甘藍型油菜BnaLPAT4基因功能研究

劉 勇 肖旦望 秦 藝 陳 靜 陳婉瑜 熊興華,*

(1 湖南農業大學國家油料改良中心湖南分中心，湖南 長沙 410128；2 湖南農業大學農學院/湖南省水稻油菜抗病育種重點實驗室， 湖南 長沙 410128)

三酰甘油(triglycerides，TAG)是植物種子中油脂的主要儲藏形式，在生物體內均通過酶促機制合成[1-2]。溶血磷脂酸酰基轉移酶(lysophosphatidic acid acyltransferase，LPAT)是TAG生物合成的重要限速酶，在植物油脂合成、種子發育以及生物膜形成等方面有重大作用[3-5]。脂肪酸在植物種子中主要以TAG的形式存在，是構成植物油脂的主要成分，并參與植物多數代謝反應[6-8]。菜籽油中富含人體所需的多種長鏈多不飽和脂肪酸，營養價值可與橄欖油(Olea)媲美[9-10]。LPAT基因具有調控Kennedy途徑中的長鏈多不飽和脂肪酸裝配TAG的sn-2位上的功能[11-13]。尹永泰[14]通過同源克隆甘藍型油菜BnaLPATs基因并進行亞細胞定位發現，BnaLPAT1基因定位于葉綠體，屬于質體型LPAT，其他拷貝均定位于內質網，屬于微粒體型LPAT，并對LPAT基因功能進行了初步鑒定。肖旦望等[15]通過GUS基因染色法(B-Glucuronidase)確定了BnaLPAT4基因主要在油菜花器官和角果中表達，推測BnaLPAT4基因具有調控油菜油脂合成的功能。為驗證BnaLPAT4基因對甘藍型油菜油脂合成的影響，提高油菜種子油脂含量，本試驗通過參考洪波等[16]的方法構建BnaLPAT4表達載體轉化酵母和擬南芥，并通過氣相色譜法檢測轉基因株中的脂肪酸組分，分析BnaLPAT4基因在油菜油脂合成的作用，旨在為指導油菜育種提供一定的理論基礎。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

1.1.1 植物材料及菌株 野生型擬南芥(哥倫比亞型)和釀酒酵母菌株(INVSC 1)均由湖南農業大學油料作物研究所提供；……