血漿ATF4、vWF水平對持續(xù)性心房顫動患者射頻消融術(shù)后復(fù)發(fā)的預(yù)測效能

趙曌，趙春慧，宋凌慧，李付強(qiáng)

心房顫動是一種室上性快速性心律失常，可導(dǎo)致心房內(nèi)附壁血栓形成，增加腦卒中等血栓性疾病發(fā)生風(fēng)險[1-2]。導(dǎo)管射頻消融(radiofrequency catheter ablation，RFCA)是心房顫動的一線治療方案，但單次RFCA術(shù)后心房顫動的復(fù)發(fā)率仍然較高，持續(xù)性心房顫動(persistent atrial fibrillation，PAF)患者RFCA術(shù)后復(fù)發(fā)率高達(dá)50.0%～70.0%[3-4]。血管內(nèi)皮功能障礙、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激(endoplasmic reticulum stress，ERS)、細(xì)胞凋亡是心房顫動發(fā)生的重要機(jī)制[5]。激活轉(zhuǎn)錄因子4(activating transcription factor 4，ATF4)是一種轉(zhuǎn)錄因子，參與介導(dǎo)ERS引起的細(xì)胞凋亡[6]。研究報道，ATF4介導(dǎo)心肌細(xì)胞內(nèi)ERS[7]。血管性血友病因子(von Willebrand factor，vWF)是一種能敏感反映血管內(nèi)皮損傷的標(biāo)志物，既往研究表明，高濃度vWF是非瓣膜性心房顫動患者抗凝治療后血栓風(fēng)險增加的危險因素[8]。因此，本研究探討血漿ATF4、vWF水平對PAF患者RFCA術(shù)后復(fù)發(fā)的預(yù)測效能，旨在為評估PAF患者預(yù)后提供參考，報道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取2020年1月—2021年1月張家口市第一醫(yī)院心內(nèi)科收治接受RFCA治療的PAF患者220例為PAF組，其中男127例，女93例，年齡37～86(61.04±9.44)歲；體質(zhì)量指數(shù)(BMI)19～27(23.90±1.30)kg/m2；病程2～13[4.00(2.00,6.00)]年；既往史：糖尿病27例，高血壓80例，腦卒中45例；吸煙56例，飲酒29例；心律失常家族史13例。另選取同期醫(yī)院健康體檢者64例為健康對照組，男37例，女27例，年齡41～87(60.05±10.46)歲；BMI 20～26(24.11±1.34)kg/m2。2組性別、年齡、BMI等比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。PAF組再根據(jù)患者RFCA術(shù)后1年是否復(fù)發(fā)分為復(fù)發(fā)亞組79例和未復(fù)發(fā)亞組141例，復(fù)發(fā)亞組年齡、病程、CHA2DS2-VASc評分水平高于未復(fù)發(fā)亞組(P<0.05)，見表1。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)(2020倫理015號)，受試者及家屬均知情同意并簽署知情同意書。

表1 復(fù)發(fā)亞組及未復(fù)發(fā)亞組PAF患者臨床資料比較

1.2 病例選擇標(biāo)準(zhǔn) (1)納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合“心房顫動基層診療指南(2019年)”[9]中PAF診斷標(biāo)準(zhǔn)并具備RFCA治療指征；②年齡≥18歲；③臨床資料完整。(2)排除標(biāo)準(zhǔn)：①陣發(fā)性、長程持續(xù)性、永久性心房顫動；②既往RFCA治療史；③先天性心臟病、心臟手術(shù)史；④近3個月抗凝治療史；⑤合并嚴(yán)重肝腎功能不全；⑥造血系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)、神經(jīng)系統(tǒng)疾病；⑦惡性腫瘤；⑧遺傳性心律失常；⑨合并急慢性感染性疾病。

1.3 觀測指標(biāo)與方法

1.3.1 血漿ATF4、vWF水平檢測：采集PAF患者入院后次日清晨和健康對照組體檢時空腹肘靜脈血5 ml，加抗凝離心提取血漿，采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測血漿ATF4、vWF水平，試劑盒均購自上海繼和生物科技有限公司，所有操作嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行。

1.3.2 超聲心動圖指標(biāo)檢測：PAF患者入院后24 h內(nèi)采用飛利浦iU22彩色多普勒超聲診斷儀進(jìn)行超聲心動圖檢查，記錄左心室射血分?jǐn)?shù)(left ventricular ejection fraction，LVEF)、左心房內(nèi)徑(left atrium diameter，LAD)、左心室舒張末期內(nèi)徑(left ventricular end diastolic diameter，LVEDD)。

1.3.3 CHA2DS2-VASc評分[10]：PAF患者入院后24 h內(nèi)進(jìn)行CHA2DS2-VASc評分，包括充血性心力衰竭(1分)、高血壓(1分)、年齡(65～74歲1分、≥75歲2分)、糖尿病(1分)、血栓栓塞病史(2分)、血管疾病(1分)、女性(1分)，總分值0～9分，得分越高表示血栓栓塞性事件的風(fēng)險越高。

1.3.4 隨訪情況：PAF患者入組采用STABLE-SR個體化RFCA策略[11]，術(shù)后隨訪1年，將RFCA術(shù)后3個月再發(fā)持續(xù)時間≥30 s的快速性房性心律失常定義為術(shù)后復(fù)發(fā)[9]。

2 結(jié) 果

2.1 2組血漿ATF4、vWF水平比較 PAF組血漿ATF4、vWF水平高于健康對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，見表2。

表2 PAF組與健康對照組血漿ATF4、vWF水平比較

2.2 PAF患者不同亞組間血漿ATF4、vWF水平比較 復(fù)發(fā)亞組患者血漿ATF4、vWF水平高于未復(fù)發(fā)亞組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，見表3。

表3 PAF患者不同亞組間血漿ATF4、vWF水平比較

2.3 PAF患者不同亞組間超聲心動圖指標(biāo)比較 復(fù)發(fā)亞組患者LVEF低于未復(fù)發(fā)亞組，LAD、LVEDD高于未復(fù)發(fā)亞組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，見表4。

表4 PAF患者不同亞組間超聲心動圖指標(biāo)比較

2.4 PAF患者RFCA術(shù)后復(fù)發(fā)多因素Logistic回歸分析 將表1～4中P<0.05者(年齡、病程、CHA2DS2-VASc評分、LVEF、LAD、LVEDD、ATF4、vWF)為自變量，術(shù)后是否復(fù)發(fā)(是=1，否=0)為因變量，多因素Logistic回歸分析顯示，年齡大、病程長、CHA2DS2-VASc評分及血漿ATF4、vWF升高均為PAF患者RFCA術(shù)后復(fù)發(fā)的獨(dú)立危險因素(P<0.05)，見表5。

表5 PAF患者RFCA術(shù)后復(fù)發(fā)的多因素Logistic回歸分析

2.5 血漿ATF4、vWF水平對PAF患者RFCA術(shù)后復(fù)發(fā)的預(yù)測效能 ROC曲線顯示，血漿ATF4、vWF水平及二者聯(lián)合預(yù)測PAF患者RFCA術(shù)后復(fù)發(fā)的AUC分別為0.772、0.769、0.856，二者聯(lián)合預(yù)測效能高于血漿ATF4、vWF單項(xiàng)預(yù)測(Z=3.475、3.687，P均<0.001)，見表6、圖1。

表6 血漿ATF4、vWF水平對PAF患者RFCA術(shù)后復(fù)發(fā)的預(yù)測效能

圖1 血漿ATF4、vWF水平及二者聯(lián)合預(yù)測PAF患者RFCA術(shù)后復(fù)發(fā)的ROC曲線

3 討 論

PAF是指持續(xù)時間超過7 d的心房顫動，無法自行轉(zhuǎn)為竇性心律，需借助藥物或電復(fù)律終止發(fā)作，相比陣發(fā)性心房顫動的心臟結(jié)構(gòu)改變更明顯，血栓栓塞性并發(fā)癥風(fēng)險更高[12]。RFCA是治療心房顫動最早、最常用且臨床證據(jù)最多的導(dǎo)管消融方法，通過射頻導(dǎo)管釋放高頻電磁波，其產(chǎn)生的熱量與消融導(dǎo)管接觸后升高局部心肌病變組織溫度，能使病變組織水分蒸發(fā)、變性、壞死，進(jìn)而阻斷該病變心肌細(xì)胞電信號產(chǎn)生和傳導(dǎo)，恢復(fù)竇性心律[11]。雖然大量臨床研究已證實(shí)RFCA的有效性和安全性[13-14]，但導(dǎo)管消融與心房顫動抗心律失常藥物治療(CABANA)研究指出，導(dǎo)管消融并不能顯著降低由心臟驟停、嚴(yán)重出血、腦卒中、全因死亡等組成的復(fù)合終點(diǎn)發(fā)生率[15]，其中導(dǎo)管消融術(shù)后心房顫動復(fù)發(fā)是導(dǎo)致上述事件發(fā)生的重要原因。本研究中220例PAF患者RFCA術(shù)后復(fù)發(fā)率為35.91%，稍高于楊麗紅等[16]報道的32.21%。可能與本研究病例均為PAF有關(guān)，也說明PAF患者RFCA術(shù)后復(fù)發(fā)率較高。早期評估PAF患者RFCA術(shù)后復(fù)發(fā)風(fēng)險，對指導(dǎo)臨床預(yù)防和改善預(yù)后具有重要意義。

心房重構(gòu)是心房顫動的病理生理機(jī)制之一，其特征是復(fù)雜的結(jié)構(gòu)和電生理變化導(dǎo)致心房擴(kuò)張和心房纖維化，從而促進(jìn)傳導(dǎo)減慢、自發(fā)去極化和動作電位持續(xù)時間延長[5]。心肌細(xì)胞凋亡被認(rèn)為在心房重構(gòu)進(jìn)展中發(fā)揮重要作用，當(dāng)心肌細(xì)胞凋亡后會被成纖維細(xì)胞增殖填補(bǔ)，纖維組織通過取代死亡的心肌細(xì)胞引起心房纖維化，導(dǎo)致心房重構(gòu)[17]。ERS是細(xì)胞應(yīng)對鈣離子平衡紊亂和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔內(nèi)未折疊蛋白聚集、錯誤折疊等狀態(tài)而激活的一種反應(yīng)過程，以維持內(nèi)質(zhì)網(wǎng)內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定和保護(hù)細(xì)胞，強(qiáng)烈的ERS能通過ATF4促進(jìn)CCAAT-增強(qiáng)子結(jié)合蛋白同源蛋白(CHOP)轉(zhuǎn)錄，啟動凋亡程序促進(jìn)細(xì)胞凋亡[18]。實(shí)驗(yàn)表明，心肌細(xì)胞也具備對應(yīng)激信號級聯(lián)的調(diào)控能力，ATF4參與介導(dǎo)心肌細(xì)胞內(nèi)ERS，同時抑制心肌細(xì)胞ERS能顯著降低CHOP表達(dá)，減輕心房纖維化以降低心房顫動發(fā)生率[7,19]。ATF4作為介導(dǎo)ERS途徑中細(xì)胞凋亡的重要轉(zhuǎn)錄因子，是否參與心房顫動復(fù)發(fā)尚不明確。本研究結(jié)果表明，PAF患者血漿ATF4水平明顯升高，是RFCA術(shù)后復(fù)發(fā)的獨(dú)立危險因素，說明ATF4參與RFCA術(shù)后復(fù)發(fā)。分析是PAF患者心肌細(xì)胞鈣離子紊亂引起ERS，ERS能促進(jìn)編碼ATF4激活劑的mRNA被更有效的翻譯，從而引起ATF4大量表達(dá)[20]。同時ATF4高表達(dá)能促進(jìn)CHOP轉(zhuǎn)錄，啟動凋亡程序引起心肌細(xì)胞凋亡，促進(jìn)心房重構(gòu)，導(dǎo)致PAF患者RFCA術(shù)后復(fù)發(fā)。近期實(shí)驗(yàn)也指出，ATF4在心房顫動患者心肌細(xì)胞中高表達(dá)，過表達(dá)的ATF4能促進(jìn)心肌凋亡和心肌纖維化[21]。

血管內(nèi)皮功能障礙不僅是心房顫動患者易發(fā)血栓栓塞事件的重要原因，也是心房顫動發(fā)生的一個重要機(jī)制，血管內(nèi)皮功能障礙可通過引起炎性反應(yīng)、氧化應(yīng)激引起心房重構(gòu)[22]。vWF以多聚體形式儲存于內(nèi)皮細(xì)胞和血小板中，在炎性反應(yīng)、氧化應(yīng)激等引起損傷時從內(nèi)皮細(xì)胞和血小板中釋放，因此vWF被認(rèn)為是反映內(nèi)皮功能障礙和血小板活化的標(biāo)志[23]。在心房顫動患者RFCA術(shù)后血栓栓塞事件研究中，高vWF是RFCA術(shù)后血栓栓塞事件發(fā)生的獨(dú)立危險因素[24]。另一項(xiàng)Meta分析中，高vWF與心房顫動患者主要不良心臟事件和全因死亡獨(dú)立相關(guān)[25]。但目前大量研究均報道vWF與心房顫動患者血栓形成的關(guān)系，尚無研究報道vWF與心房顫動患者RFCA術(shù)后復(fù)發(fā)的關(guān)系。本研究結(jié)果表明，PAF患者血漿vWF水平明顯升高，是RFCA術(shù)后復(fù)發(fā)的獨(dú)立危險因素，說明vWF參與RFCA術(shù)后復(fù)發(fā)。分析是vWF作為能敏感反映血管內(nèi)皮損傷和血小板活化的標(biāo)志物，PAF患者血流動力學(xué)改變引起血小板活化釋放大量vWF入血，同時PAF患者自身炎性反應(yīng)和氧化應(yīng)激也可引起內(nèi)皮功能障礙釋放vWF入血。vWF在血液中濃度越高反映心房顫動患者血管內(nèi)皮損傷和血小板活化越嚴(yán)重，間接反映心房顫動患者心臟結(jié)構(gòu)改變越嚴(yán)重，影響RFCA的治療效果，因此RFCA術(shù)后更易復(fù)發(fā)。研究表明，心內(nèi)膜也可表達(dá)vWF，心房擴(kuò)張會損傷心臟內(nèi)皮并刺激vWF大量釋放，與心房擴(kuò)張損傷程度有關(guān)[26]。本研究結(jié)果還顯示，年齡大、病程長、CHA2DS2-VASc評分高是RFCA術(shù)后復(fù)發(fā)的獨(dú)立危險因素，分析是年齡越大心肌細(xì)胞老化越嚴(yán)重，更易出現(xiàn)心肌纖維化和心房重構(gòu)，因此RFCA術(shù)后復(fù)發(fā)風(fēng)險更高。而病程越長的PAF患者心臟結(jié)構(gòu)損傷越嚴(yán)重，CHA2DS2-VASc評分越高的患者年齡更大，血管形成風(fēng)險越嚴(yán)重，因此RFCA術(shù)后復(fù)發(fā)風(fēng)險更高。本研究ROC曲線結(jié)果表明，血漿ATF4、vWF水平均可單獨(dú)作為PAF患者RFCA術(shù)后復(fù)發(fā)的輔助預(yù)測指標(biāo)，且聯(lián)合檢測血漿ATF4、vWF水平能提升對PAF患者RFCA術(shù)后復(fù)發(fā)的預(yù)測價值，但這還需多中心大樣本研究進(jìn)一步證實(shí)。

綜上所述，PAF患者血漿ATF4、vWF水平升高，是RFCA術(shù)后復(fù)發(fā)的獨(dú)立危險因素，可作為PAF患者RFCA術(shù)后復(fù)發(fā)的輔助預(yù)測指標(biāo)。

利益沖突：所有作者聲明無利益沖突

作者貢獻(xiàn)聲明

趙曌：設(shè)計(jì)研究方案，實(shí)施研究過程，論文撰寫；趙春慧：提出研究思路，分析試驗(yàn)數(shù)據(jù);宋凌慧：實(shí)施研究過程，資料搜集整理，論文修改;李付強(qiáng)：進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，論文審核