CMIA和TRUST在梅毒血清學檢測中的應用價值

瞿莉

【摘要】目的：探討梅毒檢測中化學發光微粒子免疫法（CMIA）和甲苯胺不加熱試驗（TRUST）在梅毒血清學中的應用價值。方法：選取2021年6月—2022年1月在南京市婦幼保健院進行梅毒檢測的人群240例為研究對象，以CMIA和TRUST法對患者血清中梅毒抗體進行檢測，梅毒螺旋體明膠凝集試驗（TPPA）檢驗結果作為金標準，對比兩種檢驗的結果。結果：研究對象經TPPA檢出176例陽性，64例陰性。CMIA檢出 230例陽性，10例陰性，陽性率為 95.83% ；TRUST檢測出陽性63例，陰性 177例 ，陽性率26.25%。CMIA檢測的準確率 73.33% ，靈敏度97.16% ，特異度 7.81%；TRUST檢測的準確率52.91% ，靈敏度35.80%，特異度 100% 。CMIA的準確率和靈敏度遠高于TRUST，但特異度遠低于TRUST，且差異有統計學意義（P<0.05）。結論：CMIA法較TRUST靈敏度和準確度高，但允許一定的假陽性率。在臨床試驗中， 為了提高檢測結果的準確率， 必須輔以TPPA法對可疑標本進行二次確證復查[1]。CMIA更適合作為梅毒血清學初篩方法推廣使用。TRUST有相對較高特異性，可以指導臨床根據滴度對梅毒的治療效果進行評價。

【關鍵詞】梅毒；化學發光微粒子免疫法（CMIA）；甲苯胺不加熱試驗（TRUST）；梅毒螺旋體明膠凝集試驗（TPPA）

Application value of CMIA and TRUST in serological detection of syphilis

QU Li

Maternity Hospital affiliated to Nanjing Medical University （Nanjing Maternal and Child Health Care Hospital）， Nanjing， Jiangsu 210004， China

【Abstract】Objective：To investigate the application value of Chemiluminescence microparticle immunoassay（CMIA） and toluidine unheated test （TRUST） in syphilis serology. Methods：Selection in June 2021 to January 2022 in nanjing maternity and child care for syphilis detection population 240 cases as the research object，CMIA and TRUST methods were used to detect syphilis antibody in serum of patients. Treponema pallidum gelatine agglutination test （TPPA） was used as the gold standard to compare the results of the two tests.Results：176 patients were positive and 64 negative for TPPA. CMIA detected 230 cases positive， 10 cases negative， the positive rate was 95.83%. TRUST was detected in 63 cases and 177 cases， with a positive rate of 26.25%. The accuracy， sensitivity and specificity of CMIA were 73.33%， 97.16% and 7.81% respectively. The accuracy， sensitivity and specificity of TRUST detection were 52.91%， 35.80% and 100%.The accuracy and sensitivity of CMIA were much higher than TRUST， but the specificity was much lower than TRUST， and the difference was statistically significant （P<0.05）.Conclusions：CMIA method is more sensitive and accurate than TRUST， which can improve the accuracy and positive detection rate of treponema pallidum specific antibody screening test， but allow a certain false positive rate. In clinical trials， in order to improve the accuracy of test results， TPPA method must be supplemented to conduct a second confirmatory review of suspicious specimens[1]. CMIA is more suitable for use as a serological screening method for syphilis. TRUST has relatively high specificity and can guide clinical evaluation of the therapeutic effect of syphilis according to titer.

【Key Words】Syphilis； Chemiluminescence microparticle immunoassay（CMIA）； Toluidine red unheated test （TRUST）； Treponema pallidum gelatin agglutination test （TPPA）

梅毒是主要通過與感染者的黏膜病損直接接觸（通常是性接觸）傳染。當病原體在血液播散時，患者的其他體液也具有傳染性。近2020年來，梅毒的感染率上升趨勢嚴峻。而且梅毒還會導致不可逆的視力喪失等嚴重并發癥，所以臨床實踐中應警惕這類性傳播疾病。本研究我院選取門診及住院進行梅毒檢測的240位研究對象，本文主要對ARCHITECT 全自動化學發光免疫檢測儀在篩查梅毒抗體的運用與研究進行闡述，以CMIA進行初篩，TRUST試驗進行復檢，TPPA作為確證試驗，探討多種梅毒檢測方法的臨床診斷與研究，以提高實驗室對于梅毒的檢出率和準確率，現對比研究如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2021年6月—2022年1月在南京市婦幼保健院進行梅毒檢測的人群240例為研究對象，其中女性患者228 例，男性患者12例，年齡19～73歲 ，平均年齡（37.64±12.39）歲.

1.2 儀器和試劑

儀器：ARCHITECT 全自動化學發光免疫檢測儀（美國雅培公司生產）；恒溫箱為新苗三用恒溫水箱，其型號為H.SWX-600BS；生物安全柜型號為ESCO-A2型。所用儀器設備的檢測性能均能滿足實驗要求。

試劑：CMIA是由美國雅培原裝進口的配套試劑；TRUST是英科新創（廈門）科技有限公司生產的梅毒甲苯胺紅不加熱血清試驗診斷試劑盒；TPPA是由日本富士瑞必歐株式會社體外診斷用醫藥品梅毒螺旋體抗體診斷試劑。上述試劑盒均在有效期內。

1.3 方法

患者均于清晨采集靜脈血至少2mL，采血前避免劇烈運動，采集完成進行離心后取上清液進行檢測，分別利用化學發光微粒子免疫法（CMIA）、甲苯胺紅不加熱試驗（TRUST）和梅毒螺旋體明膠凝集試驗（TPPA）進行檢測，所有檢測遵循試劑盒說明書進行。

1.4 觀察指標

以TPPA結果作為金標準，計算CMIA和TRUST的準確率、靈敏度、特異度并進行比較。

1.5 統計學方法

采用SPSS 25.0統計學軟件進行數據分析。計數資料采用（%）表示，進行χ2檢驗，計量資料采用（χ±s） 表示，進行t檢驗，P<0.05為差異具有統計學意義。

2 結果

研究對象經TPPA檢測出陽性176例，陰性64例。CMIA檢出陽性230例，陰性10例，陽性率95.83% ；TRUST檢測出陽性63例，陰性177例，陽性率26.25%。CMIA檢測的準確率 73.33% ，靈敏度97.16%，特異度 7.81% ；TRUST檢測的準確率52.91%，靈敏度35.80%，特異度 100% 。詳細數據見表1、表2。

3 討論

目前臨床上檢出梅毒螺旋體的方法包括：暗視野顯微鏡檢查病損、直接熒光抗體檢測或聚合酶鏈反應。上述檢測方法應用范圍并不廣泛，所以目前診斷主要依靠血清學檢查。首先進行梅毒螺旋體篩選試驗，如酶免疫試驗（EIA）或化學發光免疫分析（CLIA）、電化學發光法（ECLIA）等。若篩選試驗為陽性，再進行確證性試驗通常為梅毒螺旋體顆粒凝集試驗（TPPA）。若兩項試驗均為陽性，可確診梅毒感染。此后，通過甲苯胺紅不加熱試驗（TRUST）（一種定量的非螺旋體試驗）用于檢測疾病活動和評估療效。 在本次研究中，CMIA初篩試驗共檢出230份陽性標本，在230份初篩陽性結果中，TRUST檢出63份陽性標本，167份陰性標本，兩種方法檢出率差異較為顯著.化學發光微粒子免疫法（CMIA）是近年來實驗室新進用于檢測TP的一項技術，全自動化程度，流程簡易，檢測速度較快，可避免交叉污染，是血清免疫分析技術發展的風向標。梅毒螺旋體篩選試驗往往最先有反應，通常在硬下疳出現 2 周內檢測陽性[2]。然而，對于檢測結果陰性的表現有梅毒樣癥狀或有高風險接觸者，應當在2～4周后再次進行檢測。甲苯胺紅不加熱試驗（TRUST）試驗可在硬下疳出現后長達 4 周仍為陰性，因此一期梅毒患者該項檢測常為陰性，而二期梅毒患者中該項檢測的敏感性可達98%～100%。然而，由于 TRUST是一項非特性組織損傷檢測方法，所以除了梅毒以外還有其他原因導致檢測結果陽性，如風濕性心臟病、鉤端螺旋體病、肝硬化、麻風等。TRUST價格經濟、操作簡單，可通過檢測抗體的滴度來了解疾病的活動度。故TRUST在梅毒感染的臨床診斷中準確性及敏感性較低，不適用于早期感染的診斷。TPPA試驗準確度和靈敏度都很高，但是操作所需手工設備復雜， 收費價格高， 且操作較為繁瑣，耗時長達2h，結果判定需依靠肉眼主觀判斷，人為因素的影響較大，從而無法進行大規模篩查標本。CMIA與TPPA相比自動化程度高， 檢測流程簡便 ，時間短并且手工環節更少，人工干擾因素較少， 數據的重復性和一致性較高，結果數值具穩定性，適用于基層大規模的標本篩查[3]。實驗室推薦用CMIA法檢測以確保檢驗結果的及時性和可靠性[4]。但CMIA作為初篩試驗，特異度為7.81%，存在一定的假陽性。若對這些假陽性結果不加以重視就隨意發出報告，容易導致醫患糾紛，對患者和家屬也易造成無法挽回的傷害[5]。所以若ARCHITECT梅毒螺旋體抗體項目的檢測結果與臨床癥狀不符時，為了指導臨床醫生正確判讀患者感染的真實情況，實驗室需制訂CMIA檢查需要通過附加其他血清學來驗證檢測結果。

綜上所述，CMIA在臨床梅毒檢測中，CMIA法較TRUST靈敏度和準確度高，但允許一定的假陽性率。在臨床試驗中， 為了提高檢測結果的準確率， 必須輔以TPPA法對可疑標本進行二次確證復查[6]。 CMIA更適合作為梅毒血清學初篩方法推廣使用。TRUST有相對較高特異性，可以指導臨床根據滴度對梅毒的治療效果進行評價。

參考文獻

[1] 邵淑麗，李秋靜，耿建利，等.全自動粒子化學發光法在梅毒抗體篩查中的應用與分析[J].國際檢驗醫學雜志，2020，41（2）：138-140，145

[2] 謝芳鈺，鐘貞玲.酶聯免疫吸附法與TRUST檢測梅毒螺旋體感染的價值分析[J].基層醫學論壇，2020，24（32）： 4664-4665.

[3] 杜靜，張澤蕓，周薇，等.化學發光微粒子免疫分析法檢測梅毒螺旋體特異性抗體的應用與評價[J].廣東醫學，2012，33（8）：1100-1102.

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[5] 張薇，車玉傳.雅培ARCHITECT i2000SR在梅毒實驗室診斷中的臨床應用和評價[J].檢驗醫學與臨床，2018，15（24）：3721-3725.

[6] 任暉暉，益西措姆，次仁央金，等.CMIA法篩查梅毒抗體[J].基礎醫學與臨床，2018，38（2）：235-236.