張瑞華 焦玉霞
(1濰坊職業學院,山東濰坊261041;2萊蕪陳毅中學,山東濟南271100)
枝條菌種以接種速度快、方便、接種后上中下多點萌發,料袋內菌絲長滿袋時間較傳統的栽培種提早5~10 d 而備受青睞[1]。猴頭菇是典型木腐菌[2],采用較短袋裝料時,多用枝條菌種接種料袋,而常規固體菌種培養枝條菌種需55~60 d。筆者介紹用猴頭菇液體菌種接種枝條培養基培養猴頭菇枝條菌種技術,為猴頭菇枝條菌種的生產提供技術指導。
液體菌種培養基配方:土豆200 g,紅糖20 g,玉米粉5 g,麩皮10 g,加水1 000 mL。
按照配方稱取各原料。土豆去皮挖芽眼,切丁放入鍋內,麩皮用紗布包裹好放入鍋內,倒入1 200 mL 水,煮開后計時20 min 后,8 層紗布過濾,取濾液1 000 mL,若不足,用水補足;將濾液倒入鍋內繼續加熱,將提前用少量涼水拌好的玉米粉倒入鍋內,繼續加熱7~8 min,倒入紅糖,徹底融化后,將濾液裝入錐形瓶,每瓶裝液量不超過其容積的三分之二,并在錐形瓶中放入磁力攪拌子。培養基于121.1 ℃高壓滅菌30 min,冷卻至30 ℃以下接試管種,每瓶接入6~7 塊綠豆粒大小的基內菌絲。接種完后置于1 000 r/min 的磁力攪拌器上碎菌種約24 h(目的是形成多個萌發點,有利于培養的菌球均勻一致);后再放入恒溫振蕩培養箱,溫度22 ℃,轉速150 r/min,培養約7 d,菌球密度適中時備用。
振蕩培養液體菌種期間,若出現絮狀菌球,可以再次放到1 000 r/min 磁力攪拌器上,碎菌種約24 h。
培養猴頭菇枝條菌種一般選擇闊葉樹枝條,以楊木枝條較佳,規格為長12~15 cm,寬0.4~0.7 cm,厚0.4~0.7 cm。
枝條需要提前浸泡(圖1),浸泡時間24~36 h,氣溫20 ℃以上時,浸泡時間要縮短,可24~28 h(為防止pH 下降太快,浸泡時可加入0.5%~1%的生石灰),氣溫15 ℃以下時要延長浸泡時間,30~36 h 不等。浸泡合格的標準是掰開枝條沒有白心,浸泡完畢后瀝干水分備用(圖2)。

圖1 枝條整袋浸泡

圖2 枝條瀝水
瀝干水分的枝條表面裹上麩皮(圖3),以提高接種后菌種萌發速度。

圖3 裹麩皮
猴頭菇枝條菌種培養基由枝條和輔料配制而成,輔料營養較枝條豐富,可以加快發菌速度。配制輔料的配方較多,如棉籽殼80%,麩皮14%,玉米粉3%,豆粕2%,石膏1%,料含水量62%~65%,pH6~7。
選擇15 cm×(33~35)cm×0.005 cm 聚丙烯塑料袋,先裝入1~3 cm 厚的輔料,目的是防止枝條刺破袋底;再沿袋壁整齊裝入枝條(滅菌時不會刺破袋,方便取枝條菌種),一般每袋裝枝條40~60 根;而后再裝入輔料,輔料蓋住枝條,厚1~2 cm(圖4)。

圖4 裝好的枝條包
培養猴頭菇枝條菌種要采用窩口的方式封口,如若用套環蓋封口,容易形成老菌皮,菌絲不再吃料(圖5)。而采用接種棒窩口的方式封口(圖6),接種后塞入海綿,可有效避免出現發菌不滿的情況。

圖5 套環蓋發菌狀態(效果不好)

圖6 窩口后插入接種棒
料袋倒放在滅菌筐中(倒放可有效防止滅菌過程中蒸汽大量在料袋中存留,避免導致培養基水分含量過高,接種后料袋缺氧,菌絲生長不利),123~128 ℃高壓滅菌60~90 min。
在超凈工作臺、接種箱或接種室接種。將料袋、液體菌種及接種工具放入超凈工作臺、接種箱或接種室中。若用超凈工作臺接種,噴灑75%酒精,提前30 min 打開風機和紫外燈凈化空氣和殺菌;若用接種室接種,提前30 min 打開高效過濾器和紫外燈,使操作空間的空氣潔凈程度達到百級水平;若用接種箱接種,提前用3%~5%來蘇爾噴灑箱內空間,再用二氯異氰尿酸鈉煙熏劑熏蒸[3],煙熏劑劑量為5 g/m3。
接種所用的工具都應消毒,接種時一人拔接種棒,一人將液體菌種倒入,每袋接種量約15 mL,隨后塞上滅菌海綿(不要用棉花,棉花營養較豐富,后期會在棉花處形成原基)。
接種后料包放于溫度22~24 ℃,空氣相對濕度60%~70%培養室,無光照培養,約17~20 d菌絲可長滿料包(圖7)。

圖7 培養好猴頭菇枝條菌種
枝條菌種接種栽培袋(裝料高20 cm,料濕重1 300 g 左右,料含水量63%~65%)后,15~16 d 從外部可以看到菌絲,25~27 d 菌絲長滿栽培袋(圖8)。

圖8 接種22 d后發菌狀態