氣相色譜法測定有機磷類農殘毛細管色譜柱的選擇

都麗莉 王云衢

摘 要：基于對當前農產品市場中蔬菜水果有機磷農藥殘留相關狀況的了解，依據國家抽檢細則，建立適用于多種有機磷農藥快速檢測的氣相色譜方法，其中氣相色譜柱的選擇在檢驗過程中起重要作用。本方法針對常見的7種有機磷農藥進行分析，通過對3種不同極性毛細管色譜柱進行試驗，觀察分離結果，選擇最適合農殘檢驗的毛細管色譜柱，進行加標回收試驗，并驗證色譜柱的適用性。

關鍵詞：氣相色譜;有機磷;農藥殘留;農產品;檢測

Selection of Capillary Chromatographic Column for Determination of Organophosphorus Residues by Gas Chromatography

DU Lili， WANG Yunqu

（Anshan Inspection， Testing and Certification Center， Anshan 114000， China）

Abstract： Based on the understanding of the relevant situation of organophosphorus pesticide residues in vegetables and fruits in agricultural products market， according to the national sampling rules， a gas chromatography method for the rapid detection of a variety of organophosphorus pesticides was established. The selection of gas chromatographic column plays an important role in the inspection process. In this method， seven kinds of common organophosphorus pesticides were analyzed， and the most suitable capillary chromatographic column for pesticide residue detection was selected by observing the separation results of three different polar capillary chromatographic columns. After that， linear equation and standard recovery tests were carried out to verify the applicability of the column.

Keywords： gas chromatography; organic phosphorus; pesticide residues; agricultural products; detection

在農業生產中，農藥的使用量較大，目前市場上被果農菜農廣泛應用的殺蟲劑主要是有機磷、氨基甲酸酯和擬除蟲菊酯類[1]。為了滿足人們對于果蔬高品質的需求，農藥、抗生素以及食品添加劑被大量使用，這些物質的超標使用會嚴重損害人們的身體健康。氣相色譜法是一種常用的檢驗有機磷類農殘的檢測方法，建立科學準確的農殘檢驗方法成為保障居民飲食安全的重要屏障[2]。

1 材料與儀器

1.1 材料與試劑

正己烷（色譜純4 L/瓶），丙酮（分析純，500 mL/瓶），國藥集團化學試劑有限公司;農殘標準溶液（敵敵畏、甲胺磷、乙酰甲胺磷、氧樂果、樂果、水胺硫磷和毒死蜱）（濃度均為100 μg/mL），農業部農殘標樣;HP-1毛細管色譜柱、DB-WAX 毛細管色譜柱、DB-1701P毛細管色譜柱，安捷倫公司;比色管，離心管。

1.2 儀器與設備

7890B氣相色譜儀，美國安捷倫公司;ME204E電子天平，梅特勒-托利多儀器（上海）有限公司;KQ-300DE超聲波清洗儀，昆山市超聲儀器有限公司;Allera64R 離心機，貝克曼庫爾特商貿（中國）有限公司;NS-10氮吹儀，上海屹堯儀器科技發展有限公司。

1.3 試驗方法

1.3.1 樣品前處理

分別將蘋果、黃瓜切碎，充分混勻，放入食品加工器粉碎，準確稱取各樣品25.0 g于100 mL離心管中，加入50.0 mL乙腈，在勻漿機中高速勻漿2 min后，用濾紙過濾，濾液收集到裝有6 g氯化鈉的100 mL具塞比色管中，收集濾液40～50 mL，蓋上塞子，劇烈振蕩1 min，在室溫下靜置30 min，使乙腈相和水相分層[3]。

1.3.2 樣品凈化

從比色管中吸取上清液，放入加有凈化包的50 mL離心管中，超聲5 min，8 000 r/min離心5 min，取上清液10.00 mL于比色管中，40 ℃水浴氮吹至近干。用正己烷定容至5.0 mL，再渦旋混勻，過濾膜移入樣品瓶中，供色譜測定。

1.3.3 標準工作液制備

取出冷藏的敵敵畏、甲胺磷、乙酰甲胺磷、氧樂果、樂果、水胺硫磷及毒死蜱農藥標準品，配制7種有機磷農藥的混合標準溶液。將標準品在室溫環境中靜置20 min，分別準確移取1 mL于10 mL容量瓶中，用正己烷和丙酮的混合溶液4∶1定容，搖勻，得到10 μg/mL混標中間液。將中間逐級稀釋，最終配制出濃度為0.02 μg/mL、0.05 μg/mL、0.10 μg/mL、0.20 μg/mL、0.40 μg/mL、0.60 μg/mL、0.80 μg/mL 和1.00 μg/mL的混合標準曲線系列溶液。

2 結果與分析

2.1 柱溫箱升溫程序及進樣方式

程序升溫在氣相色譜檢驗中是至關重要的一個環節，升溫程序的設定直接決定了待測組分是否能夠有效分離，尤其是沸點相近的組分分離的難度高。為了更好地分離沸點相近的組分，不同型號的毛細管柱會添加不同的固定相，或者搭配不同比例。根據混合標準品的沸點來設置程序升溫的初始溫度以及進樣口溫度。程序升溫的初始溫度要低于混合標準品的最低沸點，進樣口溫度應高于或等于混合標準品中最高沸點的溫度。檢測器的溫度不低于200 ℃，不高于色譜柱的最高使用溫度，兼顧各組分的沸點及熱穩定性[4]。

農殘檢測屬于痕量檢測，待測組分濃度較小，進樣方式采取不分流進樣，進樣量1 μL;選用不分流進樣方式的優點是進樣量大，樣品幾乎全部進入色譜柱中，色譜峰絕對響應值高;氣化室溫度：250 ℃;檢測器溫度：250 ℃;程序升溫條件：初始溫度120 ℃，保持1.0 min，以20 ℃/min升至185 ℃，保持5.0 min，以10 ℃/min升至235 ℃，保持10.0 min;流速：7.0 mL/min;進樣量：1 μL;尾吹氣流量為3 mL/min。

2.2 色譜柱的選擇

毛細管色譜柱具有分離效率高、分析速度快、柱容量小、靈敏度高等優點，已經逐步取代填充柱成為主流[5]。本試驗選擇不同類型的3種毛細管色譜柱在相同色譜條件下進行分析。3種毛細管色譜柱為弱極性色譜柱HP-1（30 mm×0.25 mm×0.25 μm）;中等極性色譜柱DB-1701P（30 m×0.32 mm×0.25 μm）;

強極性色譜柱DB-WAX毛細管色譜柱（30 mm×0.25 mm×0.25 μm）。

選取1.0 μg/mL的混合標準溶液用上述3種毛細管色譜柱在上述升溫程序的條件下進行分析，得到3組7種農殘混標的氣相色譜圖。從分離情況來看，HP-1毛細管柱與DB-WAX色譜柱分離情況相似，其中組分水胺硫磷與毒死蜱出峰重合，見圖1、圖2;由圖3可知，DB-1701P毛細管柱分離7種農藥種類，分離度、峰型、響應值均為3根色譜柱中最好，由此得出結論，DB-1701P（30 m× 0.250 mm×0.25 μm）毛細管色譜柱分離效果最好，可作為試驗用色譜柱。

2.3 驗證試驗

2.3.1 加標回收試驗

選取蘋果為空白基質，理論加標濃度為0.10 μg/mL進行重復6次的加標回收和精密度試驗，結果見表1。

2.3.2 7種農藥組分的線性范圍、回歸方程、相關系數

濃度在0.02～1.00 μg/mL線性范圍內，7種組分的回歸方程以及相關系數見表2。

3 結論與討論

選取DB-1701P（30 m×0.32 mm×0.25 μm）毛細管柱，分離效果比較理想。在0.02～1.00 μg/mL，線性關系良好（相關系數為0.998 4～0.999 5），能滿足定量檢測相關要求，7種有機磷農藥的加標回收率為88.2%～109.1%，精密度為0.20～0.41，實驗結果比較理想。

參考文獻

[1]梁一博，譚興，胡望資，等.我國蔬菜中農藥殘留現狀及其檢測技術的研究進展[J]農產品加工，2014（3）：74-78.

[2]楊秀蝦.氣相色譜法測定果蔬中有機磷農藥殘留[J].現代食品，2020（4）：209-222.

[3]中華人民共和國農業部.蔬菜和水果中有機磷、有機氯、擬除蟲菊酯和氨基甲酸酯類農藥多殘留的測定：NY/T 761—2008[S].北京：農業出版社，2008.

[4]趙蕾，張媛媛，李軼，等.同時測定蔬菜中15種有機磷農藥的殘留方法[J].食品研究與開發，2019，40（16）：113-118.

[5]梁漢昌.痕量物質分析氣相色譜法[M].北京：中國石化出版社，2000.