李兆河
(1.威海海洋職業學院,山東威海 264300;
2.山東省海洋經濟藻類資源開發與利用工程技術協同創新中心,山東威海 264300)
錦鯉體色艷麗,花紋多變,素有“會游泳的藝術品”“水中活寶石”美譽,現已成為風靡全球的名貴觀賞魚。隨著我國經濟社會的快速發展,觀賞魚愛好者迅速增多,錦鯉也已成為我國觀賞魚市場的主要品種之一。隨著錦鯉市場需求的增加,高密度、工廠化養殖模式應運而生,但當下集約化養殖模式導致了疫病頻發與抗病性下降。錦鯉的健康狀況直接影響其觀賞價值,患病錦鯉體色黯淡無光。近年來,抗生素在水產養殖業正逐漸被禁止使用,因此,開發高效、綠色、環保、新型飼料添加劑成為發展綠色健康水產養殖模式的關鍵。
低聚異麥芽糖是功能性低聚糖中的一種,已被農業農村部批準為新型綠色飼料添加劑,具有提高免疫應答,增殖腸道有益菌群,抑制病原菌等功能(鄧近平等,2020)。相關研究表明,低聚異麥芽糖可以促進水產動物生長,降低餌料系數,增加體質蛋白質含量,降低糞便中氨氮含量,作為新型飼料添加劑可提高水產品品質(田方等,2010)。何四旺(2003)等發現,低聚異麥芽糖可以增強羅非魚抗應激、抗病及非特異性免疫能力。但低聚異麥芽糖對錦鯉生長性能、血液參數及抗氧化性的影響尚未見報道。因此,本研究旨在研究低聚異麥芽糖對錦鯉生長性能、血液參數及抗氧化性能的影響,篩選出低聚異麥芽糖的最優添加量,為低聚異麥芽糖在錦鯉飼料中的應用提供科學依據。
1.1 低聚異麥芽糖及飼料 低聚異麥芽糖由保齡寶生物股份有限公司提供,以玉米淀粉為原料,經由酶解法得到,主要成分為異麥芽糖、潘糖、異麥芽三糖。根據錦鯉營養需求配制基礎日糧,以魚粉、豆粕為蛋白源,以大豆油、魚油為主要脂肪來源,主要營養成分為粗蛋白質:34.2%,粗脂肪:7.3%,粗灰分:6.1%,飼料原料由北京維百奧生物技術有限公司提供。低聚異麥芽糖的添加量分別為0.0%、0.2%、0.4%、0.6%。將低聚異麥芽糖與基礎日糧混勻后進行粉碎,過60 目篩,加純凈水,制成直徑為2.0 mm 的硬顆粒,在烘箱中60℃烘干,置于4℃冰箱中保存備用。
1.2 試驗設計與飼養管理 養殖試驗在室內循環水養殖系統中進行,試驗錦鯉由濟南喜順錦鯉養殖專業合作社提供,在實驗室條件下暫養2 周,暫養期間投喂基礎飼料,馴化完成后挑選240 尾體質健壯、規格一致[(30±1)g] 的錦鯉,將其隨機分為4 組,每組3 個重復,每個重復20 尾魚,第一組為基礎飼料(對照組),第二組IMO 添加量為0.2%(T1 組),第三組IMO 添加量為0.4%(T2 組),第四組IMO 添加量為0.6%(T3 組),養殖持續8 周。試驗期間水溫穩定在(23±2)℃,溶解氧在5 mg/L 以上,pH=7.5 左右,維持自然光照。每天飼喂兩次,投喂時間分別為上午9:00,下午4 :00,投喂量為體重的2%。
1.3 樣本采集及指標測定
1.3.1 樣品采集 養殖試驗結束后饑餓處理24 h,對每個重復進行魚體計數并稱量魚體總重量,用于計算生長性能指標,每個重復隨機取6 尾魚,尾靜脈采血,4℃,4000 g 離心10 min,取上清,置于-20℃冰箱中,用于測定血液參數及抗氧化性指標。
1.3.2 生長性能測定 計算增重率、蛋白質效率、餌料系數、成活率,具體公式如下:
增重率(WGR,%)=(Wt-W0)/W0×100 ;蛋白質效率(PER,%)=(Wt-W0)/(F×CP)×100 ;
餌料系數(FCR)=F/(Wt-W0);
成活率(SR)=Nt/N0;
式中,Wt為試驗后體重;W0為初始體重;F為飼料投喂量;CP 為蛋白質比率;Nt為存活魚尾數;N0為初始魚尾數。
1.3.3 血液參數及抗氧化性測定 測定溶菌酶活性(LYS)、酸性磷酸酶活性(ACP)、堿性磷酸酶活性(AKP)、補體C3 和C4 含量5 個血液參數,測定總超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GPX)、過氧化物酶(CAT)和丙二醛(MDA)含量4 個抗氧化指標;均采用南京建成生物有限公司生產的試劑盒測定。
1.4 數據分析 所有試驗數據采用Excel 進行統計整理,用SPSS(18.0)軟件進行單因素方差(one-way ANOVA)分析,然后用Duncan’s 法進行多重比較分析,試驗結果用“平均值±標準差”表示,P <0.05 表示差異顯著。
2.1 低聚異麥芽糖對錦鯉生長性能的影響 由表1 可知,與CK 組相比,T1、T2 和T3 末重和增重率均有不同程度的提高,T2、T3 組顯著高于CK 組(P <0.05),其 中IMO 添 加 量 為0.4% 的T2 組效果最好,增重率提高38% ;各試驗組餌料系數均顯著低于CK 組(P <0.05),試驗組之間的差異不顯著,其中T2 組降幅最大;各組蛋白質效率均有所提高,T2、T3 兩組顯著高于CK 組(P<0.05),T2 組增幅最大,各組成活率無顯著性差異(P >0.05)。

表1 低聚異麥芽糖對錦鯉生長性能的影響
2.2 低聚異麥芽糖對錦鯉血液參數的影響 由表2 可知,與CK 組相比,各試驗組LYS 活性均有增高,T2、T3 組與CK 組相比有顯著差異(P<0.05),T2 組增加幅度最大,各試驗組間差異不顯著(P >0.05);ACP 活性在各試驗組均表現不同程度地升高,其中T2 組增高幅度最大,與CK組差異顯著(P <0.05),但各試驗組間差異不顯著;各試驗組AKP 活性均表現為升高,其中T2組增幅最大,與T1 組和CK 組相比有顯著差異(P<0.05);各試驗組補體C3 的濃度均表現為升高,T2 組升高幅度最大,與T1 組和CK 組相比具有顯著差異(P <0.05),但T1 組與對CK 組差異不顯著(P >0.05);各試驗組補體C4 的濃度均有一定程度的提高,其中T2 組提高幅度最大,與CK組、T1 組、T3 組具有顯著差異(P <0.05),但CK組、T1 組、T3 組相互間無顯著差異(P >0.05)。

表2 低聚異麥芽糖對錦鯉血液參數的影響
2.3 低聚異麥芽糖對錦鯉血液抗氧化指標的影響 由表3 可知,其中SOD、CAT、GPX 活性均表現為不同程度升高,與CK 組相比,T2 的SOD 和GPX 活性顯著升高(P <0.05),但T1 和T3 組與CK 組無顯著性差異(P >0.05),試驗組間差異不顯著;試驗組CAT 活性均與CK 組有顯著差異(P<0.05),T2 組增長幅度最大;試驗組MDA 含量均不同程度地下降,T2 降幅最大,與CK 有顯著差異(P <0.05),但T1 和T2 組與CK 組差異性不顯著(P>0.05),各試驗組間無顯著性差異(P >0.05)。

表3 低聚異麥芽糖對錦鯉血液抗氧化指標的影響
研究表明,低聚糖具有促進動物生長,降低餌料系數等功能。低聚糖在水產動物飼料中的相關研究較少,何四旺等(2003)研究顯示,低聚異麥芽糖和低聚果糖對羅非魚生長性能無顯著影響,但可顯著提高存活率;毛劍婷等(2014)研究表明,低聚異麥芽糖添加量為0.6% 和0.9% 時,可顯著提高三角魴生長性能指標。本研究表明,添加低聚異麥芽糖可提高錦鯉增重率和蛋白質利用率,降低餌料系數,添加量為0.4% 時效果最佳。
LYS 可殺死革蘭氏陽性菌,防御病原入侵,是重要的非特異性免疫指標(Grinde B,1988);ACP 和AKP 在能量傳遞、信號轉導等方面具有關鍵作用,也參與魚類免疫反應(崔培等,2013);補體可直接參與防御外源病毒入侵,并可調理體液免疫。本研究結果表明,飼料中添加低聚異麥芽糖可提高錦鯉血液中LYS、CAT、AKP活性及補體C3、C4 的濃度,增強錦鯉非特異性免疫力。這可能是由于低聚異麥芽糖可有效增殖腸道中雙歧桿菌、嗜酸乳桿菌等有益菌,抑制有害菌生長,已有研究表明,低聚糖具有提高機體免疫力,抑制有害菌增殖的作用(Hoseinifar 等,2016 ;Zhang 等,2013 ;Lin 等,2012)。
在魚抗氧化防御系統中,SOD、CAT、GPX 發揮著重要作用,Poolsawat 等(2020)研究發現,低聚果糖具有提高羅非魚血液中抗氧化相關酶活性,降低丙二醛MDA 濃度的作用;張春暖等(2021)研究表明,低聚果糖和乳酸菌具有增強錦鯉體內抗氧化作用。本研究結果表明,在飼料中添加低聚異麥芽糖后,錦鯉血液中SOD、CAT、GPX 活性有不同程度地提高,證明低聚異麥芽糖具有調理錦鯉機體抗氧化防御系統,增強抗氧化能力的作用。本研究結果還顯示,低聚異麥芽糖具有降低錦鯉血液MDA 濃度的作用,從另外一個方面證明了低聚異麥芽糖具增強抗氧化能力,防止機體受損的作用。
本研究結果表明,在本試驗研究條件下,飼料中添加低聚異麥芽糖具有提高錦鯉生長性能,改善血液免疫功能,提高抗氧化能力的作用,其中低聚異麥芽糖添加量為0.4% 時效果最佳。