子宮內膜異位癥不孕患者體外受精-胚胎移植后受精、妊娠與卵泡輸出率的關系研究

董虹 張洪福

（1.天津美津宜和婦兒醫院生殖中心，天津 300000；2.天津市河西醫院婦科，天津 300000）

子宮內膜異位癥可造成盆腔內炎性因子增高，影響微環境，存在排卵障礙，與不孕癥密切相關[1]。體外受精-胚胎移植（In vitro fertilization embryo transfer，IVF-ET）是不孕癥輔助生殖的一種技術，通過從人體中將卵子和精子取出，在體外進行受精，培育成胚胎后選擇合適的時機移植至子宮腔內，進一步成長發育。而各類患者情況具有差異，卵巢反應性均無統一性，因此準確評估卵巢反應性和IVFET結局對制定合理的超促排卵計劃及獲取優質胚胎獲取有重要意義。近年來，有研究提出卵泡輸出率（Follicle output rate，FORT）的概念，認為FORT在評估卵巢反應性方面優于其他指標[2]。基于此，本文旨在研究子宮內膜異位癥不孕患者IVF-ET后受精、妊娠與FORT的關系。

1 一般資料與方法

1.1 一般資料

選取2019年3月至2022年1月本院收治的306例接受IVF-ET治療的子宮內膜異位癥不孕患者作為研究對象，依據FORT界值是否小于等于65分為對照組（n=96）和觀察組（n=210）[3]。其中對照組年齡22～40歲，平均年齡33.64±2.63歲，不孕年限3～11年，平均不孕年限7.83±1.55年；觀察組年齡23～40歲，平均年齡34.09±2.69歲，不孕年限3～12年，平均不孕年限8.5±1.61年。兩組患者一般資料差異無統計學意義（P＞0.05），具有可比性。本研究經醫院倫理委員會批準。納入標準：首次進行IVF-ET治療，近3月未使用其他雌激素類藥物進行治療；臨床確診為子宮內膜異位癥不孕患者；臨床資料完整；排除標準：心肌病、冠心病、高血壓等或其它器官并發癥；存在精神障礙和心理疾病；患者配偶取精異常者等。

1.2 方法

兩組患者均于黃體中期開始口服避孕藥毓婷（規格：0.1 mg，輝凌制藥，國藥準字：HJ20160237）15天，第16天停服避孕藥，并開始肌肉注射外源性促性腺激素釋放激素激動劑（規格：75 IU（5.5 μ g），意大利MERCK，注冊證號：S20181008）0.1 mg·d-1，在月經周期第3～5天完成達標，其達標標準為血黃體生成素≤5 IU·L-1、雌二醇（Estradiol，E2）≤50 pg·mL-1；完成達標后肌肉注射基因重組卵泡刺激素（規格：250 μg:0.5 mL，意大利MERCK，注冊證號：S20130091）225 IU，使用陰道B超檢測子宮內膜厚度、卵泡數量、大小。若3個主導卵泡直徑 ＞17 mm，則在當晚皮下注射人絨毛膜促性腺激素（Human chorionic gonadotropin，HCG）（規格：1 mL:20 mg，浙江仙琚制藥，國藥準字：H33020228）10000 IU，35～36 h后進行取卵操作，并在取卵后肌肉注射孕激素（規格：1 mL:5 mg，湖北葛店人福藥業有限責任公司，國藥準字：H20066109）10 mg·d-1。通過手淫方式獲取患者配偶精液，以密度梯度離心法調整精子濃度，待取卵4～6小時后，將經處理患者配偶的精子與卵子（精子：卵子=2×104：1）混合并放置5% 二氧化碳、37℃孵箱內進行共培養。于取卵16～20 h開始在顯微鏡下觀察精卵受精情況，統計并分析優質胚胎率。將受精卵移至P1培養液（Irvine，美國）培養54～56 h，體外受精的第3天取1～2枚8細胞胚胎移植回患者子宮。分別于患者月經第2天、HCG注射日抽取靜脈血3 mL，3500 rpm離心10 min，采取上清液，應用熒光免疫法檢測促卵泡激素（Follicle-stimulating Hormone，FSH）、E2水平變化。于胚胎移植13 d開始再一次HCG測定，28 d后進行超聲檢查，確認患者妊娠現象。

1.3 觀察指標

1.3.1 IVF-ET結局

取卵完成后，需進行卵母細胞孵育，在4～6 h進行IVF受精，依據IVF-ET法觀察患者的IVF-ET結局，主要包括注射日E2水平、獲卵數、人促性腺激素（Gonadotropin，Gn）用量、移植胚胎數。

1.3.2 受精、妊娠情況

取卵16～20 h查看受精狀態，統計優質胚胎數，即2個原核來源、碎片＜20%、最少于第三天時有7個細胞以上。優質胚胎率=優質胚胎數/正常受精卵子數×100%。于胚胎移植28 d進行陰道超聲檢查觀察妊娠情況，見妊娠囊、胎心搏動判定為臨床妊娠。受精率=受精數（正常受精+異常受精+延長受精），卵裂率=移植當天有卵裂的胚胎數/正常受精卵子數，種植率：孕囊數目/移植的胚胎數目×100%，臨床妊娠率=懷孕數/移植周期數。

1.3.3 受精、妊娠與FORT的相關性

采用Pearson相關分析IVF-ET后受精、妊娠與FORT的相關性。Pearson相關系數取值范圍在-1～1，負數代表負相關，正數代表正相關，0則代表不存在相關關系。相關系數越接近0，相關關系越弱；越接近-1或1，相關關系越強。

1.4 統計學方法

本研究數據均采用SPSS18.0軟件進行統計學分析，計量資料以均數±標準差（）表示，兩兩間采用t檢驗；計數資料以例數n（%）表示，采用χ2檢驗；IVF-ET后受精、妊娠與FORT的相關性采用Pearson相關分析。P＜0.05表示差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 IVF-ET結局

兩組Gn用量、移植胚胎數無明顯差異（P＞0.05），觀察組注射E2水平、獲卵數明顯高于對照組（P＜0.05）。見表1。

表1 兩組注射日E2水平、獲卵數、Gn用量、移植胚胎數比較（)

表1 兩組注射日E2水平、獲卵數、Gn用量、移植胚胎數比較（)

注：與對照組比較，aP＜0.05。

2.2 受精、妊娠情況

兩組卵裂率、種植率無明顯差異（P＞0.05），觀察組受精率、優質胚胎率、移植周期臨床妊娠率均明顯高于對照組（P＜0.05）。見表2。

表2 兩組受精、妊娠情況比較

2.3 IVF-ET后受精、妊娠與FORT的相關性

據Pearson相關分析得知，FORT與Gn用量無顯著相關性（r=0.267，P＞0.05），而注射E2水平、獲卵數、受精率、移植周期臨床妊娠率與FORT呈正相關（r=0.889、0.246、0.631、0.371，P＜0.05）。

3 討論

近年來有研究認為即使女性年齡增長，其竇卵泡對外源性FSH反應性也未發生改變，如高齡女性卵巢成低分應，是原有卵泡個數減少所造成，而非是卵巢反應性低的原因，FORT對IVF-ET可能有一定預測價值[6]。另外還有研究指出FORT越高，其胚胎移植率和臨床妊娠率也隨之升高[7]。

本次研究依據FORT界值進行分組，FORT≤65為對照組，FORT＞65為觀察組，發現觀察組注射E2水平、獲卵數、受精率、優質胚胎率、移植周期臨床妊娠率高于對照組，與以往研究一致，FORT可直接評估卵巢對外源性Gn的反應性，通過對接受控制性超排卵的女性進行降調節，根據E2水平和卵泡生長情況進行檢測，無需依靠原有的卵泡個數[5]。說明FORT確實可有效預測卵泡反應性或卵巢功能，FORT水平越高，其IVF-ET結局越優越，推測原因可能是FORT不受年齡、基礎E2和FSH水平等外界因素干擾。另一方面，既往臨床常依據血清基礎卵泡刺激素（Serum basal follicle stimulating hormone，bFSH）、基礎竇卵泡數（Number of basal sinus follicles，AFC）、抗苗勒管激素（Anti-Mullerian hormone，AMH）、年齡等指標來預測患者卵巢反映情況，但上述指標在預測過程中對外源性Gn反應具有局限性；如AFC測量環境受檢查者水平和B超儀器分辨率影響較大，會出現嚴重的測量誤差[4]。

本次研究據Pearson相關分析得知，FORT與Gn用量無相關性，與以往研究結果有一定出入[8]，可能是標本量選取較少，且本次分組粗略參考文獻進行分組，未根據患者情況；而本次研究也發現注射E2水平、獲卵數、受精率、移植周期臨床妊娠率與FORT有一定關系，說明FORT較以往指標其敏感性更佳，可避免進入周期治療前卵巢的竇卵泡數的影響。

綜上，FORT值對預測卵巢反應性和IVF-ET具有重要價值，水平越高則提示子宮內膜異位癥不孕患者IVF-ET結局相對越好。