OPG、RANK、RANKL及血液學指標水平變化與股骨頭壞死的相關性研究*

李文茜，郭永昌，田亮玉，沈彩紅，馮小艷，張大鵬，郭家巧，曹玉舉

(鄭州中醫骨傷病醫院，河南 鄭州 450000)

股骨頭壞死(ONFH)是一種致殘率高的臨床常見骨科疑難性疾病[1]。骨保護素(OPG)和核因子κB受體活化因子(RANK)是腫瘤壞死因子-α受體超家族成員[2]。OPG、核因子κB受體活化因子配體(RANKL)、RANK信號在骨重建中具有重要作用，激活后促進破骨細胞分化，影響骨吸收[3]。RANKL與RANK結合使破骨前體細胞接收信號分子，促進破骨細胞分化。RANKL/OPG比值是評價骨健康與調節骨吸收平衡的重要杠桿指標[4]，其增加則增強骨質吸收，促進成骨細胞凋亡，使骨形成延遲。OPG能抑制破骨細胞分化和活性，延緩破骨前體細胞活化，維持骨代謝平衡[5]。據文獻報道，激素和酒精能誘導骨髓間充質干細胞分化為脂肪細胞而引起血脂代謝異常[6]。本研究探討了ONFH病因、中醫證型與OPG、RANKL、RANK、血液學指標的關系，尋找一種能判斷影響ONFH發生、發展和防治的方法，對早期診斷、治療及遠期療效的評定具有重要意義。

1 資料與方法

1.1資料

1.1.1一般資料 選取2019年7-12月鄭州中醫骨傷病醫院收治的ONFH 患者84例作為ONFH組，符合ONFH治療指南診斷標準[7]，通過X射線、MRI等影像檢查確診。其中男67例，女17例；年齡18～70歲，平均(43.33 ± 10.37)歲；青年(18～<40歲)32例(青年組)，中年(40～<60歲)47例(中年組)，老年(≥60歲)5例(老年組)；病因：激素性14例(激素組)，酒精性44例(酒精組)，特發性21例(特發組)，創傷性5例(創傷組)；肝腎虧虛證36例(肝腎虧虛組)，濕熱蘊結證48例(濕熱蘊結組)。選取同期健康體檢者81例作為對照組，其中男55例，女26例；平均年齡(41.19±11.96)歲。ONFH組患者性別、年齡等一般資料與對照組比較，差異均無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。見表1。本研究經鄭州中醫骨傷病醫院倫理委員會審批(審批號：20190702)。

表1 ONFH組和對照組一般資料比較

1.1.2中醫證型標準 參照國家中醫藥管理局制定的1994年版《中醫病證診斷療效標準》[8]和國家藥品監督管理局2002年編寫的《中藥新藥臨床研究指導原則(試行)》[9]，初步擬定中醫證候診斷標準：(1)肝腎虧虛證。癥見髖部隱痛，腰膝酸軟，行走乏力，伴或不伴心煩失眠、口苦咽干、面色潮紅，關節活動受限、腹股溝區壓痛等，舌紅，苔白或黃，脈細數為腎虛血瘀之象。(2)濕熱蘊結證。濕熱內蘊所致的癥候，證見脘腹脹悶、口渴少飲、嘔惡納呆、肢體困重、便溏不爽等，舌苔黃膩。

1.1.3排除標準 (1)合并其他大關節病變者；(2)合并高血壓、糖尿病、冠心病等慢性疾病者；(3)妊娠或哺乳期婦女；(4)嚴重肝、腎功能損傷者。

1.1.4主要試劑及設備 OPG、RANK、RANKL試劑盒(南京卡米洛生物工程有限公司，批號：H-KMLJ37638，H-KMLJ386111，H-KMLJ36021)，全自動生化分析儀(AU680，Beckman Coulter，Japan)，酶標儀(Multiskan FC，Thermo，USA)等。

1.2方法

1.2.1OPG、RANK、RANKL和血液學指標檢測 血液標本取ONFH組和對照組研究對象晨間肘靜脈血。迅速送至鄭州中醫骨傷病醫院檢驗科分析凝血4項[包括凝血酶原時間(PT)、活化部分凝血活酶時間(APTT)、凝血酶時間(TT)、纖維蛋白原(Fg)]和血脂6項[包括總膽固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)、載脂蛋白A(ApoA)和載脂蛋白B(ApoB)]。采用酶聯免疫吸附測定法檢測血清OPG、RANK、RANKL等，操作均嚴格按儀器和試劑盒說明書進行。

1.2.2觀察指標 觀察各組研究對象OPG、RANK、RANKL及血液學指標，并分析OPG、RANK、RANKL及血液學指標與ONFH、中醫證型的相關性。

2 結 果

2.1ONFH組和對照組患者OPG、RANK、RANKL和血液學指標比較 與對照組比較，ONFH組患者血清OPG水平明顯降低，RANK、RANKL水平，以及RANKL/OPG比值均明顯增加，TC、TG、LDL ApoB水平明顯升高，ApoA、HDL水平均明顯降低，差異均有統計學意義(P<0.05)。見表2。

表2 ONFH組和對照組患者OPG、RANK、RANKL和血液學指標比較

2.2不同年齡ONFH組患者OPG、RANK、RANKL和血液學指標比較 84例ONFH患者中青年人占55.95%(32/81)，老年人占6.17%(5/81)。中年組患者RANKL/OPG比值明顯高于老年組，青年、中年組患者LDL、ApoB水平及APTT均明顯低于老年組，差異均有統計學意義(P<0.05)。見表3。

表3 不同年齡ONFH組患者OPG、RANK、RANKL和血液學指標比較

2.3不同病因ONFH組患者OPG、RANK、RANKL和血液學指標比較 酒精組患者RANK、RANKL、OPG水平明顯高于創傷組，RANK水平明顯高于激素組，激素組、酒精組和特發組患者APTT、PT、TT均明顯高于創傷組，差異均有統計學意義(P<0.05)。見表4。

表4 不同病因ONFH組患者OPG、RANK、RANKL和血液學指標比較

2.4不同中醫證型ONFH組患者OPG、RANK、RANKL和血液學指標比較 濕熱蘊結組患者RANKL水平明顯高于肝腎虧虛組，差異有統計學意義(P<0.05)；肝腎虧虛證組患者血液學指標與溫熱蘊結組比較，差異均無統計學意義(P>0.05)。見表5。

表5 不同中醫證型ONFH組患者OPG、RANK、RANKL和血液學指標比較

續表5 不同中醫證型ONFH組患者OPG、RANK、RANKL和血液學指標比較

3 討 論

ONFH是一種臨床常見的骨科疾病。RANK、RANKL、OPG是控制成骨細胞和破骨細胞分化和活性的關鍵調節機制[10]。由于激素使用不當、長期大量飲酒和原發性因素引起股骨頭內血液循環障礙，最終導致髖關節功能受損和殘疾[11]。在此基礎上引起血脂代謝紊亂，使體內脂肪分解，血液中游離脂肪酸增多，血管內皮受損，激活血管內凝血機制形成血栓，造成股骨頭動脈灌注不足，靜脈回流障礙，導致股骨頭缺血、壞死[12]。有研究表明，酒精性ONFH患者LDL、ApoB增高而HLD、ApoA較低。

本研究結果顯示，ONFH組患者RANK、RANKL、OPG水平及RANKL/OPG值，TC、TG、HDL、LDL、ApoA、ApoB水平與對照組比較，差異均有統計學意義(P<0.05)。ONFH組的老年組患者RANKL/OPG比值最低，而LDL、ApoB、APTT較高，差異均有統計學意義(P<0.05)，表明影響了血脂和凝血功能。ONFH組的酒精組患者與創傷組比較，差異均有統計學意義(P<0.05)，表明酒精可引起RANK、RANKL、OPG改變。酒精和激素可引起凝血指標即PT、TT、APTT、Fg改變。ONFH組的濕熱蘊結組患者RANKL水平明顯升高，差異有統計學意義(P<0.05)。

ONFH患者血管內脂肪栓子形成和血管外脂肪組織蓄積均有可能導致血流學改變，血管損傷是由于在高凝狀態下凝血障礙導致血管閉塞。ONFH患者脂質代謝異常是一個重要的危險因素，自身免疫性疾病或炎性疾病患者長期應用糖皮質激素的血脂水平與對照組存在明顯差異。本研究結果顯示，酒精對RANK、RANKL、OPG、RANKL/OPG比值影響較為顯著，激素和酒精能觸發血管內凝血機制，導致ONFH，在治療過程中應關注此項指標。肝腎虧虛證和濕熱蘊結癥患者RANK、RANKL、OPG、RANKL/OPG信號、血脂代謝過程影響不大，可不作為參考指標。在后期的研究中將RANK、RANKL、OPG、RANKL/OPG信號及凝血4項異常指標作為微觀生物標記，為深入的臨床療效評價提供客觀依據。