血清FABP4、RBP4及IL-22在乳腺癌患者中的表達及對預后的預測價值*

高曉培，任冠穎，高 飛，郄 帥，洪 丹，楊 琳

1.河北省保定市第一中心醫院放療科，河北保定 071000；2.河北大學附屬醫院腫瘤內科，河北保定 071000；3.河北大學附屬醫院放療科，河北保定 071000

乳腺癌是世界上發病率最高的女性惡性腫瘤，是威脅女性生命健康的主要殺手，乳腺癌治療手段多樣，主要包括乳腺癌根治術、化療、放療、靶向治療等，但經治療后，依舊有較多患者出現腫瘤復發。準確預測乳腺癌患者治療后復發的風險，在乳腺癌臨床治療中具有重要的意義。血清學指標具有檢測方便，價格低廉的優勢，檢測乳腺癌特異性血清標志物能夠動態觀察乳腺癌患者病情變化，預測其發展趨勢，在乳腺癌預后評估中具有良好應用價值[1-2]。血清轉脂蛋白4(FABP4)是一種低分子量胞質蛋白，能調控脂類生成及降解，參與細胞內脂肪酸轉運與代謝，也是脂肪細胞終末分化的標志物[3]，周蘭等[4]研究發現，FABP4在乳腺浸潤性導管癌中的表達水平與其淋巴結轉移及腫瘤大小有關，提示FABP4可能與乳腺癌侵襲轉移相關。視黃醇結合蛋白4(RBP4)是一種新型的脂肪源性細胞因子，RBP4與冠心病、非酒精性脂肪肝等疾病有關，此外，高偉聰等[5]研究表明，RBP4是影響婦科惡性腫瘤患者預后的獨立危險因素。白細胞介素-22(IL-22)是一種致炎因子，參與免疫性疾病的發生及發展，韓丕華等[6]報道，血清IL-22水平可預測乳腺癌患者新輔助治療后的療效。但目前，尚無研究報道關于FABP4、RBP4及IL-22聯合應用在預測乳腺癌患者預后中的價值。本研究擬探討血清FABP4、RBP4及IL-22在乳腺癌患者中的表達及對預后的預測價值，現報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2017年11月至2018年2月于保定市第一中心醫院經病理學檢查確診的40例乳腺癌患者為觀察組，30例經病理檢查確診為乳腺良性病變患者為良性組，20例健康體檢合格的同齡女性為對照組。納入標準：觀察組及良性組患者經影像學、病理學及臨床檢查確診為乳腺癌或良性乳腺病變；觀察組患者參與研究前無任何抗腫瘤相關治療；所有研究對象近3個月內無急性感染，近6個月未使用激素類藥物治療。排除標準：排除合并嚴重心、肝、腎等重要臟器功能障礙者；合并免疫性疾病、內分泌代謝性疾病者。觀察組年齡35～54歲，平均(46.33±12.66)歲；腫瘤最大徑在2～12 cm，平均(5.47±2.03)cm，臨床分期：Ⅰ期7例，Ⅱ期12例，Ⅲ期11例，Ⅳ期10例；有淋巴轉移者16例，無淋巴轉移者24例。良性組年齡33～54歲，平均(45.65±11.37)歲；病理檢查證實均為乳腺纖維腺瘤。對照組年齡32～55歲，平均(47.11±12.36)歲。本研究經該院醫學倫理委員會批準，所有研究對象均知情且同意。

1.2方法

1.2.1標本采集與處理 所有研究對象于入組第2天清晨，采集其外周靜脈血6 mL，收集與干燥無菌的試管內，3 000 r/min高速離心15 min，分離上層血清，置于-80 ℃冰箱內保存待用。

1.2.2血清FABP4、RBP4及IL-22檢測 采用酶聯免疫吸附試驗(ELISA)檢測血清FABP4水平，試劑盒購自美國R&D公司。采用ELISA法檢測血清RBP4水平，試劑盒購自美國ADL公司。采用ELISA法檢測血清IL-22水平，試劑盒購自武漢elabscience公司。

1.2.3乳腺癌病理資料收集 乳腺癌患者病理資料來源于該院病理科會診，其中雌激素受體(ER)、孕激素受體(PR)、人類表皮生長因子2(HER-2)、Ki-67狀態通過免疫組化法判定，ER、PR陰性標準為<1%，HER-2陰性定義為熒光原位雜交HER-2基因無擴增。

1.2.4預后統計 觀察組患者接受乳腺癌根治術，并在術后進行局部化療，隨訪1年，統計觀察組患者乳腺癌復發狀況，術后復發根據患者臨床癥狀、影像學檢查、實驗室檢查及病理學檢查判斷。分析乳腺癌不同預后患者治療后血清FABP4、RBP4及IL-22水平，并繪制受試者工作特征(ROC)曲線，分析血清FABP4，RBP4及IL-22在預測乳腺癌患者預后中的價值。

2 結 果

2.13組血清FABP4、RBP4、IL-22水平比較 觀察組、良性組及對照組血清FABP4、RBP4、IL-22水平比較，差異有統計學意義(P<0.05)，其中觀察組及良性組患者血清FABP4、RBP4、IL-22水平均高于對照組(P<0.05)，且觀察組血清FABP4、RBP4、IL-22水平均高于良性組(P<0.05)。見表1。

表1 3組血清FABP4，RBP4、IL-22水平比較

2.2血清FABP4、RBP4、IL-22水平與乳腺癌患者病理特征間的關系 結果顯示，乳腺癌患者血清FABP4、RBP4水平與腫瘤最大徑及淋巴結轉移有關(P<0.05)，IL-22水平與腫瘤最大徑、淋巴結轉移、病理分級有關(P<0.05)。見表2。

表2 血清FABP4、RBP4、IL-22水平與乳腺癌患者病理特征間的關系

續表2 血清FABP4、RBP4、IL-22水平與乳腺癌患者病理特征間的關系

2.3乳腺癌不同預后患者治療后血清FABP4、RBP4、IL-22水平比較 隨訪1年，共14例患者乳腺癌復發，納為預后不良組，比較發現，預后不良組乳腺癌患者血清FABP4、RBP4、IL-22水平均高于預后良好組(P<0.05)。見表3。

表3 乳腺癌不同預后患者治療后血清FABP4、RBP4、IL-22水平比較

2.4血清FABP4，RBP4、IL-22水平在預測乳腺癌患者復發中的價值分析 血清FABP4、RBP4、IL-22單獨預測乳腺癌患者復發時，IL-22預測效能最高，曲線下面積(AUC)為0.828，而3種指標聯合檢測能提高預測效能，聯合檢測的AUC為0.909，95%CI0.813～1.000。見表4。

表4 血清FABP4、RBP4及IL-22水平在預測乳腺癌患者復發中的價值分析

圖1 血清FABP4、RBP4及IL-22在預測乳腺癌患者復發中的價值分析

3 討 論

乳腺癌是目前患病率最高的女性惡性腫瘤，積極探究乳腺癌致病機制，預測乳腺癌患者預后狀況，在臨床乳腺癌的治療中具有重要意義。由于血清指標具有檢測方便簡單的優勢，在動態觀察患者病情變化及治療效果中具有良好的應用價值。乳腺癌的常見血清腫瘤標志物有CEA、CA125、CA15-3等，但以上指標水平常受到炎癥、感染、藥物等因素的影響，在反映乳腺癌患者病情及預后中缺乏特異性，檢測假陽性率較高[7-8]。本研究分析發現，乳腺癌患者血清FABP4、RBP4及IL-22水平高于乳腺良性病變者及體檢健康者，提示以上指標可能在診斷乳腺癌中具有一定效能。

其中FABP4是一種脂肪細胞因子，占成熟脂肪細胞可溶性蛋白總量的6%，在健康者血循環中水平較高。目前研究發現，FABP4與代謝性疾病相關，隨著研究的不斷深入，FABP4與炎癥反應也存在密切關系[9-11]。毛英等[12]研究發現，乳腺癌轉移灶組織內FABP4表達水平明顯高于原位癌，且利用體外細胞實驗發現，當敲低MDA-MB-231細胞的FABP4后，細胞的侵襲轉移能力明顯降低，推測FABP4可能增加乳腺癌細胞侵襲轉移能力，促進乳腺癌發展。本研究發現，腫瘤最大徑及淋巴結轉移可影響乳腺癌患者血清FABP4的水平，與上述研究結果相似[12]，提示FABP4可有效反映乳腺癌轉移及侵襲狀況。

癌癥具有相似的致病機制，田佳勛等[13]研究發現，卵巢癌患者初始治療后血清RBP4水平是影響卵巢癌患者預后的獨立因素。本研究發現，乳腺癌患者血清RBP4水平高于乳腺良性病變者及體檢健康者，且乳腺癌患者血清RBP4水平與腫瘤最大徑及淋巴結轉移有關。提示RBP4可能與乳腺癌也存在一定的關系。

IL-22是常見的致炎癥因子，韓婷等[14]研究發現，胰腺癌組織內IL-22高表達是胰腺癌患者不良預后的獨立危險因素，提示IL-22可能成為胰腺癌患者預后判斷的有效指標。周興珍等[15]利用體外實驗發現，IL-22可誘導卵巢癌細胞系SKOV3細胞分泌趨化因子，進而調控濾泡輔助性T細胞趨化，參與卵巢癌進展。本研究發現，乳腺癌患者血清IL-22水平高于乳腺良性病變者及體檢健康者，且乳腺癌患者血清IL-22水平與腫瘤最大徑、淋巴結轉移及病理分級有關，提示血清IL-22在反映乳腺癌患者病情中也具有一定的效能。

隨訪1年，40例乳腺癌患者經治療后，共14例癌癥復發，比較兩組治療后血清FABP4、RBP4及IL-22水平發現，術后復發者血清FABP4、RBP4及IL-22水平明顯高于未復發者，血清FABP4、RBP4及IL-22在預測乳腺癌患者預后中均具有一定的效能，其中IL-22預測效能最高，而三者聯合應用可有效提高乳腺癌患者預后的預測價值。

綜上所述，乳腺癌患者血清FABP4、RBP4及IL-22水平異常升高，且與患者腫瘤最大徑及淋巴結轉移有關，三者聯合應用可有效預測乳腺癌復發。