CTCs、ProGRP、NSE在小細(xì)胞肺癌診斷及預(yù)后評(píng)估中的臨床價(jià)值

賈萬理，楊 陽△，晉 婕

1.西安高新醫(yī)院輸血科，陜西西安 710075；2.西安金域醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)所有限公司，陜西西安 710075

肺癌是臨床上常見的起源于支氣管黏膜或支氣管腺體的惡性腫瘤。在我國，肺癌的發(fā)病率和死亡率均位居各類癌癥之首，而且呈逐年上升的趨勢(shì)[1]。大部分肺癌為非小細(xì)胞肺癌，只有10%～15%的肺癌為小細(xì)胞肺癌[2]。小細(xì)胞肺癌具有低分化、高復(fù)發(fā)、高轉(zhuǎn)移、預(yù)后差、生存期短等特點(diǎn)，患者確診時(shí)大多已發(fā)生轉(zhuǎn)移[3]。因此，早發(fā)現(xiàn)、早治療對(duì)延長肺癌特別是小細(xì)胞肺癌患者生存期具有重要意義。循環(huán)腫瘤細(xì)胞(CTCs)是指從原發(fā)腫瘤病灶或轉(zhuǎn)移灶脫落進(jìn)入外周血的腫瘤細(xì)胞，是目前腫瘤研究中最有前景的項(xiàng)目之一[4]；胃泌素釋放肽前體(ProGRP)是胃泌素釋放肽的前體結(jié)構(gòu)，體內(nèi)水平穩(wěn)定，是小細(xì)胞肺癌的診斷標(biāo)志物之一[5]；神經(jīng)元特異性烯醇化酶(NSE)存在于神經(jīng)元和神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞中，對(duì)小細(xì)胞肺癌手術(shù)治療效果和預(yù)后評(píng)估具有重要臨床價(jià)值[6]。本研究主要探討CTCs、ProGRP、NSE在小細(xì)胞肺癌診斷及預(yù)后評(píng)估中的臨床價(jià)值，旨在為小細(xì)胞肺癌的早期診斷及預(yù)后評(píng)估提供新的思路。

1 資料和方法

1.1一般資料 采用回顧性方法，收集2017年1月到2018年6月西安高新醫(yī)院收治的102例小細(xì)胞肺癌患者作為肺癌組，年齡30～80歲、平均(56.2±8.5)歲，男64例、女38例。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)初次確診為小細(xì)胞肺癌；(2)經(jīng)病理學(xué)、影像學(xué)核實(shí)；(3)預(yù)計(jì)生存期不低于3個(gè)月；(4)臨床資料完整，患者依從性高。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)嚴(yán)重肝、腎功能不全者；(2)合并嚴(yán)重心腦血管疾病者；(3)合并其他惡性腫瘤者；(4)合并其他嚴(yán)重肺部疾病者；(5)感染性疾病者；(6)妊娠期或哺乳期婦女。收集西安高新醫(yī)院收治的同期100例肺部良性腫瘤患者作為良性組，年齡30～80歲、平均(56.1±8.7)歲，男62例、女38例。良性組術(shù)后均經(jīng)病理切片核實(shí)確診為肺部良性腫瘤，無其他惡性腫瘤史。另收集西安高新醫(yī)院同期100例體檢健康者作為對(duì)照組，年齡30～80歲、平均(55.9±8.3)歲，男62例、女38例。3組研究對(duì)象的年齡、性別構(gòu)成差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。本研究符合倫理學(xué)標(biāo)準(zhǔn)且經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)通過，所有研究對(duì)象均簽署知情同意書。

1.2方法 所有研究對(duì)象空腹8 h以上抽取靜脈血2管。一管(ACD枸櫞酸鈉抗凝)5 mL，顛倒混勻數(shù)次，立即進(jìn)行檢測(cè)；另一管(紅色無添加劑試管)3 mL，顛倒混勻數(shù)次,靜置20 min后，以3 000 r/min離心10 min，取上清液(血清)待檢。抗凝血用于CTCs檢測(cè)，先采用免疫磁珠負(fù)向富集法捕獲CTCs，再采用免疫熒光與原位雜交結(jié)合的方法進(jìn)行檢測(cè)，最后采用Cell Search系統(tǒng)進(jìn)行分析。采用羅氏Cobas e602全自動(dòng)電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀及其配套試劑檢測(cè)血清ProGRP、NSE水平。所有步驟由同一檢驗(yàn)師按照試劑盒說明書進(jìn)行操作，室內(nèi)、室間質(zhì)評(píng)均在控。

2 結(jié) 果

2.13組CTCs、ProGRP、NSE水平比較 肺癌組CTCs、ProGRP、NSE水平高于良性組及對(duì)照組，良性組高于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表1。

表1 3組CTCs、ProGRP、NSE水平比較

2.2CTCs、ProGRP、NSE對(duì)小細(xì)胞肺癌的診斷效能分析 ROC曲線結(jié)果顯示CTCs、ProGRP、NSE聯(lián)合檢測(cè)診斷小細(xì)胞肺癌的曲線下面積(AUC)為0.932，靈敏度為92.1%，特異度為90.0%，均優(yōu)于CTCs、ProGRP、NSE單獨(dú)檢測(cè)的AUC、靈敏度和特異度，見表2和圖1。

圖1 CTCs、ProGRP、NSE診斷小細(xì)胞肺癌的ROC曲線

表2 CTCs、ProGRP、NSE對(duì)小細(xì)胞肺癌的診斷效能分析

2.3小細(xì)胞肺癌預(yù)后影響因素的Cox回歸模型分析 Cox回歸模型分析結(jié)果顯示，臨床分期為廣泛期、有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及CTCs、ProGRP、NSE水平升高是小細(xì)胞肺癌預(yù)后不良的獨(dú)立危險(xiǎn)因素(P<0.05)，見表3。

表3 小細(xì)胞肺癌預(yù)后影響因素的Cox回歸模型分析

3 討 論

肺癌是全球發(fā)病率和致死率最高的惡性腫瘤，按組織細(xì)胞學(xué)可分為非小細(xì)胞肺癌和小細(xì)胞肺癌。其中小細(xì)胞肺癌僅占20%左右，但其惡性程度較高，進(jìn)展較快，早期階段就容易發(fā)生轉(zhuǎn)移，預(yù)后較差[8]。臨床上對(duì)中、晚期小細(xì)胞肺癌以化療為主，盡管其對(duì)化療藥物比較敏感，但極易造成繼發(fā)性耐藥[9]。因此，早發(fā)現(xiàn)、早干預(yù)對(duì)改善患者預(yù)后尤為重要。

CTCs檢測(cè)是目前最新的“液體活檢”技術(shù),CTCs是由實(shí)體腫瘤病灶中轉(zhuǎn)移出來而進(jìn)入血液系統(tǒng)、淋巴系統(tǒng)的細(xì)胞，能夠反映腫瘤的發(fā)生、發(fā)展情況以及可能介導(dǎo)腫瘤轉(zhuǎn)移[10]。王瑩等[11]的報(bào)道指出，CTCs在小細(xì)胞肺癌早期診斷、療效評(píng)價(jià)、預(yù)后評(píng)估、復(fù)發(fā)檢測(cè)上具有重要作用。胃泌素釋放肽(GRP)可刺激胃內(nèi)G細(xì)胞分泌胃泌素，收縮平滑肌，促進(jìn)自分泌或細(xì)胞間相互作用而誘發(fā)癌細(xì)胞增殖、分化。ProGRP作為GRP前體，廣泛分布于肺組織神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞及非胃竇組織中，半衰期長，穩(wěn)定性強(qiáng)，更能反映肺癌的臨床情況[12]。NSE屬于神經(jīng)源性蛋白，能夠參與磷酸肌醇的代謝，影響丙酮酸進(jìn)入線粒體的速度，導(dǎo)致肺泡上皮細(xì)胞的異常代謝,促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增殖[13]。本研究結(jié)果顯示，CTCs、ProGRP、NSE水平在小細(xì)胞肺癌中升高，說明這些指標(biāo)均參與了腫瘤的發(fā)生、發(fā)展。采用ROC曲線分析CTCs、ProGRP、NSE單獨(dú)和聯(lián)合檢測(cè)對(duì)小細(xì)胞肺癌的診斷效能，不難發(fā)現(xiàn)，3項(xiàng)指標(biāo)聯(lián)合檢測(cè)可進(jìn)一步提高診斷效能，AUC為0.932，靈敏度和特異度分別分別為92.1%、90.0%，診斷效能比較理想。

小細(xì)胞肺癌按臨床分期可分為廣泛期和局限期。經(jīng)過治療的局限期小細(xì)胞肺癌生存期為1～3年，而廣泛期不足1年[14]。相比較而言，廣泛期小細(xì)胞肺癌預(yù)后較差。淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移是肺癌轉(zhuǎn)移的主要途徑，也是影響患者預(yù)后的重要因素之一，小細(xì)胞肺癌容易發(fā)生轉(zhuǎn)移，一旦發(fā)生轉(zhuǎn)移，其治療難度增大，對(duì)預(yù)后影響較大[15]。本研究利用Cox回歸模型分析小細(xì)胞肺癌預(yù)后的影響因素，結(jié)果顯示，臨床分期為廣泛期、有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及CTCs、ProGRP、NSE水平升高是小細(xì)胞肺癌預(yù)后不良的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。這與上述理論一致，在唐興等[16]、秦文燕等[17]的報(bào)道中也有體現(xiàn)。本研究存在不足之處，如樣本量較小，且為回顧性研究，尚待日后加大樣本量進(jìn)行更深入的研究來佐證結(jié)論的正確性，以期為臨床診療工作提供新的思路。

綜上所述，CTCs、ProGRP、NSE水平在小細(xì)胞肺癌患者中明顯升高，且與患者預(yù)后密切相關(guān)，3項(xiàng)指標(biāo)聯(lián)合檢測(cè)有助于患者早期診斷及預(yù)后評(píng)估，值得臨床推廣應(yīng)用。