桂西地區代謝綜合征人群亞甲基四氫葉酸還原酶基因的分布特點

鄧富鴻，梁慶祝，李曉蕾，陳鳳華，韋必曉，陳秀林，谷梅金，李 雪

（百色市人民醫院，廣西 百色 533000）

代謝綜合征（MS）是指人體的蛋白質、脂肪、糖等物質出現代謝紊亂的一組復雜癥候群。Lu等[1]報道，我國MS 的發病率為33.9% ，我國目前約有4.5 億人患有MS。MS 是碳水化合物、脂肪、蛋白質等多種代謝紊亂在同一個體的集合，其重要組成部分為腹型肥胖、糖調節受損（或糖尿病）、血脂異常及高血壓。MS 是復雜的遺傳因素、環境因素相互作用的結果。MTHFR 是同型半胱氨酸（Hcy）和葉酸代謝過程中的關鍵酶，編碼MTHFR 的基因，存在多種突變，其中最常見的突變為C677T 基因多態性（MTHFR 677 位點CC 型為野生型，CT 型為雜合型，TT 型為純合型）。MTHFR 基因C677T 突變可導致酶的活性及耐熱性下降，影響DNA 甲基化和核酸的穩定性[2]。酶活性的降低可干擾Hcy 的甲基化途徑，使血漿Hcy 的水平升高，引起高Hcy 血癥，誘發脂肪等組織出現胰島素抵抗[3-4]。孫紅等[5]研究表明，MTHFR 基因C677T 突變是中國南方人MS 的主要預測因子。MTHFR 基因C677T 點突變，其頻率分布受人種、地域等因素的影響較大[6]，其多態性在國內外的研究中尚存在爭議。目前，對于桂西地區MS 人群MTHFR 基因多態性分布的研究報道較少。本研究旨在探討桂西地區MS 人群MTHFR 基因的分布特點。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取桂西地區的680 例MS 患者（其中壯族362 人、漢族318 人）和1038 例健康人（其中壯族683 人、漢族355 人）作為研究對象，其年齡為21 ～83 歲。將其中680 例MS 患者設為MS 組，將其中1038 例健康人設為對照組。所有研究對象均為在本地區居住5 年以上的三代純正壯族人和三代純正漢族人。MS 的診斷標準，沿用2017 年中華醫學會糖尿病學分會制定的《中國2 型糖尿病防治指南建議》的診斷標準：1）腹型肥胖：腰圍，男性＞90 cm，女性＞85 cm。2）高血糖：空腹血糖＞6.1 mmol/L，或糖負荷后2 h 血糖＞7.8 mmol/L 和（或）已確診患糖尿病并接受治療者。3）高血壓：血壓＞130 mmHg（收縮壓）/85 mmHg（舒張壓） （l mmHg=0.133 kPa）或已確診患高血壓并接受治療者。4）空腹血清高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）＜1.04 mmol/L。5）空腹血清甘油三酯＞1.70 mmol/L。符合以上3 項或3 項以上標準即可診斷為MS[7]。對照組健康人的納入標準是：其年齡、性別、工作、生活環境等背景特征與MS組患者相匹配；為在我院體檢中心進行體檢的健康成年人。其排除標準是：存在可導致核酸代謝亢進的因素（如甲狀腺功能亢進癥、血液系統疾病或肝功能異常）；患有惡性腫瘤且正在接受化療或放療；合并有繼發性糖尿病或繼發性高血壓。

1.2 方法

1.2.1 臨床資料的收集 收集兩組研究對象的性別、年齡、姓名、民族等信息，詳細詢問其既往史、家族史、有無異族通婚史、近期有無服藥情況等，測量其清晨空腹狀態下的血壓、體重、腰圍、身高。

1.2.2 生化指標檢測 采用日立7600-020E 全自動生化分析儀檢測兩組研究對象清晨空腹狀態下血清甘油三酯、HDL-C、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）、總膽固醇和空腹血糖的水平。

1.2.3 MTHFR 基因C677T 多態性的檢測 采集兩組研究對象在空腹狀態下的靜脈血，采用PCRRFLP 法檢測MTHFR 基因C677T 位點的基因型。檢測所用的試劑盒為人全血DNA 試劑盒（編號：YZB/ 國2671-2015 ；生產廠家：深圳泰樂德醫療有限公司）。具體的檢測操作由我院檢驗科完成。擴增反應完畢后，通過所收集的熒光信號，對檢測結果逐一進行分析，將Y 軸設定為FAM 信號（代表基因型T），將X 軸設定為VIC 信號（代表基因型C）。在基因分型圖上，靠近原點處樣品為NTC，靠近X 軸樣品為CC 基因型，對角線位置樣品為CT 基因型，靠近Y 軸樣品為TT 基因型。

1.3 觀察指標

比較兩組研究對象的各項臨床指標（包括年齡、腹圍、收縮壓、舒張壓）和生化指標（包括血清肌酐、空腹血糖、血清總膽固醇、血清甘油三酯、血清LDL-C、血清HDL-C 和血清Hcy）。比較兩組研究對象MTHFR 基因型及等位基因的分布情況。

1.4 統計學方法

運用Hardy-Weinberg 平衡法檢驗樣本的群體代表性，采用基因計數法計算各組基因型、等位基因頻率。用SPSS 17.0 軟件處理本研究中的數據，非正態分布的計量資料用中位數（四分位數間距）表示，正態分布的計量資料用均數± 標準差（±s）表示，各組間計量資料的比較均采用t檢驗；計數資料用% 表示，用χ2 檢驗，P＜0.05 表示差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組研究對象各項臨床指標、生化指標的比較

MS 組患者血清肌酐的平均水平為（87.13±43.83）μmol/L，對照組健康人血清肌酐的平均水平為（84.84±14.55）μmol/L，二者相比差異無統計學意義（P＞0.05）。MS 組患者的年齡、腹圍、舒張壓、收縮壓、血清總膽固醇、甘油三酯、LDL-C、HDL-C、Hcy 及空腹血糖的水平與對照組健康人相比，差異均有統計學意義（P＜0.05）。詳見表1。

表1 兩組研究對象各項臨床指標、生化指標的比較（±s）

表1 兩組研究對象各項臨床指標、生化指標的比較（±s）

項目 MS 組（n=680） 對照組（n=1038） t 值 P 值年齡（歲） 45.40±12.20 38.87±11.67 -11.1 ＜0.01腹圍（cm） 93.80±2.97 83.90±2.97 -67.7 ＜0.01血清肌酐（μmol/L） 87.13±43.83 84.84±14.55 -1.32 0.19收縮壓（mmHg） 138.42±17.62 118.28±8.92 -27.6 ＜0.01舒張壓（mmHg） 89.03±35.71 75.58±7.40 -9.68 ＜0.01空腹血糖（mmol/L） 6.36±2.42 5.11±0.41 -13.3 ＜0.01血清總膽固醇（mmol/L） 5.44±1.19 4.88±0.91 -10.4 ＜0.01血清甘油三酯（mmol/L） 3.18±2.48 1.08±0.32 -22.0 ＜0.01血清LDL-C（mmol/L） 3.15±2.82 2.85±0.81 -3.31 ＜0.01血清HDL-C（mmol/L） 1.25±0.76 1.49±0.38 8.55 ＜0.01血清Hcy（μmol/） 14.63±5.32 12.60±2.97 -9.07 ＜0.01

2.2 兩組研究對象MTHFR 基因型及等位基因分布情況的比較

在MS 組 患 者 中，MTHFR 基 因C677T 位 點為CC 基因型的患者有381 例（占56.0%），為CT 基因型的患者有253 例（占37.2%），為TT 基因型的患者有46 例（占6.8%）；在對照組健康人中，MTHFR 基因C677T 位點為CC 基因型的患者有739 例（占71.2%），為CT 基因型的患者有254 例（占24.5%），為TT 基因型的患者有45 例（占4.3%）。兩組研究對象MTHFR 基因C677T 位點基因型和等位基因的分布相比，差異有統計學意義（χ2=41.65，P＜0.05；χ2=39.67，P＜0.05）。詳見表2。

表2 兩組研究對象MTHFR 基因型及等位基因分布情況的比較[ 例（%）]

3 討論

MS 是一種多基因遺傳性疾病，其發生發展與遺傳因素、環境因素關系密切。在引起MS 的危險因素中，高血壓、肥胖、脂代謝紊亂、糖代謝紊亂及胰島素抵抗等因素均存在大量的基因多態性，這些基因多態性在MS 中發揮著至關重要的作用。孫紅等[5]研究顯示，舒張壓、收縮壓、腰臀比、腰圍、甘油三酯、LDL-C、血尿酸、空腹血糖在非MS 組和MS 組患者間有統計學差異（P＜0.05）。唐偉等[8]研究顯示，非MS 組與MS 組兩組患者間的C677T 位點基因型、等位基因頻率相比差異有統計學意義（P＜0.05）。Golledge 等[9]對土耳其MS 患者（n=78）和正常對照組人群（n=100）進行研究發現，在MS 組患者中，MTHFR 基因C677T 的突變頻率較正常對照組人群高。本研究表明，MS 組患者的年齡、腹圍、收縮壓、舒張壓、血清總膽固醇、甘油三酯、HDL-C、LDL-C、Hcy 和空腹血糖的水平與對照組健康人相比，差異均有統計學意義（P＜0.05）。兩組研究對象MTHFR基因C677T 位點基因型、等位基因的分布比較，差異有統計學意義（P＜0.05）。隨著基因組學和個體化醫學的發展，一些研究者發現基因不僅決定個體的遺傳特征，基因缺陷也可遺傳，能導致一個家族或種族對某種疾病出現易感性。桂西地區的常住居民以壯族、漢族人群為主，相同的生活習性、生活環境，民族間長期文化與思想的融合，使得壯、漢兩民族間具有相似的飲食結構。對該地區居民進行MTHFR 基因檢測有助于了解攜帶MS 易感基因人群的分布情況，從而對MS 易感人群實施有針對性的干預，降低MS 的發病率，也為MS 的治療提供堅實的理論基礎，并開創出新的思路。

綜上所述， 桂西地區MS 人群多攜帶有MTHFR 基因C677T 位點的CT/TT 基因型。