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核酸到底是怎么檢測的

2022-05-30 10:48:04Eggy&安琪
老年博覽·上半月 2022年8期
關鍵詞:檢測

Eggy&安琪

新冠肺炎出現后,有多種方法可以用來檢測人是否感染了新冠病毒,其中既準確又方便的一種檢測方法就是“核酸檢測”。核酸檢測結果陰性為正常,陽性則相反。

核酸檢測是如何操作的呢?

第一步,醫護人員會采集我們的鼻拭子或咽拭子——用一根長長的棉簽擦拭鼻腔后壁或咽后壁及兩側咽扁桃體位置的分泌物。

采集鼻拭子會讓大部分人很難受。采集咽拭子更方便,而且給人帶來的刺激更小。但對醫護人員來說,采集鼻拭子比采集咽拭子的暴露風險更低,安全系數更高。

第二步,迅速將拭子頭伸進試管里的細胞保存液中,折斷棉簽后立刻擰緊管蓋。

通常情況下,如果患者感染了新冠病毒,拭子應該能夠從鼻咽中提取到病毒。然而,有時病毒可能正在遠離棉簽刮蹭位置的部位繁殖,或者采集位置周圍還沒有足夠多的病毒。所以核酸檢測結果陰性有可能意味著沒有感染新冠病毒,但也可能意味著感染了病毒,只是處于潛伏期,病毒還不能被檢測出來,或者采集時拭子刮錯了地方。

這就是為什么我們需要進行多次核酸檢測。如果連續多次核酸檢測結果都呈陰性,通常就說明我們沒有感染新冠病毒。

第三步,負責采集拭子的醫護人員會將采集到的樣本先放進密封的袋子,再裝進帶有“病原微生物檢測樣本”“送檢專用”標志的密封生物運輸手提箱中,由身著防護服的專人負責,乘坐封閉隔離的專車,按照規定的路線,在規定的時間內將樣本送到檢測機構。

這樣嚴格操作的原因是,核酸樣本具有比較復雜的分子結構,對溫度非常敏感。假如在運輸過程中環境條件不符合要求,就可能導致樣本喪失活性,那樣拭子就白采集了。

另外,核酸樣本是高風險樣本,如果在轉運環節發生泄漏、污染等現象,會嚴重威脅醫護人員的生命健康。

送檢的步驟環環相扣,最后,核酸樣本會被送到特定的核酸檢測機構。到達檢測機構/方艙實驗室后,醫護人員會先對轉運箱進行噴灑消毒,再對里面的標本密封袋進行終末消毒,然后拆開密封袋,將樣本試管按順序取出,上架排好,錄入所有試管信息。

接下來,就是發生在實驗室中的核酸檢測工作。

核酸檢測是一項高度靈敏且精密的實驗,每一個方艙都是專門為核酸檢測建立的,符合特殊的環境要求。核酸樣本的檢測基本上全程都需要由檢測人員手工操作。

第一步,就是將核酸樣本中的病毒遺傳物質(核糖核酸)提取出來。檢驗人員需要戴著雙層乳膠手套,從生物安全柜上謹慎地吸取樣本,然后將其加入核酸提取板孔中,再將核酸樣本安全地放回原處。

在這一過程中,檢驗人員與新冠病毒可能只隔著兩層手套的距離——2毫米。

第二步就到了標本擴增環節。簡單來說,擴增的原理就是讓病毒中的遺傳物質快速以指數倍增長,一個變兩個,兩個變四個,四個變八個……直到百萬甚至百億倍。

這樣做的目的是讓標本中可能存在的病毒含量增多,從而可以更容易地檢測到新冠病毒。

擴增過程需要通過PCR(polymerase chain reaction,聚合酶鏈反應)完成。PCR是20世紀80年代中期發展起來的一項體外核酸擴增技術,其發明者因此項技術在1993年被授予諾貝爾獎。

第三步就是將擴增后的PCR產物,即DNA片段放入專門的儀器中開始檢測。這里有一個關鍵指標是Ct值。Ct值指的是擴增循環次數。

因為病毒擴增時是以2的指數倍增長,在PCR循環中,隨著循環數增大,病毒數量也不斷增多,當Ct值達到檢測所需的最低值,并且反應體系中的RNA病毒數引發了熒光反應時,就可以判定為陽性。

簡單來說,Ct值越低,說明陽性越強;Ct值越高,說明陽性越弱。

根據國家衛健委最新發布的《新型冠狀病毒肺炎診療方案(試行第九版)》,新冠病毒感染陽性的判定標準是Ct值<35時熒光反應為陽性。

一般來說,核酸檢測的準確率可以達到95%以上。但是由于各種原因,檢測結果還是會出現假陽性的情況,所以初篩實驗室會向疾控中心報告“疑似陽性”,然后根據疾控中心的要求轉運原管標本以供復核。

核酸檢測過程到這里還沒有結束,檢測人員還需要對所有的擴增結果進行分析,例如同樣本檢測的陰陽性質控結果是否在控、基線設置及樣本結果是否正常等。

當陰陽性質控全部符合檢測要求時,檢測人員還需要排除樣本假陰性、假陽性的可能,同時對異常結果樣本及時進行復核,在所有結果都核對無誤后,最終報告才能上傳。

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