基于微衛(wèi)星分析的長(zhǎng)豐鰱種質(zhì)資源遺傳監(jiān)測(cè)

羅相忠 覃維敏 梁宏偉 沙 航 鄒桂偉

(中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院長(zhǎng)江水產(chǎn)研究所, 武漢 430223)

鰱(Hypophthalmichthys molitrix)是我國(guó)重要的特有經(jīng)濟(jì)魚(yú)類, 具食物鏈短、易飼養(yǎng)、成本低、調(diào)節(jié)水質(zhì)等特性和功效。其以水體中浮游植物為主要餌料, 屬濾食性魚(yú)類, 為典型的碳匯漁業(yè)養(yǎng)殖對(duì)象[1]。鰱的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值較高, 必需氨基酸含量均略高于鯉(Cyprinus carpio); 二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA)的含量高于鳙(Aristichthys nobilis); 一直深受廣大養(yǎng)殖戶和消費(fèi)者所青睞。鰱在大部分池塘、湖泊和水庫(kù)中均有養(yǎng)殖或增殖, 是淡水養(yǎng)殖的當(dāng)家品種之一。我國(guó)鰱養(yǎng)殖產(chǎn)量?jī)H次于草魚(yú)(Ctenopharyngodon idellus), 位居淡水養(yǎng)殖種類的第二位[2]。長(zhǎng)豐鰱(Changfeng silver carp)(CF)是中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院長(zhǎng)江水產(chǎn)研究所選育而成的鰱新品種(證書(shū): GS-01-001-2010), 也是我國(guó)“四大家魚(yú)”的第一個(gè)人工培育新品種, 具有生長(zhǎng)快、遺傳純合度高、出肉率高和較耐低氧等優(yōu)良特點(diǎn), 其推廣應(yīng)用提高了我國(guó)鰱的良種覆蓋率[3]。

長(zhǎng)豐鰱自通過(guò)審定, 已連續(xù)繁育了3代, 即長(zhǎng)豐鰱子一代(CF1)、長(zhǎng)豐鰱子二代(CF2)和長(zhǎng)豐鰱子三代(CF3)。其大多數(shù)親本均由長(zhǎng)豐鰱良種場(chǎng)和繁育基地連續(xù)繁育, 就此系統(tǒng)開(kāi)展長(zhǎng)豐鰱種質(zhì)資源遺傳監(jiān)測(cè)和評(píng)估, 對(duì)其優(yōu)良性狀的保持具有重要意義。微衛(wèi)星(SSR)因其穩(wěn)定性高、多態(tài)性豐富、共顯性遺傳、位點(diǎn)分布廣及分析成本低等特點(diǎn)被廣泛應(yīng)用于水產(chǎn)種質(zhì)資源的遺傳監(jiān)測(cè)。唐首杰等[4]通過(guò)微衛(wèi)星對(duì)團(tuán)頭魴(Megalobrama amblycephala)3個(gè)選育群體進(jìn)行的遺傳純度檢測(cè), 為純化育種群體和監(jiān)測(cè)種質(zhì)質(zhì)量提供了理論依據(jù)。李耀國(guó)等[5]采用微衛(wèi)星對(duì)三亞海域卵形鯧鲹(Trachinotus ovatus)的養(yǎng)殖群體與野生群體進(jìn)行了遺傳多態(tài)性分析, 及基因型與性狀的關(guān)聯(lián)分析, 證實(shí)野生群體遺傳多樣性較養(yǎng)殖群體高; 微衛(wèi)星位點(diǎn)中存在全長(zhǎng)、體寬、體高和體質(zhì)量的優(yōu)勢(shì)基因型。王豐等[6]用12個(gè)微衛(wèi)星標(biāo)記對(duì)長(zhǎng)江4個(gè)野生青魚(yú)(Mylopharyngodon piceus)群體和1個(gè)養(yǎng)殖群體進(jìn)行了遺傳多樣性和結(jié)構(gòu)分析, 5個(gè)群體均具有較高遺傳多樣性, 其中4個(gè)野生群體之間遺傳距離較近, 且均與養(yǎng)殖群體之間遺傳距離較遠(yuǎn)。此外, 還有對(duì)大口黑鱸(Micropterus salmoides)[7]、唇?(Hemibarbus labeo)[8]、大瀧六線魚(yú)(Hexagrammos otakii)[9]、團(tuán)頭魴[10]、鯉[11]和大菱鲆(Scophthalmusmaximus)[12]等選育群體遺傳監(jiān)測(cè)的研究報(bào)道, 為評(píng)估相關(guān)選育群體的育種潛力和培育新品種(系)提供了支撐。本研究旨在利用微衛(wèi)星標(biāo)記分析長(zhǎng)豐鰱連續(xù)不同世代群體的遺傳多樣性與遺傳結(jié)構(gòu), 為其優(yōu)良性狀延續(xù)保持技術(shù)的建立與品種的持續(xù)升級(jí)換代提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

CF1親本群體采集于河南省南陽(yáng)市宛城區(qū)白河橋漁場(chǎng)長(zhǎng)豐鰱良種繁育基地, 共采集21尾; 而CF2、CF3和L群體采集于湖北省浠水縣長(zhǎng)豐鰱良種場(chǎng), 分別采集30尾。采集樣本置于95%的乙醇中固定,-20℃冰箱中保存?zhèn)溆谩颖净拘畔⒁?jiàn)表 1。

表1 長(zhǎng)豐鰱各齡體長(zhǎng)及體質(zhì)量組成Tab. 1 Body length and body mass in each age group of Changfeng silver carp

1.2 DNA提取

采用高鹽法進(jìn)行樣本基因組DNA提取, 經(jīng)1%瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)后, 用無(wú)菌雙蒸水調(diào)整濃度為50 ng/μL, -20℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.3 微衛(wèi)星引物

采用本團(tuán)隊(duì)自主開(kāi)發(fā)的18對(duì)鰱微衛(wèi)星引物進(jìn)行分析, 熒光引物由武漢天一輝遠(yuǎn)生物公司合成,引物序列及退火溫度如表 2所示。

表2 鰱衛(wèi)星分子標(biāo)記及其引物序列Tab. 2 Microsatellite markers and their primers sequences in silver carp

1.4 PCR擴(kuò)增

PCR反應(yīng)體系為20 μL, 其中模板DNA 1 μL (50 ng),上下游引物各0.5 μL, PCR mix 18 μL; PCR擴(kuò)增程序?yàn)? 94℃預(yù)變性3min; 94℃變性30s, 退火(44—60℃)30s, 72℃延伸30s, 30個(gè)循環(huán); 72℃延伸5min;4℃保存。

1.5 數(shù)據(jù)處理

采用熒光引物對(duì)4個(gè)群體樣本進(jìn)行擴(kuò)增, 其產(chǎn)物經(jīng)1.5%瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)后進(jìn)行毛細(xì)管電泳;采用Popgene1.3.1軟件分析等位基因數(shù)(Na)、有效等位基因數(shù)(Ne)、期望雜合度(He)和觀測(cè)雜合度(Ho)及子代間的遺傳相似性系數(shù)、遺傳距離等遺傳參數(shù); 利用Cervus 3.0軟件計(jì)算多態(tài)信息含量(Polymorphism information content,PIC); 近交系數(shù)(Fis)和群體間的遺傳分化指數(shù)(Fst)及哈代-溫伯格平衡由Arlequin 3.1.1分析軟件統(tǒng)計(jì)獲得; 群體間聚類分析圖采用MEGA 5.0軟件中UPGMA方法構(gòu)建。

2 結(jié)果

2.1 鰱與長(zhǎng)豐鰱各子代的遺傳多樣性分析

18個(gè)鰱微衛(wèi)星位點(diǎn)在L、CF1、CF2和CF3群體中檢測(cè)到等位基因數(shù)分別為130、103、93和91個(gè)(表 3)。L、CF1、CF2和CF3的平均等位基因數(shù)(Na)分別為7.2222、5.7222、5.1667和5.0556, 平均有效等位基因數(shù)(Ne)分別為4.3122、3.2551、3.2274和3.1461(表 3); 鰱平均等位基因數(shù)和平均有效等位基因數(shù)均比長(zhǎng)豐鰱后代高, 其在長(zhǎng)豐鰱后代中呈逐代下降趨勢(shì)。各微衛(wèi)星位點(diǎn)Na和Ne見(jiàn)表 3, 在鰱L群體中Na和Ne最高的是位點(diǎn)BL5; 在長(zhǎng)豐鰱子一代(CF1)群體中Na和Ne最高的分別是位點(diǎn)BL109和位點(diǎn)BL5; 在長(zhǎng)豐鰱子二代(CF2)群體中Na最高的是位點(diǎn)BL5和位點(diǎn)BL109, 而Ne最高的是位點(diǎn)BL5; 在長(zhǎng)豐鰱子三代(CF3)群體中Na最高的是位點(diǎn)BL5、BL55和BL109,Ne最高的是位點(diǎn)BL5。

2.2 群體的雜合度

鰱觀測(cè)雜合度為0.2667—1.0000, 平均觀測(cè)雜合度為0.7190, 期望雜合度為0.2350—0.8994, 平均期望雜合度為0.7260; 長(zhǎng)豐鰱子一代(CF1)平均觀測(cè)雜合度為0.6975, 平均期望雜合度為0.6422; 長(zhǎng)豐鰱子二代(CF2)平均觀測(cè)雜合度為0.6111, 平均期望雜合度為0.6353; 長(zhǎng)豐鰱子三代(CF3)平均觀測(cè)雜合度為0.5407, 平均期望雜合度為0.6235(表 3)。4個(gè)群體中平均觀測(cè)雜合度和期望雜合度： 鰱＞長(zhǎng)豐鰱子一代＞長(zhǎng)豐鰱子二代＞長(zhǎng)豐鰱子三代; 鰱雜合度較長(zhǎng)豐鰱高, 不同群體在同一位點(diǎn)雜合度也有所不同, 同一位點(diǎn)在同一種群中觀測(cè)雜合度和期望雜合度相差較大, 如位點(diǎn)S92和位點(diǎn)H121; 可能是該位點(diǎn)上的無(wú)效等位基因所致; 若無(wú)效等位基因不被識(shí)別, PCR擴(kuò)增時(shí)會(huì)導(dǎo)致純合子過(guò)剩或雜合子缺失,從而導(dǎo)致Ho和He出現(xiàn)偏差。

2.3 多態(tài)信息含量(PIC)

4個(gè)群體多態(tài)信息含量(PIC)為0.0320—0.8730(表 3), 鰱的平均多態(tài)信息含量(PIC)高于長(zhǎng)豐鰱三個(gè)子代, 而長(zhǎng)豐鰱各子代間平均PIC呈現(xiàn)逐代下降趨勢(shì)。4個(gè)群體多態(tài)信息含量由高到低依次為: 鰱(0.6748)＞長(zhǎng)豐鰱子一代(0.5784)＞長(zhǎng)豐鰱子二代(0.5730)＞長(zhǎng)豐鰱子三代(0.5609); 鰱群體中PIC最高位點(diǎn)是BL109, 長(zhǎng)豐鰱各子代群體中PIC最高位點(diǎn)都是BL5。

2.4 Hardy-Weinberg平衡分析

如表 4所示, 位點(diǎn)H121和BL55的d值在4個(gè)群體中均為負(fù)值, 表明4個(gè)群體在這2個(gè)基因位點(diǎn)上可能存在雜合子缺失。在鰱群體中有8個(gè)位點(diǎn)的d值為負(fù)數(shù), 而在長(zhǎng)豐鰱子一代、子二代和子三代中d值為負(fù)數(shù)的位點(diǎn)數(shù)量分別為5、11和13個(gè)。4個(gè)群體平均d值分別為0.0044、0.0681、-0.0345、-0.1178,其中鰱和長(zhǎng)豐鰱子一代的d值為正數(shù), 長(zhǎng)豐鰱子二代與子三代2個(gè)群體的d值為負(fù)數(shù)。這說(shuō)明后2個(gè)群體都可能存在雜合子缺失情況, 且長(zhǎng)豐鰱子三代雜合子缺失最為嚴(yán)重。如表 3所示, 位點(diǎn)H121、H129和S78在4個(gè)群體中都偏離了Hardy-Weinberg平衡狀態(tài)(P＜0.05)。4個(gè)群體平均Hardy-Weinberg平衡P值分別為0.3096、0.4230、0.2844和0.1635,P值均大于0.05, 4個(gè)群體都處于Hardy-Weinberg平衡狀態(tài)。

表3 18個(gè)位點(diǎn)在鰱和長(zhǎng)豐鰱4個(gè)群體中的遺傳多樣性Tab. 3 Genetic diversity of four populations of silver carp and Changfeng silver carp based on 18 polymorphic microsatellite loci

續(xù)表3

表4 Hardy-Weinberg平衡檢測(cè)d值及P值Tab. 4 The d and P value of each locus by Hardy-Weinberg test

2.5 固定指數(shù)

鰱與長(zhǎng)豐鰱子一代、子二代和子三代平均近交系數(shù)Fis分別為-0.057、-0.0017和0.0372(表 5);鰱與長(zhǎng)豐鰱后代間遺傳分化系數(shù)Fst分別為0.0319、0.0301和0.0352(表 6); 4個(gè)群體間Fst最大的是鰱與長(zhǎng)豐鰱子三代, 為3.52%(表 6)。在長(zhǎng)豐鰱后代中,CF1與CF2間遺傳分化指數(shù)值0.0164, CF1與CF3間遺傳分化指數(shù)值0.0286, CF2與CF3間遺傳分化指數(shù)值0.0176; 其中CF1與CF2間遺傳分化指數(shù)最小, 其遺傳變異主要是來(lái)自個(gè)體之間; 鰱與長(zhǎng)豐鰱后代之間遺傳分化指數(shù)值(Fst)較高, 而長(zhǎng)豐鰱各后代之間遺傳分化很低。

表5 鰱、長(zhǎng)豐鰱各世代間Fis和Fst值比較Tab. 5 Comparison of Fis and Fst values among different generations of silver carp and Changfeng silver carp

長(zhǎng)豐鰱子代群體有一定程度觀測(cè)雜合度過(guò)剩現(xiàn)象, 子一代、二代和三代群體雜合子過(guò)剩位點(diǎn)數(shù)分別為13、7和6個(gè); 鰱群體中近交系數(shù)Fis最高位點(diǎn)是H121(0.5200; 表 7), 該位點(diǎn)在群體內(nèi)遺傳變異程度低, 遺傳多樣性也低; 4個(gè)群體微衛(wèi)星位點(diǎn)中BL55遺傳分化(Fst)值最大(0.0642), BL116值最小(0.0178); 平均值為0.0406; 遺傳分化程度較弱的位點(diǎn)有13個(gè), 中等的位點(diǎn) 5個(gè); 而在長(zhǎng)豐鰱后代中遺傳分化(Fst)平均值為0.0282, 僅BL55遺傳分化程度中等, 其他位點(diǎn)都程度較弱, H121和BL56分化程度最低為0.0039(表 7); 長(zhǎng)豐鰱后代在檢測(cè)的18個(gè)多態(tài)位點(diǎn)上都表現(xiàn)出遺傳分化不明顯, 處于低等水平。

表7 鰱、長(zhǎng)豐鰱各世代18對(duì)微衛(wèi)星位點(diǎn)的F-檢驗(yàn)Tab. 7 F-statistics for different generations of silver carp and Changfeng silver carp at 18 microsatellite loci

2.6 遺傳距離及遺傳相似性系數(shù)

4個(gè)群體間遺傳距離為0.0299—0.0934(表 8),鰱與長(zhǎng)豐鰱三個(gè)世代遺傳距離最遠(yuǎn)(0.1174), 與CF2的遺傳距離為0.1115, 與CF1的遺傳距離為0.1114, 鰱與長(zhǎng)豐鰱子一代、子二代和子三代之間遺傳距離逐漸上升; 而在長(zhǎng)豐鰱子代之間, 子一代與子二代之間遺傳距離為0.0392, 與子三代之間遺傳距離為0.0951; 子二代和子三代遺傳距離為0.0544, 其后代遺傳距離有上升趨勢(shì); 鰱與長(zhǎng)豐鰱各子代之間遺傳相似性系數(shù)為0.8892—0.8946, 群體間遺傳相似度較高, 但長(zhǎng)豐鰱后代群體間遺傳相似性系數(shù)則更高, 其中CF1與CF2之間遺傳相似度最高(0.9616), 而CF1與CF3相對(duì)較低(0.9093)。依據(jù)4個(gè)群體間遺傳距離值, 采用UPGMA法構(gòu)建聚類圖(圖 1), 長(zhǎng)豐鰱CF1群體最先與CF2匯成一支, 接著與CF3匯成一簇, 最后與鰱聚在一起。

圖1 鰱、長(zhǎng)豐鰱共4個(gè)群體基于Nei氏無(wú)偏遺傳距離的UPGMA進(jìn)化樹(shù)Fig. 1 An unweighted pair group method with arithmetic mean(UPGMA) dendrogram for 4 populations of silver carp and Changfeng silver carp based on Nei’s unbiased genetic distance

表8 鰱、長(zhǎng)豐鰱共4個(gè)群體的Nei氏遺傳距離(下三角)及遺傳相似性系數(shù)(上三角)Tab. 8 Nei’s standard genetic distance (below) and genetic identity (above) between 4 populations of silver carp and Changfeng silver carp

3 討論

3.1 群體遺傳多樣性

生物遺傳多樣性能反映一個(gè)種群的進(jìn)化、演化歷程, 是物種長(zhǎng)期適應(yīng)環(huán)境和生存的基礎(chǔ)。遺傳多樣性的高低是衡量生物對(duì)環(huán)境適應(yīng)能力的重要指標(biāo)。遺傳多樣性越高, 生物對(duì)環(huán)境的適應(yīng)性就越強(qiáng); 生物越易存活下來(lái), 適應(yīng)新環(huán)境并繁衍后代[13]。遺傳多樣性也是衡量物種遺傳潛力的重要指標(biāo)。遺傳潛力與生物遺傳多樣性多呈正相關(guān); 潛力越大, 遺傳多樣性也越豐富。在本研究中鰱群體等位基因數(shù)和有效等位基因數(shù)均高于長(zhǎng)豐鰱群體, 主要是因?yàn)殚L(zhǎng)豐鰱由長(zhǎng)江水系的原始親本雌性個(gè)體經(jīng)雌核發(fā)育等技術(shù)選育而來(lái)。在雌核發(fā)育的草魚(yú)和團(tuán)頭魴后代中也發(fā)現(xiàn)其平均等位基因數(shù)低于普通群體[14,15]。在長(zhǎng)豐鰱后代中, 不同子代間等位基因數(shù)(Na)和有效等位基因數(shù)(Ne)都呈逐漸下降的趨勢(shì)。隨著人工繁育世代的增加, 群體間近交程度加重, 群體中會(huì)存在等位基因丟失現(xiàn)象。與此同時(shí),也會(huì)剔除一些非目標(biāo)性狀基因, 穩(wěn)定目標(biāo)性狀基因,達(dá)到相關(guān)基因進(jìn)一步純合, 遺傳多樣性和育種潛力也降低。在長(zhǎng)豐鰱后代中平均等位基因和有效等位基因均比葉香塵等[16]檢測(cè)的長(zhǎng)豐鰱等位基因數(shù)要多, 可能是由于檢測(cè)樣本或檢測(cè)方法不同造成的。在通常情況下, 檢測(cè)等位基因數(shù)和研究樣本量的大小有關(guān)[17]。與傳統(tǒng)聚丙烯酰胺凝膠電泳相比,基因分型技術(shù)有更高的分辨率, 可分辨出2—4 bp的等位基因[18], 極大地提高檢測(cè)的準(zhǔn)確性和檢測(cè)效率。

雜合度是評(píng)估遺傳多樣性的重要指標(biāo)之一。期望雜合度是評(píng)價(jià)群體生物多樣性的最適參數(shù), 能直接反映群體遺傳多樣性。期望雜合度He高低與生物適應(yīng)性呈正相關(guān)。一個(gè)物種的期望雜合度越高, 適應(yīng)環(huán)境能力越強(qiáng), 生存機(jī)會(huì)亦越大[19]。在本研究中4個(gè)群體的觀測(cè)雜合度和期望雜合度均為鰱最高, 長(zhǎng)豐鰱子三代最低。在長(zhǎng)豐鰱3個(gè)群體中, 期望雜合度區(qū)間為0.6235—0.7260, 均高于葉香塵等[16]檢測(cè)的廣西養(yǎng)殖長(zhǎng)豐鰱(0.4133), 且低于檢測(cè)的長(zhǎng)江三峽庫(kù)區(qū)4個(gè)群體鰱(0.7500—0.7943)[20]。總體上, 在長(zhǎng)豐鰱3個(gè)子代中, 期望雜合度呈逐漸下降趨勢(shì), 這與大口黑鱸世代選育群體逐代下降變化趨勢(shì)一致[7]。在長(zhǎng)豐鰱3個(gè)子代間, 期望雜合度相差不大, 從子一代到子三代減少了3.00%。觀測(cè)雜合度子三代較子一代減少了29.00%。與張?zhí)鞎r(shí)等[21]在中國(guó)對(duì)蝦(Fenneropenaeus chinensis)發(fā)現(xiàn)的觀測(cè)雜合度下降3.5%相比, 降比更大。長(zhǎng)豐鰱隨著繁育子代的增加, 群體純合度增加。與此同時(shí), 長(zhǎng)豐鰱3個(gè)子代群體期望雜合度均較高, 群體尚未出現(xiàn)明顯的近交及瓶頸效應(yīng), 群體遺傳多樣性保持較好, 其具備持續(xù)選育潛力。

根據(jù)Botstein等[22]對(duì)微衛(wèi)星位點(diǎn)多態(tài)性的定義,當(dāng)PIC＜0.25時(shí), 該位點(diǎn)多態(tài)性低;PIC值在0.25—0.50, 表明其具有中度多態(tài)性;PIC＞0.50時(shí),該位點(diǎn)多態(tài)性高。鰱及長(zhǎng)豐鰱子一代、二代和三代4個(gè)群體平均PIC值分別為0.6748、0.5784、0.5730和0.5609, 表明4個(gè)群體遺傳多樣性都較高, 但長(zhǎng)豐鰱群體間呈逐代下降趨勢(shì)。基于Hardy-Weinberg平衡檢驗(yàn)結(jié)果, 4個(gè)群體平均d值分別為0.0044、0.0681、-0.0345和-0.1178。d值為負(fù)數(shù), 表明長(zhǎng)豐鰱子二代和子三代群體雜合子缺失嚴(yán)重, 在中國(guó)對(duì)蝦、南方擬?(Pseudohemiculter dispar)、斑點(diǎn)叉尾鮰(Ictalurus punctatus)、團(tuán)頭魴和德國(guó)鏡鯉(Cyprinus carpioL.)等群體的研究中也發(fā)現(xiàn)類似現(xiàn)象[21,23—26]。雜合子缺失可能是無(wú)效等位基因存在或在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)中出現(xiàn)丟失現(xiàn)象所引起, 但也可能與選育群體被高強(qiáng)度選擇有關(guān)[27]。或者是在人工繁殖時(shí)群體雌雄比例、配組繁殖不合理導(dǎo)致近親繁殖, 也可能因檢測(cè)樣本數(shù)太少引起。在長(zhǎng)豐鰱后代親本培育時(shí)受人為干擾嚴(yán)重, 亦會(huì)導(dǎo)致雜合子缺失。平衡偏離會(huì)造成一些不利影響。如群體內(nèi)等位基因丟失, 導(dǎo)致純合子比例上升, 種群遺傳多樣性隨之降低,近交衰退幾率也會(huì)上升, 最終可能會(huì)導(dǎo)致整個(gè)種群衰退。在今后應(yīng)持續(xù)監(jiān)測(cè)關(guān)注群體遺傳多樣性。

3.2 群體遺傳變異分析

生物對(duì)環(huán)境適應(yīng)性改變是其生存和繁衍的基礎(chǔ), 群體遺傳變異程度是衡量一個(gè)群體存在選育潛力和種質(zhì)資源可持續(xù)利用的前提。18個(gè)鰱微衛(wèi)星位點(diǎn)中有10個(gè)位點(diǎn)近交系數(shù)Fis值為正值, 8個(gè)位點(diǎn)為負(fù)值, 平均Fis值0.0119。3個(gè)長(zhǎng)豐鰱子代間存在輕度的近交現(xiàn)象, 3個(gè)群體Fis值分別為-0.0943、0.0229和0.1029, 世代間近交程度逐漸加重。今后在人工繁殖中應(yīng)盡可能擴(kuò)大繁育親本群體, 制定科學(xué)合理的繁育計(jì)劃。遺傳分化指數(shù)(Fst)是衡量群體間遺傳分化程度的重要參數(shù)。McConnell S等[28]認(rèn)為,Fst值在0.00—0.05, 群體間遺傳分化較小; 在0.05—0.15, 存在中等程度遺傳分化; 在0.15—0.25,群體間遺傳分化較大; 在0.25以上, 群體間遺傳分化明顯。長(zhǎng)豐鰱后代群體中各位點(diǎn)Fst值在0.0039—0.0610, 群體平均遺傳分化指數(shù)為0.0282, 群體遺傳分化很小。此研究結(jié)果與李镕等[7]研究大口黑鱸世代群體總遺傳分化指數(shù)為0.013相近。這表明長(zhǎng)豐鰱后代遺傳結(jié)構(gòu)基本一致, 雖出現(xiàn)一定的遺傳分化,但分化程度較低。長(zhǎng)豐鰱子一代與子二代Fst值最小為0.0164, 子二代與子三代Fst為0.0176, 子一代與子三代的遺傳分化指數(shù)Fst最大(0.0286)。隨著選育進(jìn)程的不斷開(kāi)展, 世代間遺傳分化系數(shù)在相鄰世代之間相繼減小, 亦可能會(huì)進(jìn)一步增大[29]。長(zhǎng)豐鰱不同世代間遺傳變異大部分來(lái)自群體內(nèi), 群體間遺傳分化程度很低。長(zhǎng)豐鰱世代間遺傳距離均較小,說(shuō)明其遺傳相似性變高。就目前而言, 雖然長(zhǎng)豐鰱群體間遺傳多樣性逐代降低, 但遺傳多樣性水平還維持在較高水平, 長(zhǎng)豐鰱不同世代間遺傳結(jié)構(gòu)趨于穩(wěn)定。