外周血NLR Gal-9表達(dá)與子宮內(nèi)膜異位癥患者盆腔疼痛及粘連的相關(guān)性分析

朱 慧, 趙 純, 曹曦霞, 華 樺, 劉 娟, 徐 琳

(江蘇省南京市婦幼保健院生殖健康科, 江蘇 南京 210000)

子宮內(nèi)膜異位癥是子宮內(nèi)膜在子宮以外位置生長(zhǎng)導(dǎo)致出血、局部組織黏連、疼痛、月經(jīng)失調(diào)、不孕等癥狀的婦科疾病，嚴(yán)重影響患者身心健康和生活質(zhì)量。其發(fā)病機(jī)制尚不清楚，較多研究認(rèn)為與免疫因素、炎癥反應(yīng)有關(guān)，因此，炎癥指標(biāo)對(duì)于子宮內(nèi)膜異位癥診斷具有積極意義[1]。半乳糖凝集素9(Galectin-9，Gal-9)是一種廣泛表達(dá)于機(jī)體組織的蛋白，具有多種生物功能，參與細(xì)胞生長(zhǎng)分化、粘附、細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)及細(xì)胞凋亡，在炎癥、腫瘤、免疫等方面發(fā)揮重要作用，但其在子宮內(nèi)膜異位癥炎癥程度的作用尚不確切[2]。中性粒細(xì)胞與淋巴細(xì)胞比值(neutrophil to lymphocyte ratio，NLR)作為全身炎癥反應(yīng)的指標(biāo)，不易受白細(xì)胞計(jì)數(shù)影響，對(duì)炎癥評(píng)估具有較好準(zhǔn)確性，在多種慢性炎癥性疾病病情評(píng)估具有重要意義，但二者聯(lián)合檢測(cè)在子宮內(nèi)膜異位癥病情評(píng)估的報(bào)道較少[3]。基于此，研究以本院124例子宮內(nèi)膜異位癥患者為研究對(duì)象，檢測(cè)其外周血NLR、Gal-9表達(dá)水平，探討其水平變化與子宮內(nèi)膜異位癥患者盆腔疼痛及粘黏的關(guān)系，旨在為臨床子宮內(nèi)膜異位癥早期診斷及病情評(píng)估提供指導(dǎo)依據(jù)，進(jìn)而提高患者生活質(zhì)量。

1 資料與方法

1.1一般資料:選取本院2019年7月至2020年7月收治的124例子宮內(nèi)膜異位癥患者作為觀(guān)察組，其中Ⅰ～Ⅳ期患者各31例，年齡23～48歲，平均(35.42±4.36)歲；體質(zhì)量指數(shù)19～25kg/m2，平均(22.54±2.31)kg/m2；文化程度：初中及以下19例、高中和大專(zhuān)63例、本科以上42例；經(jīng)濟(jì)收入：4K以下21例、4K～8K59例、8K以上44例。并選取同期住院的60例非子宮內(nèi)膜異位癥患者作為對(duì)照組，年齡23～46歲，平均(34.56±4.28)歲；體質(zhì)量指數(shù)19～25kg/m2，平均(22.31±2.18)kg/m2；文化程度：初中及以下11例、高中和大專(zhuān)32例、本科以上17例；經(jīng)濟(jì)收入：4K以下16例、4K～8K 29例、8K以上15例。兩組年齡(t=1.262，P=0.209)、體質(zhì)量指數(shù)(t=0.645，P=0.250)、文化程度(χ2=0.662，P=0.718)、經(jīng)濟(jì)收入(χ2=3.295，P=0.193)等一般資料差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。納入標(biāo)準(zhǔn)：①同意進(jìn)行腹腔鏡開(kāi)腹手術(shù)，經(jīng)術(shù)后病理檢查確診為子宮內(nèi)膜異位癥，年齡23～48歲；②非妊娠相關(guān)疾病者；③月經(jīng)周期正常，無(wú)高血壓、糖尿病者；④患者及家屬知情且簽署知情同意書(shū)。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并心、肝、腎等重要器官?lài)?yán)重疾病者；②入組前3個(gè)月內(nèi)使用過(guò)激素類(lèi)藥物或進(jìn)行過(guò)放化療者；③合并惡性腫瘤疾病者；④拒絕或不配合研究者。研究獲醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2方法:手術(shù)時(shí)根據(jù)美國(guó)生育協(xié)會(huì)修正標(biāo)準(zhǔn)分期法[4](RAFS)對(duì)患者進(jìn)行臨床分期期別，明確患者子宮內(nèi)膜異位癥病情程度。術(shù)中詳細(xì)記錄子宮內(nèi)膜異位癥患者病灶大小及盆腔黏連的分布、范圍及程度，并對(duì)其進(jìn)行評(píng)分量化，分為1～5分Ⅰ期(微小)；6～15分Ⅱ期(輕度)；16～40分Ⅲ期(中度)；40以上Ⅳ期(重度)。然后取患者空腹靜脈血約3mL，以3000r/min，離心15min，取其上清液，采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫分析法檢測(cè)外周血Gal-9表達(dá)水平，試劑盒購(gòu)自上海藍(lán)基生物科技有限公司，相關(guān)操作嚴(yán)格按試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。使用Sysmex 500i全自動(dòng)血球分析儀進(jìn)行血常規(guī)檢測(cè)，獲取中性粒細(xì)胞(N)、淋巴細(xì)胞(L)計(jì)數(shù)結(jié)果并計(jì)算中性粒細(xì)胞與淋巴細(xì)胞比值(NRL)。

1.3觀(guān)察指標(biāo):①比較子宮內(nèi)膜異位癥患者和非子宮內(nèi)膜異位癥者外周血NLR、Gal-9表達(dá)水平。②記錄患者主訴疼痛情況，按照疼痛程度分級(jí)法[5](VRS)將患者分為輕度疼痛組42例、中度疼痛組49例和重度疼痛組33例。其中患者表示輕度疼痛，可忍受，不影響日常生活及睡眠為輕度疼痛；患者表示感覺(jué)到明顯疼痛，并影響日常生活和睡眠，需口服止痛藥物為中度疼痛；患者表示劇烈疼痛無(wú)法忍受，嚴(yán)重影響患者日常生活和睡眠，口服止痛藥物無(wú)效果需需注射止痛藥物為重度疼痛，比較不同盆腔疼痛程度患者外周血NLR、Gal-9表達(dá)水平。③術(shù)中觀(guān)察患者是否發(fā)生盆腔黏連，若術(shù)野與腹壁、大網(wǎng)膜或腸管之一有黏連則表示盆腔粘黏。然后根據(jù)Hobson評(píng)分法對(duì)黏連程度進(jìn)行分級(jí)，然后根據(jù)黏連程度分級(jí)將患者分為無(wú)粘黏組23例、輕度粘黏57例和重度粘黏44例。其中盆腔無(wú)黏連則為Ⅰ級(jí)；盆腔出現(xiàn)1～2處局限小黏連則為Ⅱ級(jí)；盆腔出現(xiàn)彌漫性黏連，范圍較小則為Ⅲ級(jí)；盆腔出現(xiàn)彌漫、廣泛性黏連，且比較容易分離則為Ⅳ級(jí)；腹腔出現(xiàn)彌漫、廣泛、致密黏連，分離難度大則為Ⅴ級(jí)，Ⅰ級(jí)為無(wú)黏連組；Ⅱ～Ⅲ級(jí)為輕度黏連組；Ⅳ～Ⅴ級(jí)為重度粘黏組，比較不同盆腔粘黏程度患者外周血NLR、Gal-9表達(dá)水平。④采用Logistic回歸分析外周血NLR、Gal-9表達(dá)與子宮內(nèi)膜異位癥患者病情程度的關(guān)系。

2 結(jié) 果

2.1兩組外周血NLR、Gal-9表達(dá)水平比較:觀(guān)察組患者外周血NLR(2.67±0.64)、Gal-9(687.34±126.51)ng/L水平顯著高于對(duì)照組的(2.13±0.38)、(329.56±94.23)ng/L，差異達(dá)到統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見(jiàn)表1。

表1 兩組外周血NLR Gal-9表達(dá)水平比較

2.2不同盆腔疼痛程度患者外周血NLR、Gal-9表達(dá)水平比較:盆腔重度疼痛組患者外周血NLR、Gal-9表達(dá)水平顯著高于盆腔中度疼痛組和輕度疼痛組，且組間兩兩比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見(jiàn)表2。

表2 不同盆腔疼痛程度患者外周血NLR Gal-9表達(dá)水平比較

2.3不同盆腔粘黏程度患者外周血NLR、Gal-9表達(dá)水平比較:盆腔重度粘黏組患者外周血NLR、Gal-9表達(dá)水平顯著高于盆腔輕度粘黏組以及無(wú)粘連組，且組間比較差異達(dá)到統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見(jiàn)表3。

表3 不同盆腔粘黏程度患者外周血NLR Gal-9表達(dá)水平比較

2.4外周血NLR、Gal-9表達(dá)與子宮內(nèi)膜異位癥病情程度的相關(guān)性:將外周血NLR、Gal-9表達(dá)納入Logistic回歸方程，結(jié)果顯示，外周血NLR、Gal-9表達(dá)與子宮內(nèi)膜異位癥病情程度呈正相關(guān)關(guān)系(P<0.05)，見(jiàn)表4。

表4 外周血NLR Gal-9表達(dá)與子宮內(nèi)膜異位癥病情的Logistic回歸分析

3 討 論

隨著子宮內(nèi)膜異位癥發(fā)病率的逐漸升高，且逐漸年輕化，對(duì)女性生活質(zhì)量及健康安全造成嚴(yán)重威脅，且因病變易侵襲、易復(fù)發(fā)成為臨床婦科治療難題[6]。雖然腹腔鏡是子宮內(nèi)膜異位癥診斷的主要方式，但因侵入性且易引發(fā)并發(fā)癥而導(dǎo)致臨床應(yīng)用受限。以往研究認(rèn)為，炎癥介質(zhì)介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)導(dǎo)致盆腔組織粘黏、纖維化，進(jìn)而發(fā)展為子宮內(nèi)膜異位癥[7]。研究通過(guò)檢測(cè)外周血NLR、Gal-9水平發(fā)現(xiàn)其水平與子宮內(nèi)膜異位癥盆腔疼痛及粘黏具有重要聯(lián)系，為臨床子宮內(nèi)膜異位癥診斷及評(píng)估提供參考依據(jù)。

本次研究結(jié)果顯示，子宮內(nèi)膜異位癥患者外周血NLR、Gal-9水平顯著高于非子宮內(nèi)膜異位癥者，說(shuō)明外周血NLR、Gal-9升高與子宮內(nèi)膜異位癥發(fā)生密切相關(guān)。究其原因，子宮內(nèi)膜異位癥多發(fā)于盆腔，卵巢內(nèi)的異位病灶可誘使盆腔內(nèi)巨噬細(xì)胞聚集，進(jìn)而引起盆腔局部組織粘連，進(jìn)一步造成輸卵管功能障礙，導(dǎo)致不孕。因此，盆腔炎癥免疫反應(yīng)在子宮內(nèi)膜異位癥發(fā)生、發(fā)展中發(fā)揮重要作用[8]。子宮內(nèi)膜異位癥患者子宮內(nèi)膜種植于子宮外部位，機(jī)體炎癥反應(yīng)發(fā)生時(shí)，炎性因子附著于損傷處，導(dǎo)致內(nèi)皮細(xì)胞損傷，促炎細(xì)胞通過(guò)介導(dǎo)炎癥、免疫反應(yīng)，促進(jìn)膠原沉積，導(dǎo)致盆腔組織粘黏、纖維化，進(jìn)而導(dǎo)致異位病灶的發(fā)生、發(fā)展[9]。NLR外周血中性粒細(xì)胞和淋巴細(xì)胞比較，其數(shù)值是一種反映中性粒細(xì)、淋巴細(xì)胞數(shù)值的炎癥指標(biāo)，且易獲取，當(dāng)機(jī)體應(yīng)激時(shí)，中性粒細(xì)胞升高，淋巴細(xì)胞降低，進(jìn)而導(dǎo)致其比值NLR升高，NLR可較快捷、穩(wěn)定反映炎癥情況。外周血淋巴細(xì)胞減少，中性粒細(xì)胞分泌血管生成因子，進(jìn)而促進(jìn)子宮內(nèi)膜異位癥的發(fā)生發(fā)展[10]。血清Gal-9是一種結(jié)合蛋白，具有多種生物學(xué)功能，可通過(guò)抑制T細(xì)胞、CD3等細(xì)胞凋亡，參與免疫調(diào)節(jié)作用。免疫抑制導(dǎo)致盆腔內(nèi)逆流的子宮內(nèi)膜無(wú)法有效清除，進(jìn)而導(dǎo)致子宮內(nèi)膜腔外種植，最終導(dǎo)致異位癥。這與Gal-9在子宮頸病變程度中具有重要評(píng)估價(jià)值，其在高度鱗狀上皮內(nèi)病變中呈較高表達(dá)的報(bào)道具有相似性[11]。其水平升高可被嗜酸性粒細(xì)胞選擇性粘附，而發(fā)揮細(xì)胞識(shí)別、黏附細(xì)胞外基質(zhì)調(diào)節(jié)作用，促進(jìn)自然殺傷細(xì)胞抑制γ-干擾素產(chǎn)生，導(dǎo)致子宮內(nèi)膜容受性降低，參與子宮內(nèi)膜異位癥的發(fā)生發(fā)展過(guò)程[12]。并且，血清檢測(cè)更為方便、快捷，可為子宮內(nèi)膜異位癥診斷提供指標(biāo)參考。

另外，盆腔重度疼痛組患者外周血NLR、Gal-9表達(dá)水平顯著高于盆腔中度疼痛組和輕度疼痛組，盆腔重度粘黏組患者外周血NLR、Gal-9表達(dá)水平顯著高于盆腔輕度粘黏組以及無(wú)粘連組，并且Logistic回歸分析結(jié)果顯示，外周血NLR、Gal-9表達(dá)與子宮內(nèi)膜異位癥病情程度呈正相關(guān)關(guān)系，說(shuō)明外周血NLR、Gal-9表達(dá)水平與子宮內(nèi)膜異位癥患者疼痛程度及粘黏程度呈正相關(guān)關(guān)系，子宮內(nèi)膜異位癥患者疼痛及粘黏程度越高，血清NLR、Gal-9水平越高，提示其水平可作為子宮內(nèi)膜異位癥病情評(píng)估的指標(biāo)之一。究其原因，中性粒細(xì)胞是激活的炎癥因子，淋巴細(xì)胞是免疫調(diào)節(jié)因子，NLR升高，炎癥反應(yīng)升高，機(jī)體炎癥反應(yīng)激活，進(jìn)而促進(jìn)炎癥細(xì)胞分泌，加劇炎癥反應(yīng)，加劇盆腔粘黏和纖維化，進(jìn)而加劇病情[13]。Ga1-9可通過(guò)鈣蛋白酶、Caspasel等信號(hào)通路誘導(dǎo)T細(xì)胞、巨噬細(xì)胞等多種免疫細(xì)胞凋亡，參與機(jī)體炎癥免疫反應(yīng)。Gal-9水平升高可導(dǎo)致盆腔內(nèi)免疫功能失衡，進(jìn)而導(dǎo)致免疫細(xì)胞在病變部位聚集，進(jìn)而促進(jìn)組織再生和修復(fù)，進(jìn)而促進(jìn)病情發(fā)展[14]。并且，異位病灶的生長(zhǎng)可間接導(dǎo)致Gal-9水平升高，進(jìn)而加重病情[15]。因此，Gal-9水平隨子宮內(nèi)膜異位癥病情發(fā)展而升高，Gal-9升高又會(huì)加劇病情發(fā)展，其水平與患者病情呈正相關(guān)關(guān)系。但由于本次研究樣本較少，且機(jī)體炎癥、免疫反應(yīng)過(guò)程是一個(gè)復(fù)雜的過(guò)程，外周血NLR、Gal-9作為子宮內(nèi)膜異位癥病情評(píng)估還需進(jìn)一步深入研究。

綜上所述，外周血NLR、Gal-9在子宮內(nèi)膜異位癥患者中呈較高表達(dá)，其水平表達(dá)患者盆腔疼痛程度及粘黏程度呈正相關(guān)關(guān)系，可作為子宮內(nèi)膜異位癥患者盆腔粘連以及疼痛的輔助評(píng)估標(biāo)志物，具有一定臨床參考價(jià)值。