商品化甲氧芐啶膠體金快檢試劑盒檢測效果 評價與分析

葉雅真，駱和東,2*

（1.廈門市食品藥品質(zhì)量檢驗研究院，福建廈門 361012；2.睿科集團（廈門）股份有限公司，福建廈門 361015）

甲氧芐啶（Trimethoprim，TMP）是一種抗菌增效劑，在獸醫(yī)臨床常與磺胺類藥物或其他抗生素聯(lián)合使用，用于治療雞白痢、禽霍亂、呼吸道繼發(fā)性細菌感染等，以降低抗菌藥用量、增強抗菌藥療效、降低抗菌藥殘留及減少細菌對抗菌藥的耐藥性[1-3]。甲氧芐啶的廣泛使用和不合理用藥使動物性食品中存在藥物殘留，從而威脅人體健康。為了更有效地開展甲氧芐啶殘留的快檢監(jiān)控工作，確保食品安全[4]。本文面向社會廣泛征集符合評價驗證方案要求的快檢產(chǎn)品生產(chǎn)企業(yè)，參加評價驗證，組建專家組對各品牌快檢產(chǎn)品生產(chǎn)企業(yè)科研能力等技術(shù)實力進行資格審查，擇優(yōu)篩選出5個品牌快檢產(chǎn)品進入檢測能力方面的現(xiàn)場質(zhì)量評價環(huán)節(jié)。通過統(tǒng)一制備盲樣，由企業(yè)實驗人員自行快檢實驗操作的方式，對這5個品牌商品化甲氧芐啶膠體金試劑盒產(chǎn)品進行統(tǒng)一的現(xiàn)場質(zhì)量評價。本文擬對這5個品牌試劑盒產(chǎn)品的假陰性率、假陽性率、相對準確度等性能指標進行考察，為確定動物源性食品中甲氧芐啶的快速檢測方法的研究方向提供科學依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

本次評價實驗使用的甲氧芐啶快速檢測試劑盒由各品牌生產(chǎn)企業(yè)自行準備。

1.2 實驗方法

依據(jù)《食品快速檢測方法評價技術(shù)規(guī)范》（食藥監(jiān)辦科[2017]43號）[5]和《關(guān)于規(guī)范使用食品快速檢測的意見》（征求意見稿）[6]制定評價方案。《食品安全國家標準 食品中獸藥最大殘留限量》 （GB 31650—2019）對家禽中肌肉靶組織的最大殘留限量為50 μg/kg。因此，本文考察試劑盒對甲氧芐啶的檢測限要求為50 μg/kg，并根據(jù)《食品快速檢測方法評價技術(shù)規(guī)范》設(shè)定試劑盒質(zhì)量評價性能指標考察要求為假陰性率應(yīng)≤5%，假陽性率應(yīng)≤15%。每家企業(yè)盲樣數(shù)均為50份，其中陽性樣和陰性樣均為20～30份。各企業(yè)自行準備參加評價驗證所必需的食品快檢設(shè)備、輔助設(shè)備、試劑及實驗耗材，由企業(yè)實驗人員自行進行快檢實驗操作、出具快檢結(jié)果。對所有快檢結(jié)果進行匯總分析，統(tǒng)計各品牌甲氧芐啶試劑盒產(chǎn)品的假陰性率、假陽性率、相對準確度等指標。

2 結(jié)果與分析

為避免對企業(yè)造成影響，對試劑盒品牌進行編號表示，分別為A品牌、B品牌、C品牌、D品牌和E品牌，質(zhì)量評價結(jié)果見表1和表2。質(zhì)量評價結(jié)果顯示，5個品牌產(chǎn)品的假陰性率在9.1%～25.0%，均不符合規(guī)定的假陰性率應(yīng)≤5%的考察要求，其中A品牌、B品牌和E品牌產(chǎn)品假陰性率較高，漏檢風險較高；5個品牌產(chǎn)品的假陽性率在0%～10.0%，均符合規(guī)定的假陽性率應(yīng)≤15%的考察要求。

表1 質(zhì)量評價結(jié)果匯總

表2 質(zhì)量評價結(jié)果統(tǒng)計

A品牌試劑盒質(zhì)量評價結(jié)果所示，A品牌試劑盒在0.5倍檢測限未出現(xiàn)假陽性，對空白基質(zhì)的快檢結(jié)果假陽性率卻高達12.0%，而且對1倍檢測限的假陰性率高達25.0%，漏檢率是5個品牌中最高的，快檢結(jié)果相對準確度只有84.0%，是5個品牌試劑盒快檢結(jié)果相對準確度中最低的。通過查閱各品牌試劑盒產(chǎn)品說明書，發(fā)現(xiàn)在5個品牌中，只有A品牌試劑盒為消線法膠體金快檢產(chǎn)品，其余4個品牌的判定方式均為檢測線（T線）與控制線（C線）比色法。經(jīng)過市場調(diào)研發(fā)現(xiàn)，甲氧芐啶消線法膠體金試劑盒品牌極少，只調(diào)研到2家。根據(jù)試劑盒產(chǎn)品說明書，A品牌適用于雞肌肉靶組織的檢測，另一個品牌適用基質(zhì)為血清。A品牌試劑盒產(chǎn)品的質(zhì)量評價結(jié)果，假陽性率高可能是受甲氧芐啶的消線法膠體金快檢技術(shù)的技術(shù)瓶頸影響，或是A品牌試劑盒產(chǎn)品的生產(chǎn)工藝問題所導致。

B品牌、C品牌、D品牌和E品牌試劑盒假陰性率分別為19.0%、11.1%、9.1%和19.2%，B品牌和D品牌假陽性率分別為3.4%和7.1%，C品牌和E品牌未出現(xiàn)假陽性情況。結(jié)果顯示，4個品牌試劑盒都存在不同程度的漏檢風險，假陰性率均不符合考察要求的≤5%，試劑盒產(chǎn)品的實際檢測靈敏度均不夠，應(yīng)該對產(chǎn)品進行優(yōu)化，降低各品牌產(chǎn)品的實際檢測限，以降低產(chǎn)品假陰性率。

3 結(jié)論

膠體金快檢試劑盒最理想的檢測效果是0和0.5倍檢測限的快檢結(jié)果為明顯的陰性（T線顏色明顯深于C線顏色），1倍及以上檢測限的快檢結(jié)果為強陽性（T線顏色明顯淺于C線顏色，甚至T線幾乎不顯色）。在試劑盒質(zhì)量評價現(xiàn)場觀察到，雖然B品牌試劑盒產(chǎn)品的絕對靈敏度最高，但是對空白基質(zhì)的快檢，B品牌試劑盒的快檢結(jié)果為比較弱的陰性（T線顏色略深于C線顏色），試劑盒對0.5倍檢測限和1倍檢測限的識別差異不大，0.5倍檢測限為弱陰性（T線顏色與C線顏色相當），1倍檢測限為比較弱的陽性（T線顏色略淺于C線顏色）。在降低產(chǎn)品實際檢測限后，試劑盒的假陽性率可能增高，增加誤檢風險。

因此，有必要進行快檢方法研究，對方法進行優(yōu)化，提高試劑盒產(chǎn)品實際檢測靈敏度，提高快檢準確度，確保試劑盒產(chǎn)品的快檢監(jiān)管效果。