原發性舍格倫綜合征30 例IL-27 表達水平及其與羥氯喹干預效果的關系

郭卉，沈安妮，邵一帆

九江市第一人民醫院，江西 九江 332000

原發性舍格倫綜合征（primary Sjogren's syndrome，PSS）又稱為原發性干燥綜合征，是一個主要累及外分泌腺體的慢性炎癥性自身免疫病。臨床上除有唾液腺和淚腺受損，分泌功能下降而出現口干、眼干外，尚有腺體外其他器官的受累而出現多系統損害的癥狀［1］，患者血清中則有多種自身抗體和高免疫球蛋白血癥［2］。目前PSS 的治療還是經驗性的，主要以對癥和替代治療為主，出現嚴重內臟損害者，可應用糖皮質激素和免疫抑制劑。國內外文獻報道均顯示羥氯喹治療PSS 可減輕患者的關節痛和改善患者的免疫學指標。

白細胞介素27（IL-27）是一種在免疫系統中發揮多效性的細胞因子，在生理和病理條件下均具有多種免疫調節活性［3］。IL-27 增強了Th1 和CD8 的功能T 細胞，促進Tfh 和Tr1 的發育，抑制Th2、Treg、Th9 和Th17 細胞的功能。IL-27 還參與調解B 細胞、NK、DCs 和巨噬細胞的免疫應答。IL-27 的產生在轉錄和轉錄后水平上都受到嚴格的調控［4］。IL-27 對免疫調節具有廣泛作用，它與眾多自身免疫性疾病有關。原發性舍格倫綜合征的致病機制至今尚未完全闡明，本研究通過檢測原發性舍格倫綜合征患者外周血中IL-27 的水平，旨在探討原發性舍格倫綜合征患者治療前后外周血中IL-27 的水平并了解羥氯喹的干預效果，以期為臨床治療提供參考依據。

1 資料與方法

1.1 研究對象

選取2019 年1 月至2020 年12 月于九江市第一人民醫院治療的持續單純應用硫酸羥氯喹片（上海上藥中西制藥有限公司，國藥準字H19990263）6 個月以上的原發性舍格倫綜合征患者（PSS 組）30 例和健康體檢者（對照組）30 例作為研究對象。其中原發性舍格倫綜合征患者組中男3 例，女27 例，平均年齡51.8 歲；對照組中男5 例，女25 例，平均年齡50.1 歲。兩組觀察對象在性別與年齡等一般資料間比較均差異無統計學意義（P＞0.05），具有可比性。本研究符合醫學倫理原則要求。

1.2 入選標準

所有入選的原發性舍格倫綜合征患者均符合2016 年美國歐洲風濕病聯盟制定的分類診斷標準［5］,同時在整個觀察期持續單純應用羥氯喹（0.2～0.4 g/d），未用激素、免疫抑制劑、生物制劑或小分子靶向藥、植物制劑或中藥，未長期應用滴眼液、促進唾液分泌的藥物，并剔除合并糖尿病、腫瘤、感染或其他免疫系統疾病者。

1.3 標本采集及處理

用干燥管抽取所有原發性舍格倫綜合征患者及體檢者清晨空腹靜脈血兩管，每管約3 mL,經 4 000 r/min 離心5 min 后分離血清于-80 ℃冰箱凍存待檢。用酶聯免疫吸附試劑盒（BD 公司）檢測所有研究對象外周血中IL-27 的水平，所有步驟嚴格按照試劑盒說明書執行。ESR 選用重慶天海動態血沉分析儀（ESR-2040）檢測，C 反應蛋白（CRP）、免疫球蛋白A（IgA）、免疫球蛋白G（IgG）、免疫球蛋白M（IgM）和免疫球蛋白E（IgE）選用全自動特定蛋白儀（BECKMAN IMMAGE800）檢測。

1.4 統計學方法

采用SPSS 25.0 軟件對所有數據進行統計分析，實驗結果以表示，采用t檢驗，Spearman 法用于分析各指標間的相關性，以P＜0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 原發性舍格倫綜合征患者外周血中IL-27 的濃度變化

PSS 組和健康對照組外周血中IL-27 的水平分別為（14.54±1.54）pg/mL 和（24.64±1.83）pg/mL，PSS 組的IL-27 水平明顯低于對照組，兩組之間的差異有統計學意義（t=22.75，P＜0.001），見圖1。

2.2 PSS 組與對照組炎癥因子的結果比較

原發性舍格倫綜合征患者外周血中的炎癥因子ESR、CRP、IgA、IgG、IgM 以及IgE 水平分別高于對照組，且差異有統計學意義（P＜0.05），詳見表1。

表1 PSS組和對照組的結果比較（）

表1 PSS組和對照組的結果比較（）

2.3 IL-27 與其他炎癥因子的相關性比較

根據Spearman 相關性分析結果顯示，在原發性舍格倫綜合征患者外周血中，IL-27 與ESR、CRP和IgG 分別呈負相關（r=-0.439 6、-0.382 6、-0.468 9，P＜0.05），而IL-27 與IgA、IgM 和IgE 之間無相關性（P＞0.05）。具體詳見圖2。

圖2 外周血IL-27表達水平與其他炎癥因子（A.ESR；B.CRP；C.lgG；D.lgA；E.lgM；F.lgE）的相關性比較

2.4 羥氯喹治療前后原發性舍格倫綜合征患者外周血中IL-27 的水平比較

羥氯喹治療前后原發性舍格倫綜合征患者外周血中IL-27 的水平分別為（14.54±1.54）pg/mL 和（22.52±1.89）pg/mL，羥氯喹治療前的IL-27 水平明顯低于治療后，差異有統計學意義（t=19.04，P＜0.001），見圖3。

圖3 羥氯喹治療前后外周血中IL-27的水平比較

3 討論

原發性舍格倫綜合征是指不具另一診斷明確的結締組織?。–TD）的干燥綜合征，是一種主要累及外分泌腺體的慢性炎癥性自身免疫病。原發性舍格倫綜合征的女性患者明顯多于男性，多于40～60歲發病。原發性舍格倫綜合征是一種全球性的自身免疫病，在我國人群的發病率為0.33%～0.77%，屬于風濕免疫科常見疾病。原發性舍格倫綜合征的常見臨床表現包括口眼干燥、關節腫痛及乏力、低熱等全身癥狀［6-7］。同時，原發性舍格倫綜合征患者血清中存在SSA 和Ro-52 等多種自身抗體［8-9］。

原發性舍格倫綜合征的發病原因至今不清，但大部分學者認為其是一個多種因素相互作用的結果，例如遺傳因素、感染因素和內分泌因素等都可能參與了疾病的發生和發展。有研究證實，HLA-B8、DR3 和DRw52 基因在原發性舍格倫綜合征患者中的陽性率顯著高于正常人群，這說明攜帶某些易感基因是原發性舍格倫綜合征的易感因素［10-11］。此外，在許多原發性舍格倫綜合征患者體內均發現EB 病毒有活躍復制，有專家推測EB 病毒可激活B 細胞，使之分化、增殖，進而產生大量的免疫球蛋白和自身抗體［12-13］。同時有學者認為，由于原發性舍格倫綜合征女性患者較多，因此雌激素的水平高可能也參與了疾病的發生發展［14］。

IL-27 是IL-12 家族的成員，由Epstein-Barr病毒誘導基因3（EBI3）和p28 亞基組成，前者與IL-12 p35 共享，后者是IL-27 的獨特亞基。IL-27通過其由兩條細胞內鏈組成的受體向細胞發出信號，gp130 與IL-6 和一條稱為IL-27Ra（也稱為WSX-1 或TCCR）的特定鏈共享。通過與其受體結合，IL-27 激活Janus 激酶（JAK）/信號轉導和轉錄激活劑（STAT）和絲裂原活化蛋白激酶（MAPK）信號，以在不同生理和病理條件下發揮多種免疫調節活性［15-16］。IL-27 產生的主要來源是樹突狀細胞和巨噬細胞。IL-27 在調節自身免疫性疾病的免疫反應中發揮多效作用。IL-27 一方面通過促進Th1、CD8、NK、Tfh 和B 細胞增殖功能以及通過抑制Treg 和Th2 細胞生成發揮促炎作用。另一方面，IL-27 還通過增強 IL-10 的產生和抑制樹突狀細胞功能發揮抗炎作用［17-19］。

本次研究中原發性舍格倫綜合征患者外周血中的IL-27 的水平為（14.54±1.54）pg/mL，而對照組外周血中IL-27 的水平為（24.64±1.83）pg/mL，兩組結果相比較，差異有統計學意義（P＜0.05）。原發性舍格倫綜合征患者外周血中IL-27 水平的降低提示了其可能在疾病的免疫功能調節方面起到了重要的作用，但IL-27 在原發性舍格倫綜合征中具體的作用機制還需要做進一步研究。本次研究發現，原發性舍格倫綜合征患者外周血中的ESR、CRP、IgA、IgG、IgM 以及IgE 的水平明顯高于健康對照組，并且差異有統計學意義（P＜0.05），此次研究結果與既往曾旖等［20］、楊雪君等［21］、杜星辰等［22］研究結果相似。同時，經相關性研究分析，在原發性舍格倫綜合征患者外周血中，IL-27 與ESR、CRP 和IgG 分別呈負相關（r=-0.439 6，-0.382 6，-0.468 9，P＜0.05），而IL-27 與IgA、IgM 和IgE 之間無相關性（P＞0.05）。而鑒于ESR、CRP 和IgG 都是目前原發性舍格倫綜合征診療過程中應用較好的指標，而IL-27 與ESR、CRP 和IgG 有顯著的相關性，這就使IL-27 可成為原發性舍格倫綜合征的輔助診斷指標。

本次研究發現羥氯喹治療前后原發性舍格倫綜合征患者外周血中IL-27 的水平分別為（14.54±1.54）pg/mL 和（22.52±1.89）pg/mL，羥氯喹治療前的IL-27 水平明顯低于治療后。羥氯喹是一種4 氨基喹啉類藥物，目前廣泛應用于系統性紅斑狼瘡、類風濕性關節炎和舍格倫綜合征等自身免疫性疾病的治療。有國內外文獻報道，羥氯喹治療原發性舍格倫綜合征可改善患者體內多種免疫學指標，包括ESR、IgG、RF 和IL-6 等。鑒于本次研究發現IL-27 與ESR、CRP 和IgG 呈顯著負相關，說明羥氯喹可能通過提升原發性舍格倫綜合征患者外周血中IL-27 的水平而達到治療效果。

綜上所述，雖然原發性舍格倫綜合征致病過程及發病機制尚需要做進一步的研究，但通過研究已發現IL-27 在原發性舍格倫綜合征患者外周血中的水平顯著降低并與ESR、CRP 和IgG 顯著負相關使得其可作為原發性舍格倫綜合征的輔助診斷指標，同時羥氯喹的干預可以有效上調IL-27 水平，其可能通過調節IL-27 水平達到治療作用。