2019—2021年廈門市某醫(yī)院食源性沙門菌檢出情況及耐藥性分析

吳文輝 陳涌泉 吳健寧

福建醫(yī)科大學(xué)附屬廈門弘愛醫(yī)院醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中心，廈門 361006

沙門菌屬細(xì)菌感染是臨床常見的食源性疾病和人畜共患病，可引起感染性腹瀉和食物中毒等多種臨床表現(xiàn)，嚴(yán)重威脅人類的健康安全［1］。全國細(xì)菌耐藥監(jiān)測(cè)網(wǎng)報(bào)告發(fā)布的數(shù)據(jù)顯示，2014—2019年，在61 809例不同食源性腸道病原菌感染患者中，居前3 位的分別是沙門菌屬（82.12%）、志賀菌屬（8.08%）和弧菌屬（4.03%），且沙門菌屬在每年糞便標(biāo)本致病菌中占絕對(duì)優(yōu)勢(shì)，均在70%以上［2］。目前，實(shí)驗(yàn)室主要通過對(duì)糞便樣本進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)和分離純化，結(jié)合形態(tài)學(xué)和生化反應(yīng)特性對(duì)沙門菌進(jìn)行鑒定和分型。近年來，基質(zhì)輔助激光解析飛行時(shí)間質(zhì)譜（MALDI-TOF MS）分析技術(shù)在細(xì)菌鑒定方面的應(yīng)用得到了廣泛認(rèn)可，并已應(yīng)用到沙門菌的實(shí)驗(yàn)室鑒定。臨床上，抗生素仍是治療沙門菌屬細(xì)菌感染的常用手段，然而，近年來由于抗菌藥物的不規(guī)范使用，導(dǎo)致沙門菌株耐藥現(xiàn)象日趨嚴(yán)重。研究顯示，沙門菌對(duì)于多種常用抗生素存在較高的耐藥率，多重耐藥率也逐漸上升［3］。鑒于此，為進(jìn)一步了解本地區(qū)食源性沙門菌的感染分布情況和其耐藥特征，本研究對(duì)福建醫(yī)科大學(xué)附屬廈門弘愛醫(yī)院2019—2021 年食源性沙門菌的檢出情況進(jìn)行回顧性分析，為本地區(qū)沙門菌感染的防治提供參考，現(xiàn)報(bào)道如下。

材料與方法

1、菌株來源

2019 年1 月至2021 年12 月就診于福建醫(yī)科大學(xué)附屬廈門弘愛醫(yī)院的761 例疑似食源性病原菌感染患者，其中男性447 例，女性314 例，年齡0～95 歲。收集患者糞便樣本進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)和鑒定，根據(jù)患者性別、年齡和采樣時(shí)間等進(jìn)行分組，對(duì)沙門菌的檢出情況和耐藥特征進(jìn)行橫斷面研究和分析，同一患者一次就診期間多次培養(yǎng)僅取1 次鑒定結(jié)果。該研究系對(duì)患者臨床檢測(cè)結(jié)果數(shù)據(jù)進(jìn)行回顧性研究分析，研究過程中已規(guī)避患者個(gè)人隱私信息，且不存在其他倫理問題，豁免倫理審批。研究開展前已告知患者家屬相關(guān)研究內(nèi)容，并與患者或其家屬簽訂知情同意書。

2、儀器、試劑和質(zhì)控菌株

2.1、儀器與試劑 XLD瓊脂平板、SS瓊脂平板和MH平板（鄭州貝瑞特），VITEK-MS 質(zhì)譜儀（法國梅里埃），VITEK 2 COMPACT 全自動(dòng)微生物分析系統(tǒng)及其配套GN 鑒定卡和AST-GN67 藥敏卡（法國梅里埃）；沙門氏菌診斷血清（寧波天潤）。

2.2、質(zhì)控菌株 大腸埃希菌ATCC8739，大腸埃希菌ATCC25922，銅綠假單胞菌ATCC27853，腸炎沙門菌WSB1907。

3、檢測(cè)方法

3.1、樣本采集和培養(yǎng) 使用抗菌藥物前，采集腹瀉患者的新鮮糞便樣本（帶有黏液、血樣等為佳），接種于XLD瓊脂平板和SS瓊脂平板，置35 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)24～48 h。

3.2、細(xì)菌鑒定和藥敏試驗(yàn) 按照第3版《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》進(jìn)行細(xì)菌分離鑒定，分離出的菌株先經(jīng)VITEK-MS 質(zhì)譜儀和VITEK 2 COMPACT 全自動(dòng)微生物分析系統(tǒng)進(jìn)行鑒定，再通過診斷血清進(jìn)行凝集試驗(yàn)和分型確認(rèn)。采用VITEK 2 COMPACT 全自動(dòng)微生物分析系統(tǒng)及其配套的AST-GN67 藥敏卡對(duì)菌株進(jìn)行藥敏試驗(yàn)，結(jié)果按照美國臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(huì)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行判讀，并采用WHONET 5.6對(duì)沙門菌耐藥性情況進(jìn)行分析。

4、統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用SPSS 25.0 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析，采用描述性統(tǒng)計(jì)方法對(duì)沙門菌分布情況和耐藥情況進(jìn)行表述，計(jì)數(shù)資料之間的比較采用χ2檢驗(yàn)，以P<0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié)果

1、沙門菌總體檢出情況

經(jīng)VITEK-MS 質(zhì)譜分析和血清凝集試驗(yàn)，761例疑似食源性病原菌感染患者中共檢出沙門菌感染69 例，總檢出率為9.07%（69/761）。69 株沙門菌分布于6 個(gè)血清群16 個(gè)血清型，以B 群和D 群為主，鼠傷寒沙門菌和腸炎沙門菌占比最高，分別占42.03%（29/69）和23.19%（16/69）。見表1。

表1 69株沙門菌屬細(xì)菌血清型分布

2、不同性別和年齡患者沙門菌感染情況分析

經(jīng)卡方檢驗(yàn)，不同性別患者沙門菌檢出率差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=0.142，P=0.706）；不同年齡段患者沙門菌檢出率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=65.005，P<0.001），0～18歲未成年人檢出率顯著高于成年人。見表2。

表2 不同性別和年齡疑似食源性病原菌感染患者沙門菌感染情況分析

3、不同月份沙門菌的檢出情況分析

不同月份沙門菌檢出率有一定差異，沙門菌檢出率隨月份呈現(xiàn)一定的變化趨勢(shì)，5—10 月份檢出率較高，各月份沙門菌檢出情況見表3，沙門菌檢出率隨月份變化趨勢(shì)見圖1。

圖1 沙門菌檢出率隨月份變化趨勢(shì)

表3 不同月份沙門菌的檢出情況分析

4、沙門菌屬細(xì)菌耐藥性分析

在69株沙門菌中，共有55株進(jìn)行了藥敏試驗(yàn)。藥敏結(jié)果顯示，沙門菌對(duì)氨芐西林和氨芐西林/舒巴坦的耐藥率最高，耐藥率分別為74.55%（41/55）和61.82%（34/55），對(duì)復(fù)方新諾明的耐藥率為38.18%（21/55），尚未發(fā)現(xiàn)亞胺培南耐藥沙門菌株。沙門菌對(duì)常用抗生素耐藥情況。見表4。

表4 沙門菌屬細(xì)菌耐藥性分析（55株）

討論

本研究結(jié)果顯示，在761 例疑似食源性病原菌感染患者的糞便標(biāo)本中共檢出沙門菌69株，檢出率為9.07%，與深圳地區(qū)的8.30%的檢出率較接近［4］，但明顯高于山西的2.04%［5］。由于廈門位于東南沿海，屬于亞熱帶海洋性季風(fēng)氣候，溫和多雨，溫度較高且濕度也大，食物容易滋生細(xì)菌，并且人們喜歡吃生冷食品，容易引起沙門菌感染，這種特殊的地理和氣候條件，導(dǎo)致沙門菌感染的檢出率較高。69 株沙門菌經(jīng)血清凝集試驗(yàn)分布于6 個(gè)血清群16 個(gè)血清型，以B 群和D 群為主，排名前2位的分別是鼠傷寒沙門菌血清型和腸炎沙門菌血清型，這也與福建省沙門菌中檢出率最高的2 種血清型相吻合［6］，兩者占總檢出數(shù)的65.22%；但和向蓉等［7］的研究結(jié)果有差異，說明沙門菌感染存在地區(qū)性的特點(diǎn)。本研究未檢出傷寒沙門菌，但檢出1 例乙型副傷寒沙門菌，說明侵襲性沙門菌感染還是有發(fā)生，應(yīng)引起關(guān)注。

沙門菌感染性別分布差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），但在年齡分布方面，未成年人檢出率顯著高于成年人和老年人（P<0.001），具有明顯的年齡分布差異，這可能與未成年人群免疫力相對(duì)低下，較容易引起感染有關(guān)。對(duì)沙門菌檢出月份分析發(fā)現(xiàn)各個(gè)月份均有檢出沙門菌，且5—10 月份檢出率較高，與周紹英等［8］和劉雪杰等［9］研究相似，這可能是廈門和寧波都地處于東南沿海，氣候和飲食習(xí)慣也較相近。同時(shí)沙門菌檢出率呈現(xiàn)明顯的季節(jié)性，同多地區(qū)報(bào)道的季節(jié)分布相似［10-11］。沙門氏菌經(jīng)由糞口途徑傳播，建議人們?cè)谙那锔甙l(fā)季節(jié)要注意飲食衛(wèi)生，特別是魚、禽、奶、蛋類等食物要洗干凈并煮熟再食用。

抗生素是治療沙門菌屬細(xì)菌感染的常用手段，臨床上一般以第3 代頭孢菌素和喹諾酮類藥物作為首選用藥［12］。本研究顯示，沙門菌對(duì)于3 代頭孢菌素類藥物頭孢曲松和頭孢他啶的耐藥率分別為14.55%和9.09%，遠(yuǎn)低于太原地區(qū)沙門菌對(duì)3 代頭孢菌素的耐藥性［13］，且對(duì)喹諾酮類藥物左氧氟沙星的耐藥率也低于劉雪杰等［9］的研究，這表明3代頭孢菌素和喹諾酮類藥物仍然可以作為治療沙門菌感染的經(jīng)驗(yàn)用藥。而對(duì)氨芐西林、氨芐西林/舒巴坦和復(fù)方新諾明的耐藥率較高，分別為74.55%、61.82%和38.18%，高于國內(nèi)多地區(qū)報(bào)道［9，14］，應(yīng)引起臨床醫(yī)生的關(guān)注。此外，藥敏結(jié)果分析顯示本地區(qū)沙門菌對(duì)于其他抗生素仍然保持較高的敏感度，特別是亞胺培南，尚未檢出耐藥株。

綜上所述，廈門市沙門菌感染血清型多而復(fù)雜，以鼠傷寒沙門菌和腸炎沙門菌為主，未成年人感染占主要部分，具有明顯的季節(jié)性和地區(qū)性特點(diǎn)，夏秋季為高發(fā)季節(jié)。同時(shí)，本地區(qū)沙門菌對(duì)于常用的抗生素氨芐西林和氨芐西林/舒巴坦具有較高的耐藥率，臨床在治療沙門菌感染時(shí)應(yīng)該參照藥敏結(jié)果合理選用抗菌藥物，以減少耐藥菌的出現(xiàn)，同時(shí)注意調(diào)節(jié)腸道菌群微生態(tài)平衡。

利益沖突所有作者均聲明不存在利益沖突