雅安地區(qū)健康成人網(wǎng)織紅細胞參數(shù)參考區(qū)間的建立及驗證*

陳 濤，黃 滔，付立芳，鄭 悅，李曉芳，杜順錦，何 霞△

雅安市人民醫(yī)院：1.檢驗科；2.體檢中心，四川雅安 625000

隨著全自動血細胞分析儀的快速發(fā)展，血常規(guī)中一些新穎參數(shù)，如網(wǎng)織紅細胞(Ret)相關(guān)參數(shù)Ret絕對值(Ret#)、Ret百分比(Ret%)、Ret血紅蛋白含量(RET-He)、高熒光強度Ret比率(HFR)、中熒光強度Ret比率(MFR)、低熒光強度Ret比率(LFR)、未成熟Ret比率(IRF)的檢測和應(yīng)用也日漸廣泛。Ret是一種骨髓新釋放的尚未完全成熟的紅細胞，單位體積血液中Ret的數(shù)量可以評估骨髓紅細胞的生成情況，有助于分析貧血的發(fā)病機制[1]。目前，中國地區(qū)可見Ret參考范圍的研究多為單一區(qū)域研究，如韓啟福等[2]和胡衛(wèi)紅等[3]的研究，多數(shù)醫(yī)院參考區(qū)間來源于《全國臨床檢驗操作規(guī)程》、儀器廠家說明書、教科書、試劑廠家說明書等[4]。雅安屬中國西南地區(qū)的中小城市，目前鮮見該地區(qū)的Ret參考區(qū)間的研究，因此，筆者根據(jù)美國臨床實驗室標準協(xié)會C28-A3文件標準[5]，利用Sysmex XN-1000全自動血細胞分析儀對2 785例健康成人進行Ret計數(shù)及分群測定，探討Ret參數(shù)與年齡、性別的關(guān)系，初步建立雅安地區(qū)健康成人Ret相關(guān)參數(shù)的參考區(qū)間，以期為Ret在雅安地區(qū)的臨床應(yīng)用提供準確的實驗依據(jù)。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2018年9月至2020年9月雅安市人民醫(yī)院健康體檢者作為研究對象。納入標準：(1)長期生活于四川省雅安市；(2)白細胞計數(shù)(WBC)(3.5～9.5)×109/L ；(3)男性血紅蛋白(Hb)>120 g/L，女性Hb>110 g/L；(4)體質(zhì)量指數(shù)(BMI)≤24.0 kg/m2[6-8]。排除標準：(1)有腫瘤、血液病病史；(2)有吸煙、酗酒史；(3)女性在月經(jīng)期及妊娠期內(nèi)。最終符合條件的研究對象共2 785例，男1 561例，年齡21～91歲，女1 224例，年齡21～87歲。男女各分成3個年齡組，分別是>20～40歲組、>40～60歲組、>60歲組。

1.2儀器與試劑 Sysmex XN-1000全自動血細胞分析儀及配套試劑，儀器定期接受校準，本研究中涉及所有參數(shù)常年參加Sysmex全球在線質(zhì)控，成績良好。

1.3標本采集和檢測 采集受試者空腹靜脈血液2.0 mL，用乙二胺四乙酸二鉀(EDTA-K2)抗凝。檢測Ret 7項參數(shù)(Ret#、Ret%、Ret-He、HFR、MFR、LFR、IRF)。從采樣到檢測2 h內(nèi)完成。

2 結(jié) 果

2.1各年齡組間Ret參數(shù)的比較 不同年齡組間7項Ret參數(shù)比較，除Ret%和Ret-He差異無統(tǒng)計學(xué)意義外，其余參數(shù)比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。隨著年齡增長，Ret#、LFR降低，IRF、MFR、HFR增高(P<0.01)，其中Ret#的差異主要表現(xiàn)在>20～40歲組與>60歲組及>40～60歲組與>60歲組之間，其余參數(shù)的差異主要表現(xiàn)在>20～40歲組與>40～60歲組及>20～40歲組與>60歲組之間。分別比較成年男女不同年齡的Ret相關(guān)參數(shù)發(fā)現(xiàn)，隨年齡變化，Ret#的變化主要體現(xiàn)在成年男性中，其隨年齡增加而升高(P<0.01)。LFR、IRF、MFR、HFR的差異主要體現(xiàn)在成年女性中，LFR隨年齡增加而降低(P<0.01)，IRF、、MFR、HFR隨年齡增加而升高(P<0.01)。見表1～3。

表1 不同年齡組成人7項Ret參數(shù)比較[M(P25，P75)]

表2 不同年齡組成年男性7項Ret參數(shù)比較[M(P25，P75)]

表3 不同年齡組成年女性7項Ret參數(shù)比較[M(P25，P75)]

2.2各年齡組不同性別成人Ret各參數(shù)的比較 在>20～40歲組和>40～60歲組中，男女間均表現(xiàn)為除Ret%差異無統(tǒng)計學(xué)意義外，其余參數(shù)比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；其中，LFR為男性小于女性(P<0.01)，Ret#、IRF、MFR、HFR、Ret-He均表現(xiàn)為男性大于女性(P<0.01)。在>60歲組中，則表現(xiàn)為男女間僅Ret-He參數(shù)男性大于女性(P<0.01)，其余參數(shù)差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表4～6。

表4 ＞20～40歲不同性別成人Ret參數(shù)比較[M(P25，P75)]

表5 ＞40～60歲不同性別成人Ret參數(shù)比較[M(P25，P75)]

表6 ＞60歲不同性別成人Ret參數(shù)比較[M(P25，P75)]

2.4參考區(qū)間的驗證 選擇2020年5月5-15日來本院健康體檢者血常規(guī)標本40份，其中男20例，女20例,對上述參考范圍進行驗證，檢測結(jié)果全部落在所建立的參考區(qū)間范圍內(nèi)，驗證通過。

3 討 論

Ret相關(guān)參數(shù)對多種疾病的診斷、治療具有重要價值，包括評估腫瘤化療患者骨髓抑制和恢復(fù)情況、癌癥兒童缺鐵狀況、孕婦缺鐵狀況、炎癥性腸病兒童缺鐵情況、透析患者鐵代謝情況等[9-16]；尤其對貧血的鑒別診斷具有重要價值[17-19]；此外，Ret相關(guān)參數(shù)可監(jiān)測骨髓移植后的造血功能[20]。

但多項研究結(jié)果顯示，不同地區(qū)人群由于地理環(huán)境、生活方式等差異，Ret相關(guān)參數(shù)存在較大差異[21-26]，目前中國南方健康成人的Ret相關(guān)參數(shù)參考區(qū)間鮮有報道。本研究對雅安地區(qū)健康成人的Ret相關(guān)參數(shù)進行研究發(fā)現(xiàn)，Ret參數(shù)在不同年齡組之間存在差異，其中Ret#的差異主要體現(xiàn)在>20～40歲組、40～60歲組和>60歲組的男性之間，成年男性Ret#隨年齡增加而降低，考慮主要與老年男性雄激素的部分缺乏引起促紅細胞生成素分泌減少有關(guān)。而IRF、MFR、HFR的差異主要體現(xiàn)在>20～40歲組女性低于>40～60歲組和>60歲組的女性，相反，LFR表現(xiàn)為>20～40歲女性高于>40～60歲組和>60歲組的女性，考慮與女性月經(jīng)、內(nèi)分泌因素有關(guān)。但此結(jié)果與李小龍等[27]的研究結(jié)果恰好相反，考慮可能因地域和研究人群不同引起。

對同一年齡組不同性別之間的Ret相關(guān)參數(shù)分析發(fā)現(xiàn)，>20～40歲組和>40～60歲組的Ret#、IRF、MFR、HFR、Ret-He和LFR存在性別差異，其中Ret#、IRF、MFR、HFR、Ret-He表現(xiàn)為男性高于女性，LFR表現(xiàn)為男性低于女性，這與成年男性RBC和Hb參考范圍均高于女性是一致的，且與樂家新等[28]的研究結(jié)論也相同。考慮可能與在這個年齡段，男性雄性激素水平較高，而睪酮有促進紅細胞生成作用有關(guān)[29]，且男性運動量普遍大于女性，而運動能刺激骨髓造血功能增生活躍，從而促進RBC更新代謝[30]，而MFR、HFR、IRF正是反映機體RBC生成的靈敏指標，其值越高，說明RBC代謝越旺盛。>60歲組中，Ret相關(guān)參數(shù)僅表現(xiàn)為Ret-He男性大于女性(P<0.000 1)，其余Ret相關(guān)參數(shù)則表現(xiàn)為在性別之間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，這可能是因為隨男女性步入老年以后內(nèi)分泌生理因素、運動量在性別間的差異逐漸減小，因此Ret相關(guān)參數(shù)的差異也隨之消失。

此外，本研究結(jié)果顯示，Ret-He的成年男性[(26.3，37.2)pg]、成年女性[(24.1，36.1)pg]參考區(qū)間，與北京[31]成人男性[(29.25，33.83)pg]、成年女性[(29.25，33.83)pg]，以及深圳[32]成年男性[(32.96，39.28)pg]、成年女性[(31.11，36.99)pg]的參考區(qū)間有較大的差異，表現(xiàn)為參考區(qū)間下限值偏低，參考范圍變大，甚至和深圳[32]地區(qū)的缺鐵性貧血男性[(24.72±3.91)pg]、缺鐵性貧血女性[(22.63±3.76)pg]有較大重合部分，但高于汕頭[33]地區(qū)的缺鐵性貧血人群[16.70(14.32，19.70)pg]。這可能是因為本研究的人群為雅安地區(qū)人群，屬西南地區(qū)中小城市，而后者為北方、沿海等地，這充分說明了不同人群可能由于地理環(huán)境、生活方式及生理結(jié)構(gòu)等因素的差異而導(dǎo)致機體內(nèi)鐵含量的不同，從而導(dǎo)致不同人群Ret-He有所差異，甚至差異很大，因此建立不同地區(qū)實驗室的參考區(qū)間尤為重要。

綜上所述，Ret相關(guān)參數(shù)的參考區(qū)間因受地區(qū)、民族、性別、年齡、儀器等眾多種因素影響而不同，不同地區(qū)各實驗室應(yīng)根據(jù)本地區(qū)人群建立適合自己實驗室的參考區(qū)間，若是使用不適合本地區(qū)的Ret相關(guān)參數(shù)參考區(qū)間，極易造成臨床誤診。因此，設(shè)置區(qū)域化的Ret相關(guān)參數(shù)參考區(qū)間對臨床診斷和療效判斷十分必要。本研究按照年齡和性別分組初步建立雅安地區(qū)健康成人Ret相關(guān)參數(shù)參考區(qū)間，已在本實驗室驗證，驗證全部通過，可推廣至雅安甚至川西地區(qū)驗證使用。