鐵嶺地區(qū)牛肉源大腸埃希菌耐藥性調(diào)查研究

安妮

大腸埃希菌（E.coli）俗稱大腸桿菌，是人和動(dòng)物腸道內(nèi)的正常菌群成員之一，常隨糞便排出，故被用作水、食品和飼料等衛(wèi)生檢測(cè)的指標(biāo)。少數(shù)具有致病性，可以引起畜禽特別是幼畜禽的大腸桿菌病。本研究擬對(duì)鐵嶺地區(qū)牛肉源大腸埃希菌的藥物敏感性進(jìn)行檢測(cè)，為指導(dǎo)臨床合理使用抗菌藥物提供依據(jù)，以減少耐藥菌株的產(chǎn)生。

1.1 試驗(yàn)材料

菌株：從鐵嶺地區(qū)8家市場(chǎng)采集的牛肉樣品中分離得到20株大腸埃希菌。

藥物：氨芐西林、頭孢唑啉、頭孢噻肟、美羅培南、慶大霉素、阿米卡星、鏈霉素、四環(huán)素、氯霉素、氟苯尼考、萘啶酸、環(huán)丙沙星、黏菌素、磷霉素、復(fù)方新諾明。

1.2 試驗(yàn)方法

采用瓊脂稀釋法，對(duì)20株大腸埃希菌進(jìn)行耐藥性檢測(cè)。

菌液制備：將已純化并鑒定的20株大腸埃希菌在瓊脂平板上劃線培養(yǎng)后，挑取單個(gè)菌落接種于2毫升MH肉湯管中，37℃恒溫振蕩培養(yǎng)4～8小時(shí)，用MH肉湯稀釋菌液，至含菌量約為1×106 CFU/毫升，備用。

抗菌藥的稀釋：把抗菌藥物原液按試管二倍稀釋法在試管中稀釋到需要的各個(gè)梯度，吸入2毫升藥液放進(jìn)做好標(biāo)記的平皿中。

藥物瓊脂平板的制備：用25毫升滅菌移液管吸取18毫升，冷卻至50～60℃MH瓊脂，加入已有2毫升抗菌藥物的平皿中，混勻。同時(shí)每種藥物設(shè)有兩個(gè)空白瓊脂平板。在超凈工作臺(tái)中風(fēng)干冷卻后，立即使用。

細(xì)菌接種：按照藥物濃度從低到高的順序，將菌液接種到瓊脂平板表面。將接種好菌液的瓊脂平板放置在超凈臺(tái)內(nèi)，直到接種的菌液被瓊脂完全吸干。然后將平板放入培養(yǎng)箱，37℃恒溫培養(yǎng)18～24小時(shí)。

1.3 結(jié)果判定

當(dāng)接種前后兩塊空白的MH平板上的所有接種點(diǎn)的菌生長(zhǎng)良好，而無(wú)接種細(xì)菌的平皿均無(wú)菌落生長(zhǎng)時(shí)，試驗(yàn)組完全不見(jiàn)細(xì)菌生長(zhǎng)的最低藥物濃度為該藥物對(duì)細(xì)菌的最小抑菌濃度（MIC）。以 MIC值規(guī)定的敏感、耐藥折點(diǎn)值范圍判斷結(jié)果。受試藥物的敏感折點(diǎn)值判斷標(biāo)準(zhǔn)見(jiàn)表1。

試驗(yàn)中20株大腸埃希菌對(duì)氨芐西林和復(fù)方新諾明的耐藥率高于65%，對(duì)四環(huán)素的耐藥率在45%，對(duì)其他12種藥物的耐藥率均低于30%（表2）。

試驗(yàn)結(jié)果表明，多數(shù)常用藥物在雞肉源大腸埃希菌中的耐藥率較低，但仍有少數(shù)藥物的耐藥率較高。為了達(dá)到最佳的治療效果，需要正確合理地使用抗生素，在藥敏試驗(yàn)的基礎(chǔ)上有針對(duì)性地選擇用藥，加強(qiáng)對(duì)細(xì)菌耐藥性的監(jiān)測(cè)以及對(duì)臨床用藥的指導(dǎo)和監(jiān)管，避免耐藥菌向人類的傳播。