兩種乙型肝炎表面抗原磁微粒化學發光法檢測試劑盒性能比較

孫繼云 馬小艷 劉歡 王雅杰

臨床常采用酶聯免疫吸附試驗法、膠體金免疫層析法檢測乙型肝炎表面抗原(HBsAg)，但存在檢測時間長、靈敏度不理想的問題。磁微粒化學發光法為近年來新興的檢測方法，具有簡便、快速等優勢[1]。但由于樣品、操作、技術等各方面的原因，有可能出現假陽性、假陰性的問題，影響診斷的準確度。我國上市的HBsAg確認試劑盒相對較少，主要依靠進口，檢測成本較高，加快我國HBsAg確認試劑盒的研發具有重要意義[2]。本研究對鄭州安圖生物工程股份有限公司生產的HBeAg確認試劑盒與已批準上市的同類產品Abbott Ireland Diagnostics Division生產的HBeAg確認試劑盒的性能進行對比，探討國產 HBsAg確認試劑盒在HBV檢測中的價值。

資料與方法

一、樣品來源

選取2020年10月至11月在首都醫科大學附屬北京地壇醫院進行檢測的血清或血漿樣本380份，-20℃儲存，備用，使用前恢復至室溫，輕輕搖動混勻，2周內快速完成檢測及復測。

納入標準：樣本的相關信息完整，包括患者年齡、性別、臨床診斷或就診科室等；樣本量不少于1 000 μL。

排除標準：嚴重脂血、溶血、渾濁，合并黃疸；微生物污染標本，臨床基本信息不完整的樣本；未按要求采集或處理的樣本。

剔除標準：因儀器故障或操作原因，未進行正常檢測的樣本；對復測樣本，以復測結果為準，并注明復測原因；未按試驗方案收集、保存或檢測的樣本。

二、主要試劑

考核試劑：鄭州安圖生物工程股份有限公司生產的HBsAg確認試劑盒(中和實驗法)，配套試劑為HBsAg檢測試劑盒(磁微粒化學發光法)。

對比試劑：Abbott Ireland Diagnostics Division HBsAg確認試劑盒(化學發光微粒子免疫檢測法) ，配套試劑為HBsAg測定試劑盒 (化學發光微粒子免疫檢測法)。

第三方試劑：珠海麗珠試劑股份有限公司生產的HBsAg確認試劑盒(中和試驗)，配套試劑為HBsAg診斷試劑盒(酶聯免疫法)。

檢測儀器：儀器為安圖生物Autolumo A2000全自動化學發光測定儀。所有試劑盒均嚴格按照說明書進行操作。

三、方法

選擇檢測HBsAg剩余的血清/肝素抗凝血漿的共380份。分別使用配套試劑進行復孔檢測，如臨床研究機構使用對比配套試劑進行臨床常規檢測，則使用對比配套試劑進行單次檢測。配套試劑2次檢測結果均為陽性的為重復陽性，2次結果不一致的樣本需進行第3次檢測，用第三方試劑進行復核，3次結果中有2次檢測結果為陽性的則判為重復陽性。然后對重復陽性的樣本用考核試劑與對比試劑分別進行確認試驗。

四、觀察指標

觀察并記錄考核配套試劑及對比配套試劑的檢測結果；觀察并記錄考核確認試劑與對比確認試劑的檢測結果；對2種確認試劑盒的診斷效能進行對比分析。

五、統計學方法

采用SPSS26.0統計學軟件進行數據處理。正態分布的計量資料以均數 ± 標準差表示，組間比較采用獨立樣本t檢驗，計數資料以例數(%)表示，組間比較采用卡方檢驗，P< 0.05為差異有統計學意義。一致性分析采用Kappa檢驗，結果為0～1，Kappa>0.75，則表示一致性良好。

結 果

一、HBsAg配套試劑檢測結果

考核配套試劑檢測結果的陽性符合率為100%、陰性符合率為100%，總符合率為100%，差異無統計學意義(P>0.05)，2種配套試劑具有一致性(Kappa>0.75)。見表1。

表1 HBsAg配套試劑的檢測結果(份)

HBsAg考核試劑確認陽性符合率為100% 、未確認陽性符合率為0、總符合率為91.58%，差異無統計學意義(P>0.05)，2種確認試劑具有一致性(Kappa>0.75)。2份考核試劑未確認陽性的樣品經第三方試劑檢測后顯示陽性。見表2。

表2 HBsAg考核試劑與對比試劑的檢測結果(份)

二、HBsAg確認試劑盒的診斷效能

考核試劑靈敏度為99.43%，特異度為100，準確度為100% ，對比試劑的靈敏度、特異度及準確度均為100%。

討 論

血液是HBV的主要傳播途徑，我國對于無償獻血者只進行HBsAg指標的檢測，假陰性會導致輸血過程中感染風險加大，因此檢測結果的準確性具有重要意義[3]。

臨床上多采用ELISA檢測HBsAg，但存在酶標試劑易失活，檢測過程繁瑣，樣本易污染，檢測時間長等不足之處[4]。隨著免疫檢測技術的不斷發展，磁微粒化學發光法得到應用，其具有操作簡單、檢測時間短等優點[5,6]。但由于原料、技術等差異，檢測HBsAg時可能存在假陽性、假陰性的情況，HBsAg確認試劑盒是對HBsAg初測結果進行的進一步的補充和確定，通過HBsAg確認試劑盒對檢測結果進行確認，從而輔助乙型肝炎的診斷，能夠提升檢測的準確率，降低醫療風險[7,8]。

目前HBsAg確認試劑盒上市的產品主要有Abbott Ireland Diagnostics Division的HBsAg確認試劑盒(化學發光微粒子免疫檢測法)、珠海麗珠試劑股份有限公司的HBsAg確認試劑盒(中和試驗)、Siemens Healthcare Diagnostics Inc的HBsAg確認試劑盒(化學發光法)等[9,10]。我國上市的HBsAg確認試劑盒廠家相對較少，難以滿足臨床需求。本研究對鄭州安圖生物工程股份有限公司生產的試劑盒的效能進行了考察，與已批準上市的同類產品Abbott Ireland Diagnostics Division生產的HBsAg確認試劑盒的性能進行對比，結果表明陽性預測率、陰性預測率、靈敏度、特異度及準確度均具有一致性，具有較高的診斷效能，可作為國外產品的替代品使用。

但各種檢測試劑盒均有一定的優勢及不足，檢驗人員應根據具體情況選擇適宜的診斷方式。