FGF-2、β2-MG與嬰幼兒肝血管瘤經動脈介入栓塞治療療效的關系

唐 旭 趙成鵬 段永福 周曉波 付小玲

目前，經動脈介入栓塞治療術治療肝血管瘤已趨于成熟，主要通過介入栓塞閉塞供血動脈末梢小分支，終止其生長從而縮小腫瘤，在一定程度上能夠取代既往外科切除手術，但目前對于其療效尚無確切報道，且爭議較大[1-2]。嬰幼兒肝血管瘤無顯著癥狀，據統計，自發破裂發生率低于4%，然而一旦破裂其死亡率則高達62%及以上，不利于嬰幼兒生長發育[3]。成纖維細胞生長因子-2(fibroblast growth factor 2，FGF-2) 主要介導內皮細胞增殖加速新生血管[4]。血清β2-微球蛋白(β2-microglobulin，β2-MG)貫穿肝血管瘤生長過程，當肝組織遭到破壞其在血液中的濃度異常升高[5]。但關于FGF-2、β2-MG與嬰幼兒肝血管瘤經動脈介入栓塞治療療效相關研究分析較少，本研究通過對接受動脈介入栓塞治療的肝血管瘤患兒療效進行分析，旨在探討FGF-2、β2-MG與嬰幼兒肝血管瘤經動脈介入栓塞治療療效關系，為臨床診治嬰幼兒肝血管瘤提供理論依據。

1 材料與方法

1.1 一般資料

選取2017年4月至2019年5月我院收治的肝血管瘤患兒102例。納入標準：①符合《小兒肝血管瘤診斷和治療專家共識》[6]診斷指南，經影像學檢查或手術病理證實；②均接受脈介入栓塞治療。排除標準：①合并其它嚴重肝臟疾病，如病毒性肝炎、藥物性肝損傷等；②合并其他惡性腫瘤；③近3個月內接受影響FGF-2、β2-MG水平藥物。

1.2 方法

手術方法：患兒均行局部麻醉，通過改良Seldinger技術在右側股動脈插管，進行腹腔干、腸系膜上動脈造影，觀察腫瘤位置、大小、數量及血供，根據術前影像學檢查結果實施腫瘤供血動脈插管，使尖端最大限度接近瘤體邊緣，對于血管嚴重迂曲，或單支動脈供應多個腫瘤無法行選擇插管患兒給予肝動脈主干給藥，緩慢推注平陽霉素碘油乳劑2～4 mL，具體劑量根據腫瘤大小、數量及患兒具體情況決定。對于血供豐富患兒栓塞后，繼續加適量1 mm×1 mm明膠海綿顆粒栓塞，栓塞量化標準以供血動脈出現反流為準。

1.3 觀察指標

(1)隨訪12個月，對肝臟進行復查，包括肝臟CT和彩超，查看腫瘤大小、血流信號、病灶內部情況及邊緣碘油沉積情況，對比術前影像學。

(2)療效評定標準：根據世界衛生組織腫瘤療效評價標準[7]，有效：栓塞治療后腫瘤最大直徑和最大垂直徑乘積減少超過25%；無效為栓塞治療后腫瘤最大直徑和最大垂直徑乘積增加超過25%。

(3)術后FGF-2和β2-MG水平檢測：①FGF-2檢測：術后1個月，采用細針穿刺留取腫瘤組織并置于零下80℃保存，取凍存組織標本，根據Trizol試劑盒說明書提取核糖核酸(Ribonucleic acid，RNA)，將RNA反轉錄互補脫氧核糖核酸(Complementary DNA，cDNA)，以此為模板，對FGF-2進行實時定量PCR檢測。反應體系：25 ml： SYBR Green qPCR Master Mix12 mL，正、下游引物及cDNA模板各1 mL，正向引物 5'～3'：GAAAGATCTACCACCATGGGGGACCGCGGGCGCGGC-CGCGCGCTGCCGGGCGGGAG；反向引物 5'～3'：CGCG-TCGACTCAGCTCTTAGCAGACATTGGAAGAAAAAGT-ATAGCTTTCTGCCCAG。

反應程序：95℃ 3 min，95℃ 10 s，58℃ 30 s，72℃ 30 s，40個循環。反應完畢整理數據，分析CT值，以GADPH為內參基因，通過2-△△Ct計算FGF-2 mR-NA的相對表達量。②血清β2-MG水平檢測：術后1個月，采集患兒靜脈血3 mL，采用酶聯免疫吸附試驗檢測，嚴格按照試劑盒(( 武漢默沙克生物科技)說明書進行。

(4)影響因素分析：將可能成為影響療效的因素，如年齡、性別、腫瘤位置、腫瘤數目、腫瘤直徑、腫瘤供血動脈支數、動脈期腫瘤染色情況、是否超選插管、介入次數、FGF-2、β2-MG作為自變量X(X1～X11)，以有效和無效作為因變量Y(Y=0、Y=1)分析影響因素。

1.4 統計學方法

2 結果

2.1 影響肝血管瘤介入治療療效單因素分析

治療有效71例，無效31例。

有效組與無效組年齡、性別、腫瘤位置比較無統計學意義(P>0.05)；無效組腫瘤數目≥2個、腫瘤直徑≥8 cm、多支供血動脈、乏血供型、未行超選插管及多次介入占比大于有效組，FGF-2、β2-MG水平高于有效組(P<0.05)，見表1。

2.2 影響肝血管瘤介入治療療效多因素分析

將表1中具有統計意義的項目進行logistic分析得到，腫瘤數目≥2個、腫瘤直徑≥8 cm、多支供血動脈、乏血供型、未行超選插管、多次介入及高水平FGF-2和β2-MG是影響嬰幼兒肝血管瘤經動脈介入栓塞療效危險因素(P<0.05)，見表2。

表2 影響肝血管瘤介入治療療效多因素分析

3 討論

肝血管瘤是兒童常見血管性腫瘤，同時血管生成與再生貫穿肝血管瘤整個發展過程。國外研究顯示，肝血管瘤在成人中發生率約占2.01%，發病原因尚未闡明，推測與先天性血管發育異常相關，或與后天性內分泌影響有關[8-9]。臨床上對于肝血管瘤直徑低于4 cm且無顯著癥狀患兒建議不治療，但需要定期復查；對于超過4 cm且存在明顯癥狀患兒建議立即治療[10-12]。肝血管瘤大部分為肝動脈供血，因此臨床多采用肝動脈介入栓塞治療，但其療效還有待考察。本研究選取102例行動脈介入栓塞治療的嬰幼兒進行觀察，隨訪12個月有效率超過65%，相對低于有關報道，推測可能與隨訪時間長，部分患兒出現復發或再次增大相關。

本研究結果表示，無效組腫瘤數目≥2個、腫瘤直徑≥8 cm、多支供血動脈、乏血供型、未行超選插管及多次介入占比大于有效組。提示多次介入患兒常伴有腫瘤數目過多、腫瘤體積較大、動脈期染色不佳及多支供血動脈等因素。FGF-2參與多種血管性疾病，研究顯示，腫瘤組織中檢測FGF-2呈高表達，且還能促進淋巴細胞表面趨化因子改變使腫瘤細胞增殖[13]。另有研究顯示，FGF-2能夠與其受體結合發揮調控細胞信號傳導途徑作用，從而加速腫瘤組織血管再生[14]。上述研究提示了FGF-2高水平可加速血管生成，本研究也得出相似結果，無效組FGF-2水平高于有效組。本研究還得出，無效組β2-MG水平高于有效組，與研究Shaohong[15]、Xiao等[16]研究結果相似。本研究經logistic分析得到，腫瘤數目≥2個、腫瘤直徑≥8 cm、腫瘤供血動脈多支、乏血供型、超選插管、多次介入及高水平FGF-2和β2-MG是影響嬰幼兒肝血管瘤經動脈介入栓塞療效的危險因素。與Rujkijyanont等[17]研究結果相似。分析原因乏血供型肝血管瘤在增強CT掃描及供血動脈數字減影血管造影中不易被檢出其強化或染色，但在門靜脈注射對比劑后檢測可清晰觀察到，該類肝血管瘤經動脈介入栓塞治療后易復發、增大，不能達到治愈效果[18]；是否超選插管也影響普通導管超選困難患兒術后療效，故應采用細導管或同軸微導管超選至腫瘤主要供血動脈，避免誤栓[19]。腫瘤數目和直徑過大及腫瘤供血動脈多支也是影響其療效主要因素，故對腫瘤直徑過大考慮分次栓塞治療，降低不良反應，提高有效率；對腫瘤數目過多及腫瘤供血動脈多支應采取逐一行瘤體血竇和供血動脈致密性栓塞，以保障正常肝組織；對于高水平FGF-2和β2-MG患兒肝血管瘤經動脈介入栓塞的療效欠佳，應考慮其他治療方式[20]。

綜上所述，腫瘤數目過多和直徑過大、腫瘤供血動脈多支、乏血供型、超選插管、多次介入及高水平FGF-2和β2-MG是影響嬰幼兒肝血管瘤經動脈介入栓塞療效危險因素，應引起臨床重視。對于危險因素過多，預測經動脈介入栓塞治療療效欠佳者應考慮其他治療方式。本研究不足之處在于納入病例較少，后續研究會擴大樣本量加深研究，進而為治療嬰幼兒肝血管瘤提供更真實有效的理論資料。