IgM-κ型M蛋白對尿酸檢測的干擾及解決方案*

歐陽偉慶，李嘉燕，隋 洪，梁越媚

東莞康華醫院檢驗科，廣東東莞 523000

M蛋白即單克隆免疫球蛋白(Ig)，由漿細胞或B淋巴細胞單克隆惡性增殖所產生，其本質是一種Ig或Ig的片段[1]，多見于多發性骨髓瘤、華氏巨球蛋白血癥、惡性淋巴瘤等疾病。近年來，國內外已有多篇研究報道M蛋白對臨床生化項目檢測的干擾，涉及不同的方法和不同的檢測項目[2]。但到目前為止，M蛋白的干擾還未能引起實驗人員的足夠重視，也缺少方便、可靠的方法排除M蛋白的干擾，往往導致錯誤結果的發出，給臨床診治帶來干擾。因此，筆者通過最近發現的1例IgM-κ型M蛋白血癥干擾尿酸酶法尿酸檢測結果的案例，嘗試尋找一種能夠方便、可靠地排除M蛋白干擾的方案，現報道如下。

1 臨床資料

患者，男性，71歲。患者因“發現凝血因子缺乏1年余”于2021年3月11日在外院診治，完善骨髓穿刺等檢查后診斷為華氏巨球蛋白血癥/淋巴漿細胞淋巴瘤，于3月18-22日行化療(具體用藥及用量不詳)，病情穩定后出院。出院后患者未返院復查及規律化療。10天前患者出現間斷腹瀉，每周有2～3 d腹瀉，每日解3～4次水樣便，自行口服思密達等藥物可緩解。為進一步治療，患者于2021年8月20日來本院就診，以“診斷華氏巨球蛋白血癥/淋巴漿細胞淋巴瘤5個月，腹瀉10 d”為主訴入院。專科檢查：神志清醒，鞏膜無黃染，全身皮膚黏膜無出血點及瘀斑，淺表淋巴結未觸及腫大；胸骨無壓痛，雙肺呼吸音清，未聞及干、濕啰音；心律齊，心率71次/分，各瓣膜區未聞及病理性雜音；腹平軟，無壓痛及反跳痛，肝脾肋下未捫及，腸鳴音正常；生理反射存在，病理征陰性。

入院診斷：華氏巨球蛋白血癥/淋巴漿細胞淋巴瘤。

診治經過：入院后完善相關檢查(三大常規、血型、鹽水交叉配型、肝功能、腎功能、電解質、心肌酶、凝血4項、β2-微球蛋白、血脂4項、體液免疫5項、乙型肝炎標志物、血清固定電泳、血清蛋白電泳、血及尿游離輕鏈、尿本周蛋白、大便涂片、大便培養等)，患者拒絕復查骨髓穿刺，拒絕治療原發病，要求僅止瀉、抗炎對癥支持治療。經治療，患者大便正常，于2021年8月22日自動出院。

2 實驗室檢查

2021年8月21日實驗室檢查結果，血型：ABO血型O型，Rh(+)；血常規：白細胞計數2.10×109/L，血紅蛋白99 g/L，血小板計數154×109/L，中性粒細胞計數0.77×109/L；大便常規正常，潛血試驗(+)；生化指標：清蛋白30.6 g/L，總膽固醇1.62 mmol/L，總膽汁酸10.22 μmol/L，總蛋白63.3 g/L，血清β2-微球蛋白7.13 mg/L；凝血功能：活化部分凝血活酶時間125.10 s，凝血酶原時間26.10 s，纖維蛋白原3.28 g/L；體液免疫指標：補體C4<0.064 2 g/L，IgA 6.14 g/L，IgM 20.2 g/L，血清游離κ輕鏈為1 307.85 mg/L；尿本周蛋白定性(-)；狼瘡抗凝物初篩試驗125.60 s，狼瘡抗凝物確認試驗116.20 s；乙型肝炎標志物：乙型肝炎e抗體(+)，乙型肝炎表面抗原(+)，乙型肝炎核心抗體(+)，乙型肝炎病毒DNA<50 IU/mL。

在進行血清原倍標本檢測時，首次檢測血清尿酸為-94 μmol/L，尿酸反應曲線見圖1，筆者進行了復查，結果為6 μmol/L。本科室使用西門子ADVIA 2400和配套的尿酸酶法尿酸試劑檢測血清尿酸，該檢測系統的性能驗證中尿酸的可報告范圍為10倍。筆者查看了其他檢查結果，發現血清IgM 20.2 g/L，結合患者病情，考慮目前尿酸檢測結果可能與M蛋白干擾有關。為排除干擾，筆者進行了驗證。患者血清(原倍)標本清晰透明，分別將原倍標本采用下列方式進行處理：去離子水稀釋5、10倍，得到的標本明顯混濁；去離子水稀釋5、10倍，以3 500 r/min離心10 min，標本上清液清晰透明，底部分離出白色固體；生理鹽水稀釋5、10倍后標本清晰透明。檢測6種處理方式獲得的標本(離心的去離子水稀釋標本檢測上清液)，所有檢測結果見表1。結果顯示，經去離子水稀釋并離心后的血清標本尿酸檢測結果明顯高于原倍(t=13.960，P=0.046)、去離子水稀釋(t=13.028，P=0.049)、生理鹽水稀釋(t=14.853，P=0.043)標本的尿酸檢測結果。

注：A為原倍標本尿酸反應曲線(-94 μmol/L)；B為對照的正常尿酸反應曲線(232 μmol/L)。

表1 患者尿酸檢測結果匯總表(μmol/L)

3 討 論

在臨床生化檢驗中，往往有各種各樣的因素會影響檢驗結果的準確性。因此，重視各項影響因素，使檢驗結果的準確性得到保障是檢驗工作者的職責[4-5]。血尿酸作為傳統的生化項目，與痛風、心血管疾病、代謝綜合征、腎臟疾病等密切相關[6-9]。準確的血尿酸結果對于臨床診治具有重要的參考價值。目前實驗室常用的檢測方法為尿酸酶-過氧化物酶偶聯反應、磷鎢酸還原法等。

近年來，高水平M蛋白干擾尿酸酶法尿酸結果的問題時有報道，李江等[10]、趙興波等[11]曾發表IgG和IgA型高M蛋白血癥干擾臨床生化項目的病例報道，開始引起人們對M蛋白干擾因素的注意。沈敏娜等[12]、謝春霞等[13]報道采用生理鹽水稀釋標本能排除M蛋白對生化項目檢測的干擾，但是筆者的檢測結果與其不一致，可能原因如下：首先，謝春霞等[13]報道的病例中患者的IgM僅為5.56 g/L，而本病例中患者血清IgM為20.2 g/L，生理鹽水稀釋只能在一定程度上減輕相對低水平M蛋白的干擾，而并不能真正地消除M蛋白的干擾；其次，稀釋處理標本的時候應該考慮項目的可報告范圍，本實驗室使用的檢測系統尿酸可報告范圍僅為10倍，對于高達一定水平的M蛋白，10倍稀釋并不能減輕其干擾。事實上，BERTH等[14]早年報道M蛋白對臨床生化項目檢測的干擾源于M蛋白與試劑內某些抗人抗體反應，產生沉淀，引起濁度增加。也有研究表明，分析前，M蛋白增多引起的高黏滯綜合征及與其體內某些物質的特異結合(如形成巨酶)可以干擾實驗分析，影響檢測結果；分析中，M蛋白在特定條件下產生沉淀可以干擾比色和濁度分析，或與分析體系中的組分特異或非特異性結合引起假性結果[15]。無論如何，想要排除M蛋白的干擾，最可靠的方法是想辦法去除血清中高水平的M蛋白，而不僅僅是通過生理鹽水稀釋減輕干擾，因為這種方法僅僅適用于較低水平M蛋白的干擾。

本研究結果表明，采用去離子水稀釋高水平IgM-κ型M蛋白血清的同時能夠析出血清中的M蛋白，從而使標本變渾濁，IgG和IgA型M蛋白也有類似報道[10-11]。對稀釋后標本充分混勻后，進行3 500 r/min離心10 min能夠把絮狀物與血清分離，取上清液進行血尿酸檢測即可得到正常的反應曲線，此方法方便、可靠，為日常工作中排除M蛋白對酶法尿酸檢測提供了有效的解決方案。