2 型糖尿病患者血清sICAM-1、PRL 表達與頸動脈內膜中層厚度的相關性研究

李丹，譚小紅，郭菲，劉正，蘇湖梅

湖南省株洲市三三一醫院內分泌科，湖南株洲 412002

對于2 型糖尿病患者而言， 糖尿病大血管病變是導致患者殘疾的重要因素之一，而糖尿病大血管病變的發病機理主要是因為發生動脈粥樣硬化[1-2]。血管壁頸動脈內膜中層厚度（intima-media thickness，IMT）增厚可作為預測心血管事件的發生風險的指標[3]。通常檢測血清可溶性細胞間粘附分子-1 （soluble intercellular adhesion molecule-1，sICAM-1） 水平反映細胞間粘附因子（ICAM-1）的表達水平[4-5]。sICAM-1 的異常表達與血糖控制程度密切相關[6]。 泌乳素（prolactin，PRL）不僅能促進乳腺增生及泌乳作用，對免疫調節功能以及糖代謝也具有重要作用[7]。有研究發現，血糖水平直接通過下丘腦TRH 的分泌最終調節PRL 的分泌，與T2DM 的發生有關[8]。 但PRL 和糖尿病相關并發癥存在聯系的相關研究十分少， 所以該次研究通過選取該院2018 年10 月—2019 年10 月收治的糖尿病患者112 例作為研究對象，檢測T2DM患者血清sICAM-1、PRL 水平， 探討二者與頸動脈IMT 水平的關系，以研究血清sICAM-1、PRL 對T2DM患者并發動脈粥樣硬化的影響。 現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取112 例2 型糖尿病患者展開分析研究，將并發頸動脈粥樣硬化的60 例患者作為CA 組，男34例，女26 例；平均年齡（60.67±6.98）歲；平均病程（6.31±3.97）年。 52 例未合并頸動脈粥樣硬化的糖尿病患者作為對照組， 男28 例， 女24 例； 平均年齡（60.23±6.07）歲；平均病程（5.87±3.51）年。 兩組研究對象的年齡、性別、糖尿病病程比較，差異無統計學意義(P＞0.05)，具有可比性。納入標準：所有T2DM 患者符合WHO1999 年提出的糖尿病診斷及分型標準；CA 組患者均有頸動脈粥樣硬化斑塊 （頸動脈IMT＞1.0 mm 認為頸動脈內膜中層增厚；當患者頸動脈血管壁頸動脈內膜中層厚度超過1.2 mm，同時存在局限性隆起的情況， 則可判定為存在動脈粥樣硬化斑塊）； 該次研究選取研究對象均簽署知情同意書。 排除標準：嚴重感染及乳酸性酸中毒、酮癥酸中毒等糖尿病急性并發癥患者；3 個月內出現應激狀況，如骨折、手術、急性心腦血管事件等患者；伴發惡性腫瘤者；伴有嚴重肝腎功能不全者；伴有內分泌疾病，如腎上腺、甲狀腺、甲狀旁腺等。同時該次研究對象均通過該院醫學倫理委員會批準認可。

1.2 方法

1.2.1 試劑與儀器 sICAM-1 ELISA 試劑盒 （貨號：70 -EK189 -96）、PRL ELISA 試 劑 盒 （ 貨 號：SCA846Hu02）、彩色超聲儀（SONOS 5500）。

1.2.2 樣本的采集與保存 所選研究對象在禁食10～14 h 以后， 在第2 天清晨抽取靜脈空腹血5 mL， 以3 000 r/min 的速度離心處理10 min，取上清液，將其置于-80℃的冰箱中進行保存備用。

1.2.3 酶聯免疫吸附法檢測血清sICAM-1、PRL 水平 采用酶聯免疫吸附（ELISA）法檢測血清sICAM-1、PRL 水平， 試劑盒購自杭州聯科生物技術股份有限公司及南京賽鴻瑞生物科技有限公司， 實驗操作步驟嚴格按照試劑盒說明書進行。

1.2.4 相關生化指標的測定 所選研究對象在禁食10～14 h 以后，在第2 天清晨抽取靜脈空腹血，對血糖、血脂等各項指標予以檢測，其中血糖評價指標包括空腹血糖（FPG）、糖化血紅蛋白（HbA1c），血脂指標包括三酰甘油（TG）、總膽固醇（TC）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）以及低密度脂蛋白膽固醇（LDLC），并測定空腹胰島素（FINS）。 采用葡萄糖氧化酶法測定血糖水平，選用羅氏E170 電化學發光免疫分析儀測定FINS 水平，應用血紅蛋白分析儀對HbA1c予以測定。血脂各項指標采用日本日立公司7180 型全自動生化儀進行測定。

1.2.5 頸動脈內膜中層厚度測定 采用彩色超聲儀SONOS 5500，7.0～11.0 Hz 探頭，軸分辨率為0.1 mm。受試者取仰臥位，放松，頸部側伸45°，頭部偏向檢查區對側，充分暴露其頸部，先從鎖骨內側橫向檢測頸部總動脈膨大近端1 cm 處IMT，此后順著行走方向移動探頭頭部，分別從前、側、后3 個方向對雙側頸動脈 （common carotid artery，CCA）、 頸內動脈（internal carotid artery，ICA） 及頸動脈分叉（carotid bifurcation，CB）予以觀察，分別觀察橫軸和縱軸的二維圖像。 與此同時，對最厚部位和距次近心1 cm 的位置2 點予以測定， 觀察值選擇左側和右側共計4個點的平均值。 凍結頸動脈竇以下1 cm 處，即沒有斑塊部位的圖像，一共進行5 次測量，左右測量一共10 次，取平均值，對頸總動脈IMT 予以評價。

1.3 統計方法

采用SPSS 21.0 軟件進行統計學分析，計量資料符合正態分布，采用（±s）表示，組間比較進行t檢驗，組間有差異時進一步采用SNK-q 檢驗；計數資料采用[n(%)]表示，組間差異比較進行χ2檢驗，Pearson法分析血清sICAM-1、PRL 水平與IMT 的相關性，采用多元線性回歸法分析影響患者IMT 水平的因素，P＜0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組一般資料及相關生化指標比較

CA 組與對照組患者DBP、HDL-C 差異無統計學意義 （P＞0.05）， 相較于對照組患者，CA 組患者SBP、BMI、TG、TC、LDL-C、HbA1c、FPG、FINS 水平顯著較高，差異有統計學意義（P＜0.05）。 見表1。

表1 兩組患者一般資料及相關生化指標比較（±s）

表1 兩組患者一般資料及相關生化指標比較（±s）

指標 對照組（n=52） CA 組（n=60） t 值 P 值BMI（kg/m2）SBP（mmHg）DBP（mmHg）TG（mmol/L）TC（mmol/L）HDL-C（mmol/L）LDL-C（mmol/L）HbA1c（%）FPG（mmol/L）FINS（μmol/L）24.38±3.84 131.41±13.17 81.94±10.94 1.93±0.92 5.17±0.87 1.04±0.22 3.58±0.94 7.28±0.76 8.23±2.07 72.47±19.20 25.92±4.01 142.62±15.85 85.77±12.39 2.49±1.36 6.25±0.91 1.01±0.23 4.07±1.19 7.73±0.94 9.48±3.09 82.95±20.58 2.067 4.034 1.722 2.512 6.393 0.702 2.392 2.758 2.475 2.772 0.041＜0.001 0.088 0.013＜0.001 0.484 0.018 0.007 0.015 0.007

2.2 兩組血清sICAM-1、PRL 水平及頸動脈IMT 比較

CA 組患者血清sICAM-1、PRL 水平顯著高于對照組，差異有統計學意義（P＜0.05），與對照組相比，CA 組患者IMT 顯著增厚，差異有統計學意義（P＜0.05）。 見表2。

表2 兩組患者血清sICAM-1、PRL 水平及頸動脈IMT 水平比較（±s）

表2 兩組患者血清sICAM-1、PRL 水平及頸動脈IMT 水平比較（±s）

組別 sICAM-1（μg/L） PRL（μg/L） IMT（mm）對照組（n=52）CA 組（n=60）t 值P 值248.86±57.28 315.70±88.91 4.431＜0.001 18.62±6.33 31.23±8.94 8.491＜0.001 0.81±0.13 1.33±0.18 17.284＜0.001

2.3 血清sICAM-1、PRL 水平及相關因素與頸動脈IMT 水平相關性分析

相關性分析結果顯示， 患者IMT 與BMI、SBP、TG、TC、LDL-C、HbA1c、FINS、sICAM-1、PRL 呈正相關（P＜0.05），與DBP、HDL-C、FPG 無顯著相關性（P＞0.05）。 見表3。

表3 CA 組IMT 與各因素的相關性分析

2.4 多元線性逐步回歸分析

以IMT 為因變量，以BMI、SBP、TG、TC、LDL-C、HbA1c、FPG、FINS、sICAM-1、PRL 為自變量，展開多元線性逐步回歸分析， 結果顯示sICAM-1、PRL、LDL-C、TG、HbA1c 是T2DM 患者頸動脈IMT 的影響因素（P＜0.05）。 見表4。

表4 T2DM 合并頸動脈粥樣硬化的多元線性逐步回歸分析

3 討論

T2DM 是一種以胰島素抵抗為主要特征的內分泌代謝性疾病，近年來我國人口老齡化加速、生活方式轉變，T2DM 發病率逐年上升，嚴重威脅人民生命健康。隨著胰島素在臨床中的廣泛應用，糖尿病病死率得到控制，急性并發癥明顯減少，但慢性并發癥仍無法避免，成為了心血管事件發生的主要因素，大血管病變能夠導致患者病死風險顯著增加[9]。對于2 型糖尿病患者而言，并發大血管并發癥的病理基礎是動脈粥樣硬化，動脈病變受累以內膜開始，繼而因脂質積聚、血栓形成，最終導致動脈中層的蛻變和鈣化，誘發出現動脈壁增厚變硬和血管腔狹窄， 進一步引發冠心病、腦梗死等嚴重心腦血管疾病[10]。 IMT 作為觀察早期動脈粥樣硬化進展的指標具有重要意義，將IMT 作為全身動脈粥樣硬化病變的一個征兆性指標，通過分析IMT 及相關因素，可反映出患者病變程度及范圍，積極對IMT 相關因素進行控制，可有效預防T2DM 患者大血管病變的發生發展[11]。

ICAM-1 屬于跨膜單鏈糖蛋白之一， 具體可在多個細胞中表達，比如內皮細胞、上皮細胞及淋巴細胞等，屬于重要細胞表面粘附分子之一，能夠結合多種細胞表面成分，介導白細胞與內皮細胞間的粘附，在很多生理病理過程中均有參與[12-13]。 有研究發現，T2DM 患者血清sICAM-1 水平與正常人相比明顯升高， 另有研究表明，T2DM 患者血清sICAM-1 水平與內皮功能損傷明顯呈正相關[14]。而sICAM-1 與動脈粥樣硬化的相關研究發現， 動脈粥樣硬化及冠心病患者血清sICAM-1 水平高表達[15]。因此sICAM-1 與糖尿病及動脈粥樣硬化具有一定相關性， 但T2DM 患者血清sICAM-1 水平與IMT 的關系研究較少。該研究結果顯示，CA 組患者血清sICAM-1 水平顯著高于對照組，提示血清sICAM-1 水平升高與T2DM 患者動脈粥樣硬化的發生密切相關。

PRL 是一種由垂體分泌的多肽類激素， 能夠參與免疫調節及糖代謝過程，糖尿病患者病程長、血糖控制不理想且伴有慢性并發癥的患者易出現高PRL血癥[16]。 PRL 在T2DM 患者及糖調節受損患者血清中顯著降低，提示生理水平下PRL 水平與代謝異常的發生呈負相關[17]。 有動物實驗表明，PRL 干預能減輕小鼠的血清游離脂肪酸水平， 高脂飲食大鼠經PRL 治療后脂肪細胞體積縮小，證明PRL 對代謝具有保護作用[18]。 但另有研究顯示，垂體泌乳素瘤患者會出現糖脂代謝紊亂， 可能與生理狀態與病理狀態下PRL 水平升高對代謝發揮的作用不同有關[19]。 該研究結果顯示，CA 組患者血清PRL 水平顯著高于對照組（P＜0.05），提示血清PRL 高表達與T2DM 患者動脈粥樣硬化的發生有關，PRL 高表達與T2DM患者機體代謝異常有關， 通過參與患者血糖血脂代謝過程進而影響患者頸動脈粥樣硬化的發生發展。CA 組患者BMI、SBP 顯著高于對照組，TG、TC、LDLC、HbA1c、FPG、FINS 水平與對照組相比均明顯升高（P＜0.05），且相關性分析結果顯示，頸動脈IMT 與患者BMI、SBP、TG、TC、LDL-C、HbA1c、FINS、sICAM-1、PRL 呈正相關， 提示CA 組患者相關生化指標較高， 可能是T2DM 合并動脈粥樣硬化的發生與患者機體內糖代謝、胰島素敏感性、氧化應激等多種因素共同作用所致。 對各類因素的影響效果予以明確后發現， 血清sICAM-1、PRL 及LDL-C、TG、HbA1c 是影響T2DM 患者頸動脈IMT 的主要因素，提示上述因素是影響T2DM 患者合并動脈粥樣硬化的主要獨立因素。

綜上所述，T2DM 伴發動脈粥樣硬化患者血清sICAM-1、PRL 水平呈高表達，且與頸動脈IMT 呈正相關，臨床中應對T2DM 患者血清sICAM-1、PRL 水平進行監測，可對患者血管病變進行預測，以便及早干預病變過程。該研究仍存在不足之處，如研究樣本量較小，代表性不足，且對兩因子分子層的作用機理并未闡明，仍需進一步擴大樣本量進行更深層的研究。