分子病理技術在臨床診療中的應用進展

鄧俊輝

【摘要】本次研究主要分析分子病理技術在臨床診療中的應用現狀，在于準確把握該項技術在臨床中的應用價值，使其成為推動臨床診療水平增長的重要技術，準確把握分子病理技術的應用優勢，從而在臨床診療中進行充分利用，這將成為我國臨床醫療水平發展不可或缺的支撐。

【關鍵詞】分子病理診斷;精準醫學;個體化醫療

在科學技術不斷發展的今天，精準醫療理念逐漸興起，關于精準醫療的概念理解是指在基因組測序、生物信息、大數據科學等多學科交叉應用，確保為患者提供的醫療服務具有個性化，且更加精準和精細。可以說，精準醫療的出現，對于病理學的發展帶來了一定的挑戰，同時也是良好的發展機遇。該學科的主要內容是借助分子以及遺傳學方法，實施腫瘤的分子病理診斷和分類，從而設計或者是驗證得出能夠針對疾病發生進行預測或者是反應的生物標志物，屬于臨床疾病診斷中不可或缺的患者個體化資料支持，是保證個體化綜合治療具有針對性的關鍵，符合精準醫療的發展需求。

1 分子病理技術

將分子病理技術用于感染標本的病原微生物DNA或者RNA的提取，借助高通量測序，完成生物信息比對以及大數據科學分析，從而獲得關于病原微生物的各種屬性信息，將其用于感染的快速，精準預防和治療，為臨床抗生素的合理使用提供可靠的數據支持。可以使用分子病理技術實現感染源的測定，相較于傳統的培養或者是血清學以及組織學檢測，不僅表現出更高的靈敏度，并且在特異性和準確性方面也更勝一籌。現階段在感染性疾病診斷以及療效判斷中，關于分子病理技術的應用效果良好，常用的技術手段包括采用原位雜交檢測EB病毒編碼的小RNA，PCR和反向點雜交法檢測乳頭狀瘤病毒DNA，熒光定量PCR技術檢測各型肝炎病毒DNA和RNA、人類單純皰疹病毒DNA、結核桿菌DNA、肺SARS病毒RNA等，這些檢測取得了很好的效果。

2在遺傳性疾病上的應用

目前在遺傳性疾病的臨床治療過程中，涉及到的分子病理技術應用也越發的常見，例如，使用原位雜交對染色體和DNA的水平實施病理診斷檢測能夠達到組織定位的效果，由此支持臨床病理醫生通過研究患者染色體以及基因檢測的方式，完成遺傳病的篩查和診斷，在預防家族遺傳病發生方面，有著極大的應用價值。另外一方面，分子病理學在輔助生殖領域也得到了不錯的應用，例如在胚胎植入之前，使用分子病理技術實現遺傳學的診斷和篩查，對胚胎的染色體正常情況進行判斷十分關鍵，保證速移植的胚胎的健康，相應的工作流程如下：①取3～5個發育第3天的卵裂球單細胞或發育第5天的囊胚滋養層細胞進行DNA提取與單細胞擴增;②對質檢達到標準的擴增產物進行文庫制備后再進行高通量測序;③生物信息學對結果進行分析和判讀，判斷胚胎是否正常，為胚胎移植提供參考。目前國內遺傳性疾病的檢測中，所使用到的分子病理技術主要有高通量測序儀、熒光定量PCR技術、染色體核型分析、免疫組織化學技術、熒光原位雜交技術等，能夠針對胚胎移植前和產前遺傳性疾病進行有效篩查，覆蓋范圍涉及神經系統、遺傳性耳聾基因、生殖系統等多個領域。可以說，現階段的分子病理技術，在遺傳性疾病領域的應用十分成熟，伴隨著該項技術的不斷發展，必然能夠發現更多新的致病基因以及遺傳病類別，甚至逐漸應用于產前診斷以及基因治療中。但是不可否認的是，受到現實條件的限制，大多數先進的分子病理技術只停留在實驗室領域，想要在臨床中進行大范圍的應用仍然有很長的路要走。

3在腫瘤診斷與精準治療中的應用

將分子病理學技術應用于惡性腫瘤的靶向基因檢測中效果顯著。現階段常用的基因靶向檢測技術類別主要包含以下三種：熒光原位雜交方法、實時熒光定量PCR方法和測序法。其中ARMS實時熒光定量PCR，又稱等位基因特異性PCR，采用突變擴增阻滯系統，與雙環探針和特異引物兩種技術結合，從而對含有突變基因的DNA樣品進行檢測。石蠟包埋組織標本提取的DNA大部分被片段化，導致檢測結果缺乏準確性，ARMS法在設計上能夠最大限度地縮短目標產物的長度，從而解決了這一難點。考慮到可能出現的擴增產物污染情況，在實踐中通常會運用實時PCR平臺與ARMS結合，做到擴增的閉館操作效果，就不需要產物的后續處理環節，整體操作更為簡便。由于靶向基因檢測在腫瘤病理診斷中的占比重大，且意義深遠，這是因為其定位準確，有著較強的特異性，包括極高的敏感性及形態與功能結合等特點。

分子標志物在腫瘤病理診斷中的應用主要有以下幾點：（1）提高病理診斷的準確性;（2）有助于確定腫瘤分期及判斷患者預后;（3）有助于發現微小轉移灶;（4）有助于指導腫瘤患者的治療;（5）有助于遺傳性腫瘤易感家族的輔助診斷;（6）有助于腫瘤相關致病性微生物的發現。腫瘤的診斷與治療是分子病理在臨床應用上最為廣泛的領域，分子病理技術可以檢測基因表達和基因突變，從而評價個體患腫瘤風險，篩選出易感人群，實現腫瘤的早期預防、早期診斷、判斷預后及指導治療，還可對疑難腫瘤進行診斷和分類、個體化診治和預后評估等[14]。ARMS是依據不同的已知突變來設計出對應的引物，進而檢測出有突變基因。根據分子病理診斷技術檢測出某種基因的表達，了解腫瘤是否存在該基因的分子異常，以選擇和確定合適的分子靶向治療，腫瘤基因檢測在一定程度上對臨床診療方案的選擇具有極其重要的決定性以及指導作用，醫生依據每個肺癌患者腫瘤的個體特征進行個體化治療。準確的病理診斷是正確靶向治療的前提，基于分子病理的腫瘤多基因檢測的臨床應用，可以輔助醫生靶向用藥并判斷療效。

綜上所述，在精準醫療快速發展的背景之下，基于分子水平視角，對疾病的病變性質和生物學特性進行探究，并融入基因視角展開關于疾病的發生，發展以及轉歸的高特異和敏感性分子病理診斷必然是今后臨床關于疾病診斷的主流發展趨勢，分子病理技術部的優勢在于能夠實現分子分型，對于疾病的危險因素探索更加全面，無論是在腫瘤的早期預防，精準診斷，或者是靶向治療，包括預后判斷方面，都有著良好的應用優勢，是提高臨床治療個體化的重要動力。

參考文獻：

[1] 劉智賢，劉漢忠. 精準醫學時代下臨床病理發展趨勢[J]. 科技經濟導刊，2018，26（13）：127.

[2] 張波. 病理學在精準醫療時代的發展[J]. 精準醫學雜志，2018，33（2）：98-101.