基質金屬蛋白酶11、巨噬細胞抑制細胞因子- 1聯合檢測對結直腸癌診斷及預后評估的價值

易默，呂颯美，都慶國，張健，吳友偉

陜西省人民醫院1消化內二科，2普外二科，西安 710068

結直腸癌包括結腸癌和直腸癌，其發病率逐年上升，且日漸年輕化[1]。現臨床對結直腸癌病因的了解并不全面，可能與環境、遺傳、生活習慣、飲食習慣等因素有關。結直腸癌患者前期并無明顯癥狀，到中晚期患者根據體質不同，會有不同程度的便血、腹痛、血尿、里急后重等癥狀。目前臨床治療結直腸癌的主要方法分為局部治療（如手術、放療等）和系統治療（如免疫治療與靶向治療等），如不及時治療則會出現腫瘤轉移、器官衰竭、極度消瘦，嚴重者甚至死亡，所以盡早發現對提高結直腸癌的治療效果有著重要作用[2]。基質金屬蛋白酶11（matrix metalloproteinase 11，MMP11）、血清巨噬細胞抑制細胞因子-1（macrophage inhibitory cytokine-1，MIC-1）可在多種惡性腫瘤中表達，曾有研究表明，MMP11在結直腸癌中表達較高，但MIC-1在結直腸癌中表達一般[3-4]。基于此，本研究旨在觀察MMP11、MIC-1表達對結直腸癌診斷及預后評估的價值。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集2016年4月至2018年4月于陜西省人民醫院住院治療的疑似結直腸癌患者的病歷資料。納入標準：①臨床資料完整且準確；②未存在其他腫瘤疾病；③未患有精神類疾病，愿意配合。排除標準：①曾經接受過治療；②合并其他組織器官疾病；③依從性較差。根據納入、排除標準，共納入92例疑似結直腸癌患者，男50例，女42例；年齡36～79歲，平均（53.29±8.18）歲。本研究經醫院倫理委員會批準通過，所有患者均知情同意并簽署知情同意書。

1.2 檢測方法

所有患者均于入院時抽取靜脈血5 ml，隨后放置室內靜置30 min，采用2800 r/min進行離心處理15 min后收集上層澄清的液體，隨后保存至-80℃中進行備用。采用酶聯免疫吸附測定（enzymelinked immunosorbent assay，ELISA）檢 測 血 清MMP11、MIC-1水平，ELISA試劑盒均購自上海康朗生物科技有限公司，兩種檢測均由同一人完成（檢測方法及流程均嚴格按照說明書進行操作）。聯合檢測為均進行MMP11、MIC-1檢測，其中一項陽性即為陽性。陽性參考試劑盒中標準：MMP11≥5.5 pg/ml為 陽 性 ，MIC-1≥35 pg/ml為 陽 性 。MMP11≥7.5 pg/ml為高表達[5]，MIC-1≥50 pg/ml為高表達[6]。

1.3 觀察指標

以病理結果為金標準，統計92例疑似結直腸癌患者患病情況，比較不同疾病患者MMP11、MIC-1表達情況，分析MMP11、MIC-1對結直腸癌的診斷價值。術后對所有結直腸癌患者進行持續3年隨訪，包括電話、微信、回院復查等方式，統計患者術后3年生存情況，分析影響患者預后的危險因素。

1.4 統計學方法

采用SPSS 22.0軟件進行統計分析，計數資料以例數及率（%）表示，組間比較采用χ2檢驗；計量資料以均數±標準差（±s）表示，組間比較采用t檢驗；影響因素分析采用多元Logistic回歸分析；以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 MMP11、MIC- 1檢測對結直腸癌的診斷價值

以病理結果為金標準，92例疑似結直腸癌患者中確診為結直腸癌75例，良性病變17例（結直腸息肉11例及良性大腸炎6例）。MMP11聯合MIC-1檢測診斷結直腸癌的靈敏度（85.33%）、特異度（82.35%）及準確度（84.78%）分別高于MMP11（68.00%、58.82%、66.30%）及 MIC-1（70.67%、64.71%、69.57%）單獨檢測（表1）。

表1 MMP11、MIC- 1單獨及聯合診斷結直腸癌與病理結果的對照

2.2 不同疾病患者MMP11、MIC- 1表達情況的比較

結直腸癌患者MMP11、MIC-1高表達率均高于結直腸息肉及良性大腸炎患者，差異均有統計學意義（P＜0.05）。（表2）

表2 不同疾病患者MMP11、MIC- 1表達情況的比較[ n（%）]

2.3 結直腸癌患者生存情況

經病理活檢確診的75例結直腸癌患者均經手術治療，術后隨訪3年生存率為73.33%（55/75）。

2.4 不同預后結直腸癌患者臨床特征的比較

生存與死亡結直腸癌患者性別、年齡、原發灶位置比較，差異均無統計學意義（P＞0.05）；生存與死亡結直腸癌患者分化程度、Enneking外科分期、淋巴結轉移情況、MMP11表達情況、MIC-1表達情況比較，差異均有統計學意義（P＜0.05）。（表3）

表3 不同預后結直腸癌患者臨床特征的比較（ n=75）

2.5 結直腸癌患者預后影響因素的多因素分析

多因素分析結果顯示，分化程度為低分化、Enneking外科分期為Ⅲ～Ⅳ期、淋巴結轉移、MMP11高表達和MIC-1高表達均為結直腸癌患者術后死亡的獨立危險因素（P＜0.01）。（表4）

表4 結直腸癌患者預后影響因素的多因素分析

3 討論

結直腸癌患者早期無明顯癥狀，患者于醫院就診時，大多已為中晚期，預后較差，伴隨現代醫學技術的不斷突破，結直腸癌的臨床治療手段日益成熟，但盡早發現、接受治療仍然是延長結直腸癌患者生存時間的關鍵前提[7]。

基質金屬蛋白酶（matrix metalloproteinase，MMP）是一種鋅依賴性內切蛋白水解酶，可以有效降解大部分細胞基底膜與細胞外基質，從而導致細胞外基質代謝出現不平衡的情況，MMP11屬于MMP中間質溶解素的一種，主要分布于器官組織周圍，其作用是可通過控制細胞外基質進行重構，從而推動腫瘤進展、抑制細胞死亡、促進腫瘤細胞存活，正常情況下MMP11在機體中為低表達水平，但在患病情況下常表現為高表達，并在腫瘤轉移與中晚期時發揮重要作用[8-9]。曾有研究表明，不同實體腫瘤中MMP11的表達會有不同增高情況，這與腫瘤的擴散與轉移息息相關[10]。MIC-1是從巨噬細胞中發現的生長因子，可以調節多種細胞的應激反應，作為腫瘤標志物，其主要可抑制細胞與血管的生長，抑制細胞周期進程，但有些研究顯示MIC-1對腫瘤細胞的生長無明顯抑制作用[11]。

本研究旨在對比MMP11、MIC-1對結直腸癌的診斷價值，結果顯示，MMP11聯合MIC-1檢測診斷結直腸癌的靈敏度、特異度及準確度均高于MMP11或MIC-1單獨檢測，表明MMP11聯合MIC-1診斷結直腸癌有較高的準確度。結直腸癌患者中MMP11、MIC-1高表達率均高于結直腸良性病變患者，提示MMP11、MIC-1在結直腸癌組織中呈高表達，與張慧等[11]、陳偉榮等[12]研究結果基本相似，由此提示MMP11、MIC-1可以作為前期檢測結直腸癌患者的生物標志物。謝先木等[13]對MMP11在結直腸癌中的表達及臨床價值進行探索，得出MMP11會隨著患者的惡化程度增高而升高的結論。而趙文雅等[14]研究表明，MIC-1在結直腸癌血清中表達上調，表示其表達高于健康人群，可作為檢查結直腸癌的指標，此外，進一步研究顯示，生存與死亡結直腸癌患者分化程度、Enneking外科分期、淋巴結轉移情況、MMP11表達情況、MIC-1表達情況比較，差異均有統計學意義（P＜0.05）。表明上述因素與術后死亡有一定聯系，隨后進行多因素分析發現，分化程度為低分化、Enneking外科分期為Ⅲ～Ⅳ期、淋巴結轉移、MMP11高表達和MIC-1高表達均為結直腸癌患者術后死亡的獨立危險因素。在臨床中需要重視存在危險因素的患者，術中需更加重視腫瘤清除率，在術后針對此類患者進行綜合性護理，避免術后不良事件發生，提高患者生活質量；MMP11、MIC-1高表達者可進行分子靶向治療，但有關具體藥物的使用需進一步深入研究。

綜上所述，MMP11、MIC-1是影響結直腸癌手術患者預后的危險因素，通過聯合檢測MMP11、MIC-1水平可有效對結直腸癌進行術前診斷、預后評估。