股節基半部白色； 后足基跗節明顯膨大，長寬比約等于4～4.5； 腹部第1背板后緣缺口很深，中部長約為側緣長的1/3； 后胸前側片背葉莖部十分狹窄，長寬比大于5； 鋸背片懸膜窄于鋸背片中部寬； 陽莖瓣頭葉背頂角具顯著缺口； 寄主木蘭屬Magnolia植物。M.crassitarsis種團

2

表1 基于蛋白質編碼基因的3種巨基葉蜂的P距離Tab.1 P-distance of 3 Megabeleses species based on 13 PCGs

圖3 基于13個蛋白質編碼基因的3種巨基葉蜂的P距離雷達圖Fig. 3 Radar chart of P-distance of 13 PCGs among 3 Megabeleses species

圖4 使用最大似然法構建3種巨基葉蜂蛋白質編碼基因序列的進化樹Fig. 4 Phylogenetic tree inferred from PCGs sequence of 3 Megabeleses species using ML method

-至少腹部具弱藍色金屬光澤； 腹部背板具顯著刻點，無明顯微細刻紋； 小盾片的附片黑色，后足股節黑色，或背側具白色條斑； 后足基跗節較細，長寬比等于6～7； 腹部第1背板后緣中部缺口較淺，中部長約為側緣長的1/2； 后胸前側片背葉短寬，莖部長寬比小于3； 鋸背片懸膜不窄于鋸背片中部寬； 陽莖瓣頭葉背頂角突出，無缺口； 寄主鵝掌楸屬Liriodendron植物。M.liriodendrovorax種團

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2 前胸背板后緣寬邊、翅基片、腹部第1背板后側3/4、后足脛節除端部外、后足跗節全部黃白色； 后足基跗節等長于其后4跗分節之和； 背面觀兩性后頭兩側不膨大； 中胸小盾片后緣圓弧形強烈隆起； 產卵器短于中足脛節，中部鋸刃具20～25個細小亞基齒。中國(安徽、浙江)

木蘭巨基葉蜂M.magnoliaeWei, 2010

- 前胸背板、翅基片、腹部第1背板、后足脛節和跗節全部黑色； 后足基跗節長于其后4跗分節之和； 雌蟲后頭兩側明顯膨大； 后胸小盾片后緣截型，平坦或低鈍橫脊狀隆起； 產卵器長于中足脛節，中部鋸刃具20～30個細小亞基齒

3

3 后足基跗節強烈膨大，兩端明顯收窄，外側具明顯中縱溝，長1.3倍于2～4跗分節之和； 中胸小盾片微弱隆起，具寬淺中縱溝，后緣脊模糊； 唇基前緣缺口角狀，深達唇基1/6長； 鋸鞘端部窄圓，鋸腹片中部鋸刃具20個左右的亞基齒。日本…M.tsurugiensisTogashi, 2008

- 后足基跗節膨大程度較弱，基部明顯收窄，端部不明顯收窄，外側無中縱溝，長1.1倍于其后跗分節之和； 中胸小盾片平坦，具細弱中縱脊，后緣脊顯著； 唇基前緣缺口弧形，深達唇基1/8長； 鋸鞘端部窄圓，鋸腹片中部鋸刃具30個左右的亞基齒。日本

M.crassitarsisTakeuchi, 1952

4 頭胸部具強藍色金屬光澤； 腹部第1背板黑色，兩側無白斑； 雌蟲后足股節背側具白色條斑； 中胸小盾片寬大于長，前緣鈍弧形突出，后緣橫脊銳利，附片具中縱脊； 中胸前側片刻點粗密，間隙狹窄并具微細刻紋； 產卵器等長于中足脛節，背面觀鋸鞘基部等寬于尾須； 翅均勻煙灰色； 陽莖瓣頭葉粗短，長幾乎等于寬。中國(湖南)

肖氏巨基葉蜂M.xiaoiWei, 2010

- 頭胸部金屬藍色光澤微弱或缺如，腹部第1背板兩側具明顯白斑，兩性后足股節全部黑色； 中胸小盾片長等于寬，前緣三角形突出，后緣橫脊低弱模糊，附片無中縱脊； 產卵器明顯長于中足脛節，背面觀鋸鞘基部寬2倍于尾須寬； 前翅端部煙褐色，基部透明

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5 前翅2Rs室無翅疤； 中胸前側片刻點較稀疏，表面光滑； 陽莖瓣中脊較窄，腹側下部的淡色區域明顯長于上部的深色區域。中國(安徽、重慶、湖南、江西、浙江)

鵝掌楸巨基葉蜂M.liriodendrovoraxXiao, 1993

- 前翅2Rs室具明顯翅疤； 中胸前側片刻點較密集，表面具弱刻紋； 陽莖瓣中脊較寬，腹側下部的淡色區域明顯短于上部的深色區域。中國(浙江)

鳳陽巨基葉蜂M.fengyangshanasp. nov.