間接法建立長春地區成人血清淀粉酶參考區間

李雪文，徐攀洋，何 冰，邢東洋，夏 薇，許建成

（1.吉林大學第一醫院檢驗科，吉林 長春 130021；2.北華大學醫學技術學院，吉林 吉林 132013）

血清淀粉酶參考區間的準確性對胰腺疾病的診斷十分重要。目前，我國臨床實驗室檢測項目的參考區間大多來自相關行業標準、《全國臨床檢驗操作規程》或試劑說明書[1]，可能并不適用于所有地區的實驗室，因此建立適用于不同地區人群的參考區間尤為重要。建立參考區間的方法主要為直接法和間接法。直接法是按照預定的標準納入參考個體、進行實驗項目測定、分析結果，進而建立參考區間。間接法是通過對實驗室信息系統中已有的數據進行分析來建立參考區間[2]。美國臨床實驗室標準化協會（the Clinical and Laboratory Standards Institute，CLSI）和國際臨床化學聯合會（the International Federation of Clinical Chemistry and Laboratory Medicine，IFCC）推薦使用直接法建立參考區間[3]，但由于過程繁瑣且成本過高而難以實現。間接法建立參考區間簡便且成本低，逐漸被廣泛應用。本研究擬運用間接法建立適用于長春地區的血清淀粉酶參考區間，以期為臨床相關疾病的診斷提供更可靠的參考。

1 材料和方法

1.1 數據來源

收集2015年1月—2020年9月吉林大學第一醫院健康體檢人群的血清淀粉酶檢測結果。

1.2 樣本采集及處理

采用黃色真空采血管（廣州陽普醫療科技股份有限公司）采集所有對象空腹肘前靜脈血4 mL，剔除脂血、溶血等不合格標本，常溫送至檢驗科。

1.3 儀器與試劑

采用4，6-亞乙基-對硝基苯-α-D-麥芽七糖法檢測血清淀粉酶，試劑及標準品購自四川邁克公司，質控品購自美國伯樂公司。檢測儀器為7600-210全自動生化分析儀（日本日立公司）。

1.4 統計學方法

采用SPSS 22.0軟件和LMS chartmaker Light 2.54軟件進行統計分析。采用Excel 2007軟件制作圖表。采用Kolmogorov-Smirnov檢驗分析數據的正態性。非正態數據進行自然對數轉換后再檢驗其正態性。采用“Stem-and-Leaf & Box Plots”方法剔除離群值。不同性別之間比較采用Mann-Whitney U檢驗，不同年齡組之間比較采用Kruskal-Wallis H檢驗。采用LMS法擬合連續百分位數曲線分析血清淀粉酶隨年齡的變化。將剔除離群值后的數據從小到大排列，取第97.5百分位數（P97.5）和第2.5百分位數（P2.5）作為參考區間的上、下限。

2 結果

2.1 血清淀粉酶參考區間的建立

血清淀粉酶數據呈偏態分布，經自然對數轉換后呈正態分布。剔除256個離群值，最終納入4 981例研究對象，其中男2 839名、女2 142名，年齡20～89歲。自然對數轉換及剔除離群值前后數據分布見表1。根據年齡分為20～30歲組、31～40歲組、41～50歲組、51～60歲組、>60歲組。各年齡組男、女性之間血清淀粉酶差異有統計學意義（P<0.05），不同年齡組之間差異均無統計學意義（P>0.05）。男性和女性的P97.5曲線隨年齡呈上升趨勢，P2.5、第25百分位數（P25）、第50百分位數（P50）和第75百分位數（P75）曲線則較為平緩。見圖1。建立的參考區間為：男性31～102 U/L，女性33～107 U/L。

表1 血清淀粉酶數據自然對數轉換及剔除離群值前后數據分布

圖1 血清淀粉酶連續百分位數曲線

2.2 血清淀粉酶參考區間的比較

本研究血清淀粉酶參考區間存在性別差異，與行業標準[4]不同。行業標準的參考區間上、下限均高于本研究。見表2。

表2 本研究與行業標準血清淀粉酶參考區間的比較

3 討論

血清淀粉酶在急性胰腺炎中的敏感性為87.0%、特異性為88.6%[5]，對急性闌尾炎、腸梗阻也有輔助診斷作用[6]，因此建立準確的參考區間尤為重要。間接法建立參考區間成本低、數據來源充足、操作簡便，但對數據分析時，易納入潛在疾病患者的數據，需使用合適的方法剔除離群值。

行業標準推薦采用Dixon法剔除離群值[7]，但CLSI EP28-A3c文件[3]中提出在同側異常值相近時，Dixon法易受掩蓋效應的影響，導致離群值不能被完全剔除。“Stem-and-Leaf & Box Plots”法將≥3倍四分位數間距的離群值剔除，此方法要求數據呈正態分布，偏態數據會導致正常值被剔除或出現離群值的掩蓋效應[8]。本研究數據呈偏態分布，應用自然對數即可轉換為正態分布。百分位數曲線可為年齡分區提供參考依據，本研究男性與女性P97.5分位數曲線呈上升趨勢，這可能是各年齡段人數分布不均所致。確定參考區間上、下限的方法包括參數法和非參數法，參數法要求數據呈正態分布，常以±1.96s作為參考區間的上、下限。EP28-A3c指南中推薦非參數法作為確定參考區間的方法之一，同時要求樣本量超過120例，我國已有研究運用非參數法建立參考區間[9-12]。本研究數據分布及樣本量滿足要求，因此選用非參數法建立參考區間，以P97.5、P2.5作為參考區間上、下限。

本研究建立的血清淀粉酶參考區間與行業標準不同，可能是因為地理環境、飲食習慣、檢測方法、樣本量差異所致。行業標準中參考區間上限顯著高于本研究，且參考區間較寬。這可能因為行業標準納入的參考人群分布較廣，而本研究僅限于長春地區。

綜上所述，本研究利用實驗室信息系統中的數據初步建立了適用于長春地區人群的血清淀粉酶參考區間，結果存在性別差異，且上、下限與行業標準存在一定的差異。本地區臨床診斷相關疾病時應考慮性別差異，目前全國各大醫院的信息系統已逐步完善，為間接法創造了便利條件，各地區實驗室可建立更加合理、準確的參考區間。