種雞禽流感抗體檢測與分析

張繼剛

（遼寧省瓦房店市動物疫病防控中心 116300）

隨著養雞規模化發展，雞群飼養密度越來越大，對環境條件的要求越來越高，最重要的是雞群生活環境中的致病菌發生了很大變化，給疾病防控工作帶來一定難度。目前對雞群危害較嚴重的傳染性疾病是禽流感，本病由A 型流感病毒引起，在環境中非常容易出現變異毒株，致使雞群發病程度存在明顯差異，并且屬于一種烈性傳染病，不僅影響雞群的健康生長，使雞群均勻度和飼料轉化率降低，還會引起種雞產蛋率突然下降，甚至造成大批次死亡現象，給種雞群帶來難以估量的損失。禽流感在各國種雞場也普遍發生，被列為A 類傳染病。目前我國雞場禽流感發病率較高，再加上免疫接種疫苗存在缺陷，致使無法通過黏膜免疫盡快產生抗體，但生活環境中禽流感病毒普遍存在，時刻威脅雞群健康。

為了更好地預防或控制禽流感疾病的發生，避免禽流感給種雞群帶來的不良影響，確保養雞業健康發展。管理人員需要根據當地禽流感流行情況，讓專門獸醫人員制定合理的免疫程序，根據雞群日齡選擇毒株對型的疫苗進行接種，還必須正確掌握種雞場禽流感的免疫接種效果，一旦免疫效價較低要立即查找原因，如果是疫苗毒株原因，需要立即更換疫苗重新接種，如果免疫程序失誤，需立即調整免疫接種計劃，如果雞群受到外界野毒威脅，需要及時為雞群緊急接種，采取多種措施確保種雞群具有較高的抗體水平，機體自身能產生很好的保護力，能抵御外界的野毒攻擊。為此對5 個種雞場的種雞群進行抽樣，檢測禽流感抗體水平，下面將分析檢測結果，供種雞場技術人員參考[1]，有利于分析本場制定的免疫程序是否需要更改，或者是否對雞群進行緊急接種。

1 材料和方法

1.1 所用材料

首先選擇5 個免疫接種禽流感疫苗的種雞群，讓專門獸醫人員隨機采集138 份血清用來檢測禽流感抗體水平。其次，H5亞型禽流感抗原、H5亞型禽流感陰性血清和J5亞型禽流感陽性血清都是從中國農業大學獸醫研究院所購買的。準備好微型振蕩器、培養箱、離心機和V 型微量凝集板等檢測器具或設備，準備在實驗室完成禽流感抗體檢測。

1.2 檢測方法

根據我國制定的關于高致病性禽流感診斷技術的標準實施微量紅細胞凝集試驗（HA）和紅細胞凝集抑制試驗（HI），將上述血清樣本進行禽流感抗體檢測，同時按照試劑說明書或要求認真操作，保證順利完成抗體檢測任務。

1.3 免疫接種效果評價標準

免疫接種效果評價標準按照我國農業部制定的標準來判斷，以完全抑制4 個血凝單位抗原的血清最高稀釋倍數作為紅細胞凝集試驗滴度，如果H5亞型禽流感血凝抑制試驗的效價低于4log2 說明免疫效果不達標，反之，如果H5亞型禽流感血凝抑制試驗的效價高于4log2 說明免疫效果達標，一個種雞群體抗體效價達標的比率應在70%以上，這樣才能說明整個種雞群免疫接種效果較理想，如果種雞群抗體效價比率低于70%，需要緊急接種或調整免疫程序[2]。

2 檢測結果分析

采取血凝和血凝抑制試驗，隨機將5 個種雞群的138 份血清樣本進行H5亞型禽流感免疫抗體水平檢測，結果顯示，所有血清樣本的H5亞型禽流感抗體水平差別較大，基本分布在22～30 之間，其中抗體水平在25 左右的血清樣本比較集中且數量較多。按照檢測標準規定，免疫接種效果達標的種雞群，H5亞型禽流感抗體水平必須高于24，將所有參與檢測的138 個血清樣本進行統計，見附表。這5 個種雞群的免疫效果相差較大，其中有1 個種雞群的免疫效果沒有達標，另外4 個種雞群的平均禽流感抗體水平超過24，說明這4 個種雞群的禽流感免疫效果達標。

附表 15 個種雞群H5 亞型禽流感抗體水平分布和免疫接種達標率

這樣從總體方面來看，上述5 個種雞群H5亞型禽流感疫苗免疫接種效果比較理想，雞群達標比率達到80%以上，超過國家規定標準。表明這5 個種雞群的禽流感疫病防控情況比較理想，能對環境中的禽流感病毒產生一定的免疫力，說明原來制定的免疫接種程序比較合理，應按照原有計劃給其他種雞群進行免疫接種。通常免疫效果良好的種雞群飼養管理也比較完善，如種雞環境溫度、濕度適宜、空氣質量良好，不同生長階段的飼料營養全價，且對種雞群衛生消毒工作、隔離飼養、采取全進全出飼養方式等細節都落實到位，進而獲取了較好的疫病防控效果[3]。

H5亞型禽流感抗體水平沒有達標的1 個種雞群雖然與國際規定的標準比較接近，但說明種雞群的飼養管理工作還存在缺陷，尤其是免疫接種禽流感疫苗效果不理想，需逐步改善種雞群的生活條件，供給營養全價的飼料和舒適的溫濕度環境，提高雞群抗病能力。同時加強環境衛生消毒工作，根據實際情況制定合理的衛生消毒程序，每周定期對雞舍消毒2～3 次，交替使用消毒藥物，以提高消毒效果，徹底殺滅環境中存活的禽流感病毒，避免種雞群受到野毒侵染。最重要的是加強禽流感抗體水平檢測工作，實時掌握雞群禽流感抗體水平，必要時需要進行緊急接種，讓疫苗抗原刺激機體產生較高的抗體水平，能更好地對種雞群產生保護作用[4]。如果還一直采取粗放管理，環境溫度、濕度和通過管理不當，或者飼料營養不良，衛生消毒不嚴，會促使機體免疫力降低，在禽流感抗體水平較低的情況下雞群極易爆發禽流感疾病。

3 小結和討論

（1）通過以上研究發現，種雞群的H5亞型禽流感免疫抗體水平相對較高，對雞群具有較好的保護力，能很好抵御外界野毒攻擊。同時可以說明種雞場飼養管理水平較高，且制定的免疫程序比較合理，且大部分種雞群禽流感抗體水平的達標率在70%以上，充分說明種雞群的禽流感疫病防控工作比較到位，成果顯著。

但也可能有的種雞群在檢測期間正好處于產蛋高峰期，此時禽流感疫苗抗體水平也處于較高水平，一般產蛋高峰過后，種雞群接種免疫禽流感疫苗頻率降低，因此，種雞產蛋后期禽流感抗體水平會降低一些。所以在抗體檢測前需要正確掌握種雞群的實際周齡或免疫接種時間，以便更好地對整個檢測結果有一個更加全面的評價和判斷，有利于對種雞群采取更加全面的疾病防控措施[5]。建議在種雞產蛋后期也定期進行禽流感抗體檢測工作，以便及時發現禽流感抗體較低情況，并立即進行免疫接種，始終維持種雞抗體水平處于保護狀態，避免在野毒侵擾下發生疾病。

在疫病防控工作中，管理人員一直將種雞群免疫達標率和抗體水平作為評判免疫效果的理論依據，如果種雞接種禽流感疫苗后抗體水平高，可以說明疫苗質量可靠、種雞群免疫應答和免疫力較高，種雞群可以更好地抵御外界野毒入侵，傳染性禽流感的流行和爆發幾率大大降低。相反，如果種雞群免疫禽流感疫苗后抗體水平達標率低下，說明雞群沒有產生足夠的保護能力，感染外界野毒的機會相對較高，說明疫苗質量較差、免疫接種程序不合理或免疫接種效果不佳等。

（2）管理人員需要充分認識到飼養管理中存在的不足，其中1 個禽流感抗體水平沒有達標的種雞群存在以下幾方面問題，①沒有制定合理的飼喂程序，種雞群既不能形成良好的采食和休息習慣，降低食欲和飼料轉化率，又不利于維持健壯體質，還容易處于饑餓狀態或發生營養缺乏情況，長期下來種雞群免疫力和抗病能力降低，增加感染疾病的風險。種雞生活環境條件較差，雞舍內溫度差異較大、空氣污濁、濕度較高，致使機體代謝紊亂或內分泌失調，也會明顯降低機體免疫力。②在接種免疫過程中，讓飼養人員自己操作，沒有技術人員親自參與和監督，這樣就無法保證每只種雞都可以得到劑量一致的禽流感疫苗，免疫接種后的抗體水平也會存在很大差異。③雞舍衛生條件較差，地面污濁，糞便清理不及時，雞舍頂部布滿灰塵，說明很長時間沒有進行有效消毒，這樣環境中的病原微生物蓄積過量，增加了種雞群感染致病菌的機會，容易感染各種疾病，尤其是感染網狀內皮增生癥、淋巴白血病等免疫抑制性疾病后，對機體免疫器官產生抑制作用，即使種雞群接種免疫禽流感疫苗后，也不會產生理想的免疫應答，進而明顯降低疫苗免疫效果[6]。

（3）針對種雞場存在的一些關鍵問題，需要管理人員改善飼養管理水平，提高種雞體質和抗病能力，減少環境中存活的病原微生物數量，降低雞群感染各種疾病的機會。首先，給種雞群提供合理的溫度、濕度和光照等環境條件，隨著種雞不同生長階段提高營養全價的飼料，滿足各個時期對飼料營養的需求，并且制定合理的飼喂程序，定時定量飼喂種雞群，以便提高種雞體質和免疫力，增強對外界野毒的抵抗能力。其次，完善生物安全體系，做到全進全出式飼養，對進入廠區的車輛、物品嚴格進行消毒處理，減少將外界野毒攜帶入場的風險。制定科學的消毒程序，定期對種雞舍內和舍外進行清理和消毒，殺滅環境中的病原體，降低雞群感染發病的風險。獸醫人員在免疫接種前后適時進行抗體檢測，確保雞群處于保護力較高的狀態，最主要的是能逐步完善種雞場的疾病防控工作，為養雞業的健康發展保駕護航。

4 結語

對種雞群進行禽流感免疫抗體水平檢測工作，能及時掌控種雞群的整體禽流感抗體水平，幫助獸醫人員更加全面地分析禽流感疫苗免疫接種效果，以便及時調整免疫接種程序，或者對雞群進行緊急接種免疫。同時定期檢測種雞群禽流感抗體水平，有效掌握機體內禽流感抗體水平的消減規律，進一步優化和改進種雞場禽流感疫苗免疫接種程序。同時還可以評估種雞群是否存在感染禽流感疫病的風險，搞清楚禽流感疫病在當地的流行情況，合理評判所選禽流感疫苗質量是否優良，這樣可以幫助種雞場選擇更加優質和毒株對型的禽流感疫苗，避免無味增加禽流感疫苗的免疫接種次數，致使雞群產生免疫麻痹現象。總之，適時檢測禽流感疫苗抗體不僅可以適時進行免疫接種，確保種雞群處于健康狀況，還能降低種雞場疫苗成本，提高養殖效益。