譚 蕓,肖 蕊,嚴 欣,陳麗婷,肖 俊,羅永巨,郭忠寶
(廣西水產科學研究院 國家級廣西南寧羅非魚良種場,廣西 南寧 530021)
投飼率是水產養殖環節的關鍵因素,能顯著影響魚類生長性能及飼料利用率,適宜投飼率能夠提高魚類存活率、飼料利用率,降低養殖成本[1]。大量研究表明,適宜的投飼率能在提高魚類生長性能的同時,節約飼料成本[2],因此尋求最佳投飼率是水產高效養殖的重要途徑。吉富品系尼羅羅非魚具有生長速度快、出肉率高、遺傳性狀穩定等優點,是中國的一個重要水產養殖品種[3]。魚類的血液成分與機體的代謝、營養狀況、疾病及環境等密切相關,因此其血液學指標被廣泛應用于評價魚類的健康狀況及營養狀況,當魚類處于不同的生長狀態時,血液的理化指標可能也會發生相應變化。本文通過研究吉富羅非魚在4種不同投飼率下血液生理生化指標及其生長性能的變化情況,經相關性分析,旨在找出能夠反映吉富羅非魚生長性能的血液生理生化指標。目前,大量研究主要集中于酶[4-7]、生長因子[8]、RNA/DNA比[9-12]等與生長性能之間的關系。但在限食條件下,魚類血液生理生化指標變化情況與生長性能關系的研究卻鮮有報道。傳統上對水產動物生長性能的評價主要是以增重率、體長增長率、特定生長率等指標為依據,而這些指標都主要針對水產動物的外部形態,不能對其健康狀況和營養狀況進行全面評價。因此,找到可以全面反映動物健康及營養狀況的指標顯得至關重要。本文以吉富羅非魚為研究對象,對不同投飼率下其血液生理生化指標的變化進行了初步研究,旨在通過不同投飼率下吉富羅非魚血液生理生化指標的變化情況,來篩選出能反映魚類生長性能的生理生化指標,為羅非的魚產業化養殖提供基礎技術服務。
1.1.1 試驗器皿 養殖試驗在廣西水產科學研究院水生生物恒溫實驗室進行,試驗所用的可控溫水族箱為玻璃材質,規格為65 cm×55 cm×65 cm,分上、中、下三層結構,便于試驗設計及觀察。水族箱配備有循環過濾水處理及紫外殺菌裝置,水溫由配有智能電路板的加熱、制冷系統控制。
1.1.2 試驗動物 試驗用的健康無病的吉富羅非魚400尾,取自廣西南寧國家級羅非魚良種場,平均體重為(39.0±0.5)g,暫養于實驗室內的白色PVC桶中,使其適應環境,7 d后受試魚生長正常,開始試驗。
馴化結束后,選取240尾健康個體,隨機分為4組,每組3個平行,每個平行(每箱)放養試驗魚20尾,每天投喂2次(09:00和16:00),投餌量分別為魚體重的1.5%、2.0%、2.5%、3.0%,并于投餌后1小時清理殘餌及糞便。殘餌吸出并曬干、稱重。期間連續增氧充氣。試驗期內每隔15 d測量1次各組魚的體重,相應調整其投飼量。觀察并記錄每天的攝食情況。試驗期間保證養殖水體水質穩定,養殖水溫為(33±0.2 ℃),pH值為(7.6±0.5),溶解氧為(6.3±0.5)mg/L,氨氮含量小于0.1 mg/L,試驗周期為45 d。期間投喂的飼料為廣西南寧百洋飼料集團有限公司出品的羅非魚膨化配合飼料,飼料的營養成分見表1。

表1 試驗用飼料的營養成分
養殖試驗結束后,停食24 h,分組計算增重率和特定生長率,測定血液生理生化指標。分別從每組中隨機抽取5尾試驗魚采血,不作麻醉處理,以1 mL注射器進行尾靜脈采血。血液樣本一部分加入肝素(100 U/n)抗凝,制取全血,用于血液生理指標的測定;另一部分經4 ℃下3000 r/min離心15 min制取血清,用于血液生化指標的測定。
測定的生理生化指標有:紅細胞數(RBC)、血紅蛋白(Hg)、血清總蛋白(STP)、甘油三酯(TG)、血清膽固醇(CHOL)、血糖(GLU)、堿性磷酸酶(ALP)、磷離子。測定儀器為廣西中醫學院附屬瑞康醫院自動生化測定儀。
試驗魚的增重率(weight gain ratio, WGR)和特定生長率(Specific Growth Rate, SGR)按如下公式計算:

式中:W0為試驗開始時魚體濕重(g),W1為試驗結束時魚體濕重(g),t為試驗時間(d)。
用SPSS 21.0統計軟件對數據進行統計分析處理。采用單因子方差分析(ANOVA)和Duncan’s多重比較進行差異性檢驗,并進行血液生理生化指標與增重率的相關性分析,分析結果以平均值±標準誤(mean±SD)表示,P<0.05表示差異顯著。
由表2可知,隨著投飼率的增加,吉富羅非魚的體重呈現上升的趨勢。統計分析結果表明,上述投飼率對所有試驗魚的終末體重、特定生長率、相對增重率和飼料效率都有顯著影響(P<0.05),且3.0%投飼率組的試驗魚,其終末體重、特定生長率、相對增重率和飼料效率顯著高于其他3個投飼率組。

表2 不同投飼率對羅非魚特定生長性能和飼料利用的影響
由表3可知,除1.5%投飼率組的RBC之外,其余所有投喂率組的生理生化指標在投喂后都顯著高于投喂前(P<0.05)。投喂前,試驗魚的RBC數為(1.27±0.21)×109個/L,以不同的投飼率投喂后RBC呈上升趨勢,且各投飼率組間試驗魚RBC差異顯著(P<0.05)。未投喂時試驗魚Hg含量為(41.67±0.89)g/L,以不同的投飼率投喂后Hg含量呈上升趨勢,且3.0%投喂組顯著高于其他投喂組(P<0.05)。
由表3可知,投喂前,試驗魚的STP含量為(12.00 ±1.15)g/L,投喂后,不同投飼組間STP含量差異不顯著;投喂前,試驗魚的CHOL含量為(2.890± 0.044)mmol/L,投喂后,2.0%投飼率組顯著高于1.5%和2.5%投飼率組(P<0.05),3.0%投飼率組顯著高于其他3組(P<0.05);投喂前,試驗魚的TG含量為(0.270±0.038)mmol/L,投喂后,3.0%投飼率組顯著高于其他3組(P<0.05);投喂前,試驗魚GLU含量為(2.590±0.038)mmol/L,投喂后,2.5%投飼率組顯著高于其他3組(P<0.05),2.0%投飼率組顯著低于其他3組(P<0.05);投喂前,試驗魚堿性磷酸酶(ALP)含量為(2.33±0.33)U/L,投喂后,不同投飼組間ALP含量差異不顯著。

表3 不同投飼率對吉富羅非魚血液生理生化指標的影響
對血液生理生化指標的變化趨勢與增重率的變化趨勢進行相關性分析,并得出相關系數,結果見表4。結果顯示:紅細胞數和血紅蛋白與增重率的相關系數分別為0.723、0.902,相關性極顯著(P<0.01);血清總蛋白、膽固醇和甘油三酯與增重率的相關系數分別為0.635、0.605和0.680,相關性顯著(P<0.05);血糖和血清堿性磷酸酶與增重率都無顯著相關性。

表4 血液生理生化指標與增重率的相關性分析
魚類的生長率會隨食物水平的增加而升高,隨個體體重的增加而降低[13]。本試驗中,3.0%投飼率組試驗魚的增重率和特定生長率顯著高于其他3個組(P<0.05),這表明不同投飼率水平對吉富羅非魚的生長有顯著的影響。且隨著投飼率從1.5%增至3.0%,吉富羅非魚的終末體重顯著升高,特定生長率和相對增重率升高,這一結果顯示在一定的投飼率范圍內,提高投飼率,可以提高吉富羅非魚營養物質的攝入量,促進其生長。本試驗的結果與羅琳等[13]對鯽魚的研究,以及王巖[14]對羅非魚的研究結果一致。而在丁浪[15]、徐革鋒[16]、劉偉[17]、李云蘭[18]等的研究中,特定生長率和增重率隨著投飼率的增加而呈先上升后稍微下降或趨于平穩的趨勢。本試驗與上述研究出現不一致的原因可能是魚類大小(成魚和稚魚)、養殖水溫和養殖用水(流水)等試驗條件、設定的投飼率水平不同等造成。本試驗研究的投飼率水平較少,僅限于1.5%、2.0%、2.5%和3.0%投飼率水平,更多投飼率水平對吉富羅非魚生長的影響需做進一步的研究。
食物受限是一種常見情況,在養殖過程中魚類因受到不同食物水平的限制,其血液里的生理生化指標可能會受到一定的影響。在本研究中,當以不同的投飼率進行投喂時,部分投喂組受試魚的某些血液生理生化指標出現了顯著的變化。紅細胞數和血紅蛋白含量顯著上升。紅細胞及其血紅蛋白在血液中的重要生理作用是運輸氧。紅細胞、血紅蛋白顯著增加可能是因為吉富羅非魚的生命活動旺盛,魚體各組織耗氧量增加,對運輸氧的需求增加,從而紅細胞和血紅蛋白增多以適應運輸氧的需求。血清總蛋白含量升高可能是因為魚體得到營養補充后,代謝加快,蛋白質合成旺盛,故分泌到血液中的蛋白質增多。魚類血糖的來源主要有3條途徑,即:食物中糖的消化吸收;肝糖原的分解;蛋白質、脂肪等的糖異生作用。恒定的血糖濃度對維持魚類正常生命活動有重要的作用。試驗表明,吉富羅非魚的血糖濃度對不同的投飼率比較敏感,當投飼率增大時,吉富羅非魚的血糖濃度有所升高。這說明在攝食的狀況下,血糖濃度的維持主要是依靠食物中的碳水化合物消化吸收,即食物中糖的消化吸收是吉富羅非魚血糖的主要來源。這與錢云霞等[19]在鱸魚和喬志剛等[20]在鲇魚研究的結果一致。血清總蛋白增加是由于當機體代謝旺盛時,蛋白質合成加速,故其含量會升高。甘油三酯含量明顯上升,甘油三酯的增加可以為新的細胞膜和細胞器提供脂類。這表明當機體能量增加時,魚體內細胞分裂會隨之加速,使吉富羅非魚的生長加速。這些內在的變化引起的生長加速,可能是對外在投飼率提高的一種適應。
相關性分析顯示,紅細胞數與血紅蛋白與增重率顯著相關。這是由于血紅蛋白在血液中的主要作用是與紅細胞結合運輸氧。在食物受限的情況下,魚類不能得到充足的食物供應,血液輸氧能力下降,體內氧供應不足,從而降低個體的能量代謝水平以最大限度地維持個體的生存,外在表現為其生長緩慢。而當食物充足時,代謝旺盛,各組織耗氧量和對運輸氧的需求增加,紅細胞數和血紅蛋白便會顯著增加以滿足機體對氧的需求。血清總蛋白是機體代謝合成的蛋白質產物,故與其生長性能顯著相關;血糖與能量代謝息息相關,進而也與其生長性能相關。甘油三酯與增重率顯著相關。試驗中,投喂組中魚體內甘油三酯含量都顯著高于投餌前,且隨著投喂率的提高,甘油三酯的含量不斷上升。這表明試驗前的魚體處于饑餓狀態,使得對外源性甘油三酯的攝取下降,因而導致血漿中甘油三酯顯著低于投餌后。隨著投喂率的提高,魚體得到的營養供給越來越充足,代謝旺盛,細胞分裂加快,對外源性甘油三酯的攝取量上升,因此血漿中甘油三酯顯著升高。
本試驗結果顯示紅細胞數和血紅蛋白與增重率極顯著相關(P<0.01);血清總蛋白、膽固醇和甘油三酯與增重率顯著相關(P<0.05)。因此,建議將紅細胞數、血紅蛋白、血清總蛋白、膽固醇和甘油三酯作為反映吉富羅非魚生長性能的重要的新指標。