黔南州新生兒篩查實驗室質量及實驗結果淺析

王海萍

目的：本院于2016年5月開始組建和運作黔南州新生兒篩查分中心實驗室，從開始運作以來本實驗室進行了18萬多的新生兒篩查，在不斷總結中提高陽性可疑檢測率，為新生兒缺陷防治防控把好最后一道關。現把2019這一年的實驗室質量管理及實驗室檢測結果做一個粗略分析，以點概面總結黔南州地區新生兒血片篩查陽性率、復診率及確診率的統計結果。

1. 對象及方法

1.1 標本來源：以黔南州12個縣市2019年45559例新生兒為研究對象，所有有新生兒接生資質的醫療單位出生的新生兒都篩查，年篩查率在98%以上。其中男孩子24253例，女孩子21304例，其中兩例性別未明。

1.2 血片采集：按照標準新生兒應于出生72 小時后，7 天之內，充分哺乳后（或者混合奶），在足跟部采取末梢血，采血時讓血自然流出，第一滴擦掉，第二滴以后滴于貴州里定公司 YZB/黔型 800mm 專用濾紙上，滲透正反兩面，制備成4 個大于8mm血斑標本，置室溫3個小時自然陰干，收入塑料袋中密封保存。本院及本市區血片收到后立即放置 2-8℃冰箱。其它縣市的標本經過快遞方式到本院，記錄登記后也立即放置2-8℃冰箱。

1.3 檢驗方法：設備和試劑：時間分辨熒光免疫測定儀 FLX800 型（美國Biotek instvets公司），Neo-TSH FEIA試劑盒、Neo-17-OHPFEIA試劑盒、Neo-PheFEIA試劑盒和Neo-G6PDFEIA試劑盒。每個試劑盒內有標準質控及6點標準曲線血片，相關配置的里定系統程序與輔助儀器可直接打印結果。

1.4 結果判斷：新生兒篩查 TSH cut-off>8.5mIU/l 為CH可疑，17-OHP cut- off>30ng/ml 為CAH可疑，PKU cut-off>2.0mg/100ml 為HPA可疑，G6PD cut-off<3.5為G6PS陽性可疑。每次初篩可疑的血片再同片復查一次，結果仍然可疑，由新篩辦公室電話召回本實驗室復采檢驗。結果還是陽性，進一步到上級醫院確診。

2.實驗結果

2019 年本實驗室篩查新生兒總人數是45559人。初篩后陽性總人數是2359人，其中葡萄糖-6-磷酸脫氫酶（G6PD）1518人;新生兒促甲狀腺素（TSH）755人;17a-羥孕酮（17-OHP）80人;苯丙氨酸（PKU）6人。初篩總陽性率是5.18%，四個項目陽性率占比分別是：G6PD 3.33%、TSH 1.66%、17-OHP 0.18%、PKU 0.01%（圖1）。通過電話召回到本實驗室復篩的初篩陽性總人數是1015人。復篩后還是陽性可疑結果的總人數是318人，占比 31.3%;復篩后陰性結果總人數是697人，占比 68.7%。復篩血片中四個項目各自占比是：解葡萄糖-6-磷酸脫氫酶（G6PD）復篩 354人，陽性可疑結果人數是233人，陰性結果人數是 119人;新生兒促甲狀腺素（TSH ）復篩593人，陽性可疑結果人數是74人，陰性結果人數是 519人;17a-羥孕酮（17-OHP） 復篩65人，陽性可疑結果人數是 10人，陰性結果 人數是55人;苯丙氨酸（PKU）復篩 3人，陽性可疑 結果人數是1人，陰性結果人數是 2人。總的來看解葡萄糖-6-磷酸脫氫酶（G6PD ）復篩率是 34.9%，陽性率 66.4%，陰性率 33.6%;新生兒促甲狀腺素（TSH ）復篩率是58.4%，陽性率12.5%，陰性率87.5%;17a-羥孕酮（17-OHP ）復篩率是6.4%，陽性率15.4%，陰性率84.6%;苯丙氨酸（PKU） 復篩率是0.3%，陽性率33.3%，陰性率66.7%（圖2）。

2019年本實驗室復篩陽性可疑的患者，經過進一步確診的陽性結果人數分別是：先天性甲狀腺功能減低癥（TSH）35人;先天性腎上腺皮質增生癥（CAH）2人;苯丙酮尿癥（PKU）沒有確診病例;葡萄糖-6-磷酸脫氫酶缺乏癥（G6PD）365人。（本實驗室把葡萄糖-6-磷酸脫氫酶（G6PD）初篩陽性熒光值小于2以下的新生兒可疑患者，由新篩管理人員直接電話告知進一步到上級醫院確診，因此最后確診總人數比本實驗室復篩陽性人數多）

3.結論

從四個項目的確診人數來看，2019年黔南州地區葡萄糖-6-磷酸脫氫酶（G6PD） 篩出的新生兒患者人數最多。符合我國葡萄糖-6-磷酸脫氫酶（G6PD）新生患兒分布呈現南高北低，又以廣東，廣西，海南，貴州等地人群患病率高的趨勢（1）。先天性甲狀腺功能減低癥（TSH）新生兒患者其次，先天性腎上腺皮質增生癥（CAH）偶有確診病例，而苯丙酮尿癥（PKU）無確診病例。新生兒篩查實驗屬于國家出生缺陷三級防控中的最后一道防控線，新生兒出生后只有這最后一次篩查和診斷機會，篩查質量關系著千千萬萬個患兒終生的幸福，因此，加強新生兒篩查的每一個環節的質量控制非常重要。從這一年的實驗數據來分析，我們發現新生兒血片從采集到寄送到檢測到出結果影響因素很多。把控好每一個環節，提高質量控制，對最后的檢測結果都至關重要。在實驗中發現，新生兒血片采集過早（少于72小時）或喂奶次數達不到8次的標準，先天性甲狀腺功能減低癥（TSH）檢測值偏高，假陽性增加;先天性腎上腺皮質增生癥（CAH）檢測值偏低，假陰性增加（1）。受季節影響，夏天溫度升高，葡萄糖-6-磷酸脫氫酶（G6PD）分解加快，檢測值偏低，假陽性增多（2）。而先天性甲狀腺功能減低癥（TSH）檢測值受季節溫度的影響最大，夏季結果偏低，冬季結果偏高 （3）。為了解決季節因素帶來的影響，在實驗前的這個環節上，本實驗室著重交待各個縣市郵寄新生兒血片時多加個冰袋一起郵寄，緩解葡萄糖-6-磷酸脫氫酶（G6PD）的降解，減少溫度因素造成檢測值偏低的情況;實驗中的這個環節，在保證血片質量的情況下，冬季做促甲狀腺素（TSH）實驗前，先把洗液放水箱中加溫溶解結晶，消除試劑結晶堵塞洗板機，影響洗板質量的影響。同時保證實驗室內合適的溫度和濕度，減少實驗環境干擾，冬天保持實驗室室溫在24度左右。注意每個項目試劑不同批號之間的差異，關注每次中位數的變化對檢測結果的影響，盡可能排除不同批號試劑對實驗的干擾。不斷提高質量管理和篩查水平，減低各個環節上的干擾，做好每次的室內質控，減少假陰性和假陽性率，讓結果可信可靠。

本實驗室屬于初篩實驗室，所有的新生兒血片樣本都要經過下面的流程：第一次初篩檢測，檢測出的陽性可疑血片，再同片檢測第二次，第二次檢測陽性可疑的新生兒，由新篩辦公室工作人員通知家屬，對新生兒進行血樣復采，然后送至本實驗室進行最后一次復篩，結果依然陽性，再告知家屬帶到上一級醫院進行確診。這樣最大限度的避免了假陰性和假陽性出現的概率，確保真正的陽性患兒得到及時救治。早發現，早治療，減輕家庭和社會的經濟負擔。

參考文獻：

[1]田國力 上海市兒童醫院 新生兒葡萄糖-6-磷酸脫氫酶缺乏癥 新生兒篩查診斷和診療 專家共識

[2]章印紅 朱寶生 王瑞紅等 存儲溫度和時間對濾紙片干血斑標本葡萄糖-6-磷酸脫氫酶活性的影響（J/CD） 中華婦幼臨床醫學雜志電子版20084（6）563-566

[3]鄧俊耀 不同季節對新生兒甲狀腺功能低下癥篩查影響研究現狀國際檢驗醫學雜志2017（038）002