復(fù)合氮源及碳氮比對(duì)鹿茸菇工廠化栽培的效應(yīng)研究

張春柳

（寧德市食用菌技術(shù)推廣站，福建 寧德 352000）

鹿茸菇（Lyophyllum decastes），學(xué)名荷葉離褶傘，別名荷葉蘑、凍菌、冷香菌、一窩雞等，隸屬離褶傘屬，形態(tài)似鹿茸切片，是一種珍稀的藥食同源性真菌[1]。鹿茸菇富含β-葡聚糖、縮氨酸、礦物質(zhì)和維生素B2等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)[2，3]，對(duì)增強(qiáng)人體免疫力、抗氧化、抑制腫瘤，以及預(yù)防和改善糖尿病、高膽固醇和高血壓等有一定作用[4-6]。還有與其同屬的玉蕈離褶傘[7]、煙色離褶傘[8]、灰離褶傘[9]等種類也已備受關(guān)注，開發(fā)前景好。

1998年，日本王子制紙株式會(huì)社首次實(shí)現(xiàn)鹿茸菇的室內(nèi)栽培，我國(guó)于2006年（上海）開始其周年化設(shè)施栽培[3]。但較長(zhǎng)時(shí)期內(nèi)存在發(fā)菌期較長(zhǎng)、平均單產(chǎn)偏低，甚至大面積不出菇現(xiàn)象[3]，影響鹿茸菇生產(chǎn)的發(fā)展。鹿茸菇可利用麩皮、黃豆粉、豆粕、大豆皮、玉米粉、花生餅粉等有機(jī)氮源[10]和硫酸銨、硝酸銨等無機(jī)氮源[11]。農(nóng)作物秸稈由于纖維素含量較高而含氮量較低，工廠化栽培中少有單獨(dú)使用[12]。

關(guān)于鹿茸菇生長(zhǎng)適宜的氮源及碳氮比，學(xué)者通過液體培養(yǎng)研究顯示的結(jié)果不盡相同，最適氮源有麩皮[13，14]、蛋白胨[7]、牛肉膏[15]、面粉和蛋白胨[16]等，最適碳氮比有50/1[13]、16/1[14]、20/1～30/1[15]等；張凌姍[16]則認(rèn)為固體培養(yǎng)最優(yōu)氮源是酵母粉。在子實(shí)體培養(yǎng)研究方面，張曉華等[10]、馮占等[17]的試驗(yàn)配方均含玉米、大豆成分，子實(shí)體分化整齊，菇形較好。除馴化栽培和液體菌種配方的優(yōu)化外，鹿茸菇的研究還集中在有效成分的提取、結(jié)構(gòu)及藥用功效等方面[18]，而關(guān)于復(fù)合氮源對(duì)菌絲生長(zhǎng)和產(chǎn)量的影響研究則較少。

筆者在科技特派員服務(wù)期間，以現(xiàn)有鹿茸菇工廠化栽培配方為基礎(chǔ)，采用麩皮、大豆粉、玉米粉三種氮源的不同配比，進(jìn)行工廠化栽培鹿茸菇試驗(yàn)。通過測(cè)定菌絲生長(zhǎng)速度和子實(shí)體產(chǎn)量，探討不同氮源及碳氮比培養(yǎng)料配方對(duì)菌絲生長(zhǎng)和子實(shí)體產(chǎn)量的影響。

1 材料與方法

1.1 供試菌株及培養(yǎng)基

供試菌株：如意情L(zhǎng)R-12，引自福建珍菌子生物科技有限公司。

液體菌種配方：馬鈴薯200 g（去皮煮汁）、葡萄糖20 g，蛋白胨5 g，硫酸鎂1 g，磷酸二氫鉀2 g，用水定容至1 000 mL，并用10%硫酸溶液將pH調(diào)至6.5。

1.2 供試配方

麩皮、大豆粉、玉米粉等原料采購(gòu)自本地市場(chǎng)，由福建農(nóng)林大學(xué)檢測(cè)碳、氮含量及碳氮比（表1）。各氮源原料分別以0%、10%、20%和30%的比例配制而成10組配方（表2），以企業(yè)現(xiàn)用的配方（配方1）為對(duì)照。

表1 主要栽培原料的碳、氮含量

表2 鹿茸菇栽培試驗(yàn)配方

1.3 試驗(yàn)方法

按各配方中原輔材料的比例，將木屑、玉米芯、麩皮、大豆粉等進(jìn)行稱重，倒入攪拌機(jī)中加水?dāng)嚢杈鶆颍?5%左右，pH 6.5，用自動(dòng)沖壓裝袋機(jī)裝料，采用規(guī)格為183 mm×355 mm×0.05 mm的聚丙烯塑料袋，折合每袋裝干料重約480 g，袋口用塑料套環(huán)蓋密封。每配方重復(fù)3次，每重復(fù)48袋。經(jīng)智能滅菌柜滅菌（126 ℃保持3.5 h），在凈化車間預(yù)冷、強(qiáng)冷和接種后，在工廠化生產(chǎn)的培養(yǎng)室和育菇室進(jìn)行發(fā)菌培養(yǎng)、出菇管理，測(cè)量記錄各配方的菌絲生長(zhǎng)速度、子實(shí)體產(chǎn)量和出菇特征。

（1）菌絲生長(zhǎng)速度測(cè)定。各配方接種后置于溫度為22～24 ℃的恒溫培養(yǎng)室中培養(yǎng)，待菌絲長(zhǎng)到袋肩后，每重復(fù)隨機(jī)抽取5袋，沿菌絲生長(zhǎng)方向在袋壁尖端處劃線測(cè)量生長(zhǎng)長(zhǎng)度，計(jì)算菌絲平均生長(zhǎng)速度。

（2）子實(shí)體產(chǎn)量統(tǒng)計(jì)。各配方菌袋完成發(fā)菌后，按常規(guī)方法進(jìn)行開袋、催蕾、育菇等出菇管理，子實(shí)體采收、切根后稱重。觀察出菇特性，統(tǒng)計(jì)每個(gè)小區(qū)的產(chǎn)量。

（3）碳氮比測(cè)定。總碳測(cè)定采用重鉻酸鉀容量法（外加熱法）[19]；總氮測(cè)定采用微量凱氏定氮法[20]。

（4）數(shù)據(jù)分析。采用SPSS數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)對(duì)試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行方差分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同氮源配方的菌絲生長(zhǎng)情況

培養(yǎng)料不同氮源配方，鹿茸菇菌絲生長(zhǎng)速度不同（表3）。氮源為麩皮10%、大豆粉10%、玉米粉10%的栽培配方10，菌絲平均生長(zhǎng)速度為4.93 mm/d，顯著快于其他配方。添加單一氮源30%的3個(gè)配方的菌絲平均生長(zhǎng)速度，配方1（麩皮）優(yōu)于配方4（大豆粉）優(yōu)于配方7（玉米粉），表明鹿茸菇菌絲體對(duì)麩皮的利用率較高，大豆粉次之。配方7菌絲生長(zhǎng)慢，平均生長(zhǎng)速度較配方10慢1.53 mm/d。配方1與配方2、配方3、配方5、配方6之間無顯著差異，配方4、配方7、配方8、配方9之間無著顯著差異。不同配方菌絲培養(yǎng)初期均為白色，隨培養(yǎng)時(shí)間延長(zhǎng)，顏色逐漸加深變黃，變化趨勢(shì)較一致。

2.2 不同氮源配方的子實(shí)體產(chǎn)量

不同氮源配方培養(yǎng)料栽培鹿茸菇的產(chǎn)量結(jié)果如表3所示，各配方子實(shí)體均能生長(zhǎng)，產(chǎn)量以氮源為麩皮10%，大豆粉10%，玉米粉10%的配方10優(yōu)于其他配方，為502.11 g/袋，顯著高于配方1（對(duì)照），是配方1的3.52倍。添加單一氮源30%的3個(gè)配方中，子實(shí)體產(chǎn)量以大豆粉（配方4）優(yōu)于玉米粉（配方7）優(yōu)于麩皮（配方1），表明鹿茸菇子實(shí)體對(duì)大豆粉的利用率較高，玉米粉次之。

表3 不同配方的鹿茸菇菌絲生長(zhǎng)速度和子實(shí)體產(chǎn)量

配方2、配方3、配方4、配方8和配方9間的產(chǎn)量無顯著差異，配方1與配方5間的產(chǎn)量無顯著差異，配方6與配方7間的產(chǎn)量無顯著差異。

2.3 菌絲生長(zhǎng)速度、碳氮比與子實(shí)體產(chǎn)量的關(guān)系

采用二因素相關(guān)統(tǒng)計(jì)方法對(duì)不同配方的鹿茸菇菌絲生長(zhǎng)速度、子實(shí)體產(chǎn)量和碳氮比之間的關(guān)系進(jìn)行分析，得出菌絲生長(zhǎng)速度與子實(shí)體產(chǎn)量的相關(guān)性：r= - 0.311，sig值為0.094＞0.05，菌絲生長(zhǎng)速度與子實(shí)體產(chǎn)量的關(guān)系未達(dá)到統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性。說明不能用菌絲生長(zhǎng)速度預(yù)測(cè)產(chǎn)量。不同配方碳氮比與子實(shí)體產(chǎn)量的相關(guān)性：r= - 0.484，sig值為0.007＜0.05，不同配方碳氮比與子實(shí)體產(chǎn)量呈負(fù)顯著相關(guān)，說明一定范圍內(nèi)，碳氮比越大越不利于子實(shí)體產(chǎn)出。不同配方碳氮比與菌絲生長(zhǎng)速度的相關(guān)性：r= 0.081，sig值為0.671＞0.05，不同配方碳氮比與菌絲生長(zhǎng)速度間未達(dá)統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性。

2.4 不同氮源配方的鹿茸菇生長(zhǎng)特性

10個(gè)配方在統(tǒng)一的栽培條件下均能正常出菇，菌絲滿袋時(shí)間在40～45天之間（表4），經(jīng)過后熟后于第60天開袋，85～90天可全部采收。但萌發(fā)時(shí)間、發(fā)菌時(shí)間和采收間隔各不相同。其中配方8、配方9、配方10定植發(fā)菌快、時(shí)間短，采收間隔期短，生育期較一致，菌蓋顏色均為灰白色，為鹿茸菇市場(chǎng)認(rèn)可度較好的顏色。

表4 不同氮源配方的鹿茸菇生長(zhǎng)特性比較

3 結(jié)論與討論

本試驗(yàn)結(jié)果表明，從鹿茸菇菌絲生長(zhǎng)速度、子實(shí)體產(chǎn)量看，采用單一氮源配方不如復(fù)合氮源配方栽培效果好，以麩皮為主要氮源的培養(yǎng)料配方的菌絲生長(zhǎng)速度優(yōu)于大豆粉和玉米粉配方，以大豆粉為主要氮源的培養(yǎng)料配方的子實(shí)體產(chǎn)量?jī)?yōu)于玉米粉和麩皮配方。栽培效果最佳的培養(yǎng)料配方為木屑38%，玉米芯30%，麩皮10%，大豆粉10%，玉米粉10%，輕質(zhì)碳酸鈣1.5%，石灰0.5%。

有關(guān)鹿茸菇的栽培，基于麩皮、大豆粉、玉米粉為主的氮源栽培料的應(yīng)用，學(xué)者已提出多種試驗(yàn)配方[6，17]，但這些研究結(jié)果在鹿茸菇氮源篩選方面存在較大的差異，可能與內(nèi)生真菌代謝[21]、培養(yǎng)條件等有關(guān)，需要進(jìn)一步研究探討能否被鹿茸菇菌絲直接有效地代謝利用。此外，供試配方中鹿茸菇菌絲生長(zhǎng)速度與產(chǎn)量相關(guān)性不顯著，表明不能用菌絲生長(zhǎng)速度預(yù)測(cè)產(chǎn)量。一定范圍內(nèi)不同配方碳氮比與子實(shí)體產(chǎn)量呈負(fù)相關(guān)性，表明在一定程度上可依據(jù)碳氮比初步推斷其產(chǎn)量高低。

在試驗(yàn)過程中，存在鹿茸菇菌絲體生長(zhǎng)快，但長(zhǎng)勢(shì)差，分解利用栽培料的能力弱，不能充分吸收利用其營(yíng)養(yǎng)組分，從而導(dǎo)致子實(shí)體產(chǎn)量低的現(xiàn)象。因此，欲從碳、氮源方面推斷子實(shí)體產(chǎn)量高低，更為重要的是通過研究氮源成分對(duì)菌絲長(zhǎng)勢(shì)（粗壯、濃密程度）、萌發(fā)時(shí)間、菌絲滿袋時(shí)間、采收間隔期等的影響，來判定其對(duì)鹿茸菇子實(shí)體產(chǎn)量構(gòu)成的效應(yīng)。