VEGF、S-100P及clusterin在腱鞘巨細(xì)胞瘤中的表達(dá)情況及臨床意義

潘 媚,巫 娟,陳金蓉

1.四川省骨科醫(yī)院病理科,四川成都 610041;2.成都 416 醫(yī)院病理科,四川成都 610051

腱鞘巨細(xì)胞瘤是臨床較為常見的四肢腫物，其主要起源于腱鞘及肌腱之間的滑囊細(xì)胞，疾病進(jìn)展較為緩慢，多為良性[1]。有研究者將腱鞘巨細(xì)胞瘤作為炎性反應(yīng)性疾病[2]。而在2013年世界衛(wèi)生組織將其稱之為纖維組織細(xì)胞性腫瘤[3]。鈣結(jié)合蛋白100(S100P)通過對鈣離子依賴性信號通路的介導(dǎo)作用，影響腫瘤細(xì)胞的增殖與分化。血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)可通過調(diào)控局部病灶部位的腫瘤組織的新生血管，進(jìn)一步對腫瘤細(xì)胞的浸潤作用進(jìn)行調(diào)控[4]。叢生蛋白(clusterin)又名睪酮抑制性前列腺信使-2，其與惡性腫瘤疾病的相關(guān)研究較多，但是與腱鞘巨細(xì)胞瘤的研究較少[5]。本研究主要通過腱鞘巨細(xì)胞瘤的免疫組織化學(xué)法研究及VEGF、S-100P及clusterin的表達(dá)規(guī)律對患者病理類型的診斷進(jìn)行分析，為臨床診斷提供科學(xué)依據(jù)。

1 資料與方法

1.1一般資料 本研究為前瞻性研究，以2018年8月至2021年2月在四川省骨科醫(yī)院就診的腱鞘巨細(xì)胞瘤患者72例作為觀察組，其中男23例，女49例；年齡24～65歲，平均(40.00±11.14)歲；體質(zhì)量指數(shù)(24.85±2.69)kg/m2；手足關(guān)節(jié)部位29例，膝關(guān)節(jié)31例，踝關(guān)節(jié)12例；局限型51例，彌漫型21例；完整包膜29例，不完整包膜43例。另選擇同期成都 416 醫(yī)院行健康體檢的良性纖維病變者72例作為對照組，其中男27例，女45例；年齡24～65歲，平均(40.44±11.61)歲；體質(zhì)量指數(shù)(24.66±2.62)kg/m2。兩組一般資料比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。所有患者均簽署知情同意書，并經(jīng)倫理委員會論證通過。

觀察組納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)符合腱鞘巨細(xì)胞瘤診斷標(biāo)準(zhǔn)[6]；(2)入組前未進(jìn)行抗腫瘤治療；(3)簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)嚴(yán)重心臟、肝、腎功能障礙；(2)中途退出本研究。

1.2研究方法 分別對觀察組及對照組的病變組織進(jìn)行采集，采用10%中性甲醛水溶液固定，常規(guī)脫水，石蠟包埋后進(jìn)行連續(xù)切片，切片的厚度設(shè)定為4 μm，采用pH6.0的檸檬酸修復(fù)液對石蠟切片進(jìn)行脫蠟及脫水，采用高壓加熱法對抗原進(jìn)行修復(fù)。分別采用1∶100的VEGF、S-100P及clusterin抗體進(jìn)行滴加，在4 ℃下進(jìn)行孵育過夜，采用多聚物酶標(biāo)二抗進(jìn)行滴加后，在37 ℃下孵育45 min，采用DAB進(jìn)行顯色，蘇木精進(jìn)行復(fù)染。細(xì)胞漿內(nèi)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色顆粒物即為VEGF、S-100P及clusterin陽性。采用染色強(qiáng)度及陽性細(xì)胞的二級計數(shù)法對VEGF、S-100P及clusterin進(jìn)行評分，無染色則為0分，淡黃色則為1分，黃褐色則為2分，深褐色則為3分。陽性細(xì)胞數(shù)目比例為<10%則為0分，10%～25%則為1分，>25%～50%則為2分，>50%～100%則為3分。染色強(qiáng)度及染色比例的評分乘積可作為以上蛋白表達(dá)程度的評價依據(jù)，<6分以下為低表達(dá)，≥6分則為高表達(dá)[7]。

1.3觀察指標(biāo)

1.3.1兩組患者VEGF、S-100P及clusterin相對表達(dá)水平比較 分別對觀察組及對照組VEGF、S-100P及clusterin相對表達(dá)水平進(jìn)行分析。

1.3.2不同病理特征患者VEGF、S-100P及clusterin相對表達(dá)水平比較 分別對不同病灶部位、性別、年齡、病變程度、包膜完整性患者VEGF、S-100P及clusterin相對表達(dá)水平進(jìn)行比較。

2 結(jié) 果

2.1兩組VEGF、S-100P及clusterin相對表達(dá)水平比較 觀察組VEGF、S-100P及clusterin相對表達(dá)水平明顯高于對照組(P<0.05)，見表1。

表1 兩組VEGF、S-100P及clusterin相對表達(dá)水平比較

2.2不同病理特征患者VEGF、S-100P及clusterin相對表達(dá)水平比較 不同性別、年齡、腫瘤部位患者VEGF、S-100P及clusterin相對表達(dá)水平比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；不同局限性、包膜及腫瘤最大徑患者VEGF、S-100P及clusterin相對表達(dá)水平比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，見表2。

表2 不同病理特征患者VEGF、S-100P及clusterin相對表達(dá)水平比較

2.3相關(guān)性分析 通過相關(guān)性分析，患者VEGF、S-100P及clusterin與疾病局限性、包膜及腫瘤最大徑呈正相關(guān)(r=0.321～0.852)，見表3。

表3 相關(guān)性分析

3 討 論

腱鞘巨細(xì)胞瘤主要是起源于腱鞘及關(guān)節(jié)滑膜層的良性病變，好發(fā)于手指、足部的腱鞘滑膜組織及小關(guān)節(jié)。有研究報道指出，腱鞘巨細(xì)胞瘤也可發(fā)生于臀部、腕部及肩部[8]。腱鞘巨細(xì)胞瘤高發(fā)于30～50歲，女性患者發(fā)病率明顯高于男性。在疾病進(jìn)展中，腫瘤生長速度較為緩慢，結(jié)節(jié)的大小在多年內(nèi)可維持在一定大小。2013年世界衛(wèi)生組織將其定義在纖維組織細(xì)胞瘤范疇[9]。目前，按照腫瘤生長方式，可以將其分為局限型及彌漫型兩種類型。局限型腱鞘巨細(xì)胞瘤主要發(fā)生在手部及腕關(guān)節(jié)，其比例可達(dá)65%～89%[9-10]。在手部病變部位中，主要以食指及中指作為主要病灶部位，而膝關(guān)節(jié)等下肢部位的腱鞘巨細(xì)胞瘤發(fā)病較少。

VEGF主要位于機(jī)體6號染色體中，通過基因編碼形成VEGF蛋白，可與血管內(nèi)皮細(xì)胞特異性結(jié)合，促進(jìn)血管生長因子形成[7]。本研究中，觀察組VEGF相對表達(dá)水平明顯高于對照組，且隨著腫瘤最大徑增大及局限性改變，VEGF相對表達(dá)水平明顯上升。在疾病的進(jìn)展中，當(dāng)突破包膜及局限性降低時，腫瘤細(xì)胞的增殖需要獲取較多的氧氣及營養(yǎng)物質(zhì)，新生的毛細(xì)血管代償性增多，但是在新生毛細(xì)血管的形成過程中，由于受到局部病灶部位的腫瘤細(xì)胞及炎性細(xì)胞的雙重影響，病灶部位的血管內(nèi)皮功能發(fā)生明顯紊亂，進(jìn)一步造成內(nèi)皮細(xì)胞特異性表達(dá)VEGF[11]。而局部病灶部位的血管密度分析雖然可以在一定程度上反映局部病灶部位的血管形成情況，但是其對病灶部位的采樣具有明顯依賴性。S-100P在腫瘤細(xì)胞的異常表達(dá)與患者腫瘤細(xì)胞的生長、浸潤及轉(zhuǎn)移密切相關(guān)[10]。本研究中，觀察組S100P相對表達(dá)水平較對照組明顯升高，且不同局限性、包膜及腫瘤最大徑患者S-100P相對表達(dá)水平比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。有研究報道認(rèn)為，腱鞘巨細(xì)胞瘤患者組織中基因啟動子區(qū)域的甲基化狀態(tài)與患者的浸潤程度及臨床分型存在一定相關(guān)性，局部病灶部位的甲基化狀態(tài)情況越高，患者的浸潤程度及臨床分型嚴(yán)重程度越高[12]。clusterin是從睪丸液體中分離得到，在多種腫瘤組織中呈現(xiàn)較高表達(dá)水平，同時在組織重建、結(jié)構(gòu)重建、擴(kuò)膜轉(zhuǎn)運(yùn)對巨噬細(xì)胞具有趨勢化，在一定程度上促進(jìn)了腫瘤細(xì)胞進(jìn)展。在本研究中，雖然腱鞘巨細(xì)胞瘤不是惡性腫瘤，多數(shù)為良性腫瘤，但是觀察組clusterin相對表達(dá)水平明顯高于對照組，且clusterin與疾病的局限性、包膜及腫瘤最大徑呈正相關(guān)，說明clusterin在腱鞘巨細(xì)胞瘤的疾病進(jìn)展中發(fā)揮重要作用。

綜上所述，腱鞘巨細(xì)胞瘤與VEGF、S-100P及clusterin表達(dá)可能相關(guān)，VEGF、S-100P及clusterin與腱鞘巨細(xì)胞瘤的包膜不完整彌漫型、局限性、腫瘤最大徑等病理特征可能存在一定關(guān)系。