廣東臺山地區淋球菌耐藥結果調查

黃碧紅

（臺山市人民醫院，廣東臺山 529200）

淋病是最常見的性傳播疾病，也是我國的乙類傳染病，主要癥狀表現為泌尿生殖系統膿性感染，若得不到及時有效的治療會引發諸如盆腔炎、前列腺炎等并發癥[1]。淋病病原體即淋球菌，由于長期以來的抗生素濫用及錯用，淋球菌的耐藥率逐漸提高，其耐藥性可由染色體介導或質粒介導或二者共同介導[2]。當淋球菌耐藥菌株產生后會在該地區迅速擴散傳播，對該地區淋病防治構成巨大威脅。為了解廣東臺山地區淋球菌耐藥性，了解現行淋病治療方案的有效性，控制耐藥菌株的傳播，本研究選取了我院皮膚病性病診療中心確診為淋病的70例患者尿道或宮頸分泌物樣本作為研究對象，分析其淋球菌耐藥特性。

1 資料與方法

1.1 一般資料：選取2017年1月至2018年12月我院皮膚病性病診療中心確診為淋病的70例患者尿道或宮頸分泌物樣本作為研究對象，納入標準：①經臨床診斷和實驗室檢查均符合《2015年美國疾病控制中心性傳播疾病診斷和治療指南》[3]中淋病相關診斷標準；②未合并其他傳染病病原體。70例患者中男性44例，女性26例，年齡分布23～64歲，平均（45.89±3.23）歲。男性尿道樣本提取：采用無菌拭子探入尿道2～3cm處，輕柔轉動粘取尿道分泌物后取出；女性宮頸樣本提取：子宮頸經陰道窺器充分暴露后，先用無菌拭子清理宮頸口分泌物后，另取一根探入宮頸1～2cm處充分浸潤后取出。樣本菌經革蘭染色鏡檢、糖發酵實驗、氧化酶實驗等確認為淋球菌后懸浮保存至-70℃冰箱內待用。

1.2 抗生素及培養基：青霉素、環丙沙星、四環素、阿奇霉素、頭孢克肟、頭孢哌酮、頭孢曲松。培養基選用淋球菌基礎培養基并加入10%脫纖維新鮮羊血。

1.3 檢測方法：最小抑菌濃度（MIC）測定：采用瓊脂稀釋法，將7種抗生素純品采用無菌蒸餾水稀釋，加入至培養基中，配成含梯狀濃度抗生素的瓊脂平皿，將分純后的淋球菌懸液（濃度約為107cfu/mL）用多頭移液槍將菌懸液接種于各培養皿，置于37℃，5%CO2培養箱中培養36h，記錄無菌落生長的MIC。以WHO標準淋球菌菌株D、G、J、L、P作為質控。藥物敏感性：參照WHO西太區淋球菌耐藥監測推薦標準，青霉素、環丙沙星敏感：≤0.03mg/L，中敏：0.06～0.50mg/L，耐藥：≥1mg/L；四環素敏感：≤0.5mg/L，耐藥：≥1mg/L；大觀霉素敏感：≤64mg/L，中敏：64～128mg/L，耐藥：≥128mg/L；頭孢克肟敏感：≤0.125mg/L，中敏：0.25～0.50mg/L，耐藥：≥1mg/L；頭孢曲松敏感：≤0.06mg/L，0.125～0.500mg/L，耐藥：≥1mg/L；頭孢西丁敏感：≤1mg/L，中敏：1～16mg/L，耐藥：≥16mg/L；β-內酰胺酶測定：采用紙片碘法測定，β-內酰胺酶陽性：混合試劑由藍色變為無色，陰性：混合試劑無顏色變化。β-內酰胺酶陽性則判定為該菌株為產青霉素酶淋球菌（PPNG）。高度耐四環素株（TRNG）：采用瓊脂稀釋法，若四環素MIC≥16mg/L則為TRNG株。

2 結果

2.1 70株淋球菌對7種抗生素的MIC分布：70株淋球菌中有33（47.14%）株青霉素耐藥，58（82.86%）株環丙沙星耐藥，37（52.86%）株四環素耐藥，1（1.43%）株頭孢克肟耐藥，詳見表1，表2。

表1 70株淋球菌對7種抗生素的MIC分布（n）

表2 70株淋球菌對7種抗生素的敏感性結果 [n（%）]

2.2 PPNG及TRNG檢測結果：從70株菌株中共檢測出21株PPNG，占比為30.00%，共檢測出26株TRNG，占比為37.14%。

3 討論

作為一種古老而廣泛傳播的疾病，淋病的致病菌-淋球菌僅在人類機體內發現，該病菌通常造成黏膜感染，引發男性尿道炎、婦女宮頸炎；同行或雙性戀者則能夠引發咽部、肛門直腸感染；若感染者為孕產婦，則新生兒經引導分娩時還可造成淋菌性眼炎[4]。由于最初感染時的狀態缺乏特異性，往往造成貽誤治療，甚至進一步擴大傳播范圍。根據2000至2014年我國淋病流行調查報告已知，淋病報告病例數為7.25/10萬，男性高于女性[2]。

自20世紀30年代磺胺類抗生素首次用于淋病治療以來，淋球菌耐藥性一直是人們關注的焦點。由于抗生素的濫用和誤用，致病菌在大范圍選擇性壓力下能夠保留其中耐藥性最強的菌株，并加以在菌群間傳播，進而使得耐藥菌株在全國范圍內散播[5]。本研究選取了7種抗生素對廣東臺山地區70株淋球菌耐藥進行調查，PPNG的檢出率為30.00%，TRNG檢出率為37.14%。目前，已有研究顯示，青霉素及四環素不再是淋病治療的首選藥物，曹文苓等[6]對廣州地區2013年淋球菌耐藥監測結果進行分析顯示，青霉素和四環素的耐藥率為48.40%和48.80%，PPNG和TRNG的檢出率分別為34.5%和38.6%，本研究與其結果較為接近，說明淋球菌對青霉素和四環素的耐藥率均處于高水平。根據美國疾病控制和預防中心（CDC）對抗菌藥物的使用建議，若某一抗菌藥的耐藥率超過5%，則該項藥物不再適用于治療一線藥物[7]。環丙沙星在20世紀90年代曾被用作淋病治療的首選藥物，由于其價格低廉，品種多樣，其使用量大大超過其他藥物，從而導致了高度耐藥[8]。本研究中環丙沙星的耐藥率達到82.86%。大觀霉素對淋球菌敏感度基本穩定，本研究顯示廣東臺山地區淋球菌的大觀霉素、頭孢西丁敏感度達到100.00%，尤其大觀霉素對PPNG、TRNG和淋球菌都具有較好的敏感性[9]，因此可以考慮選擇頭孢克肟作為該地區今后淋病治療的首選藥物。另外，本研究250株淋球菌中只有1株對頭孢克肟耐藥菌株，且敏感度較高達到81.43%，而同為頭孢藥物的頭孢曲松，其敏感度高達71.43%，也可作為臨床治療的一線藥物。

綜上所述，由于21世紀以來各地淋球菌對抗生素耐藥性呈現不斷提高態勢，因此還需不斷加強對本地區淋球菌耐藥性的持續監控，規范抗菌藥物的使用，合理制定治療方案，避免耐藥菌株的不斷產生及傳播。