中油桃4 號叢生芽誘導及增殖激素配比試驗

陳 雪

（大連市現代農業生產發展服務中心 大連 116030）

桃[Prunus persica（L.）Batsch]是世界上重要的落葉果樹之一，其果實味道鮮美、營養豐富，頗受消費者歡迎。傳統桃樹育種周期長、工作量大，如何縮短桃的育種時間和提高育種效率是桃樹育種工作者長期追求的目標[1]。中油4 號油桃是由中國農業科學院育成的油桃新品種具有早熟、口感好等優點，中油4 號油桃呈淡黃色，色澤光亮，核較小，果實較大，平均單果質量為156 g，最大可達到202 g。相比于其他同類水果中油4 號油桃質量較優且更加耐長途運輸，是大連地區溫室桃栽培的主要品種，頗受大連地區農戶的歡迎，隨著溫室桃需求的增加，傳統的苗木繁殖方法受時間限制，且易受病害侵染，降低了生產能力，鑒于植物組織培養快繁技術趨于成熟[2-3]，其繁殖的速度快，且不受地區、氣候的影響，可及時提供大量優質種苗。目前在中油桃4 號快速繁殖技術方面還處于空白階段，因此本試驗對中油桃4 號叢生芽誘導及增殖的激素配比進行篩選，旨在為中油桃4 號快速繁殖奠定理論基礎。

1 材料與方法

1.1 無菌外植體 選取1 年生中油桃4 號健壯、無病蟲害的嫩枝莖段為外植體[4]。莖段長度為2 cm，流水沖洗30 min。75%酒精浸泡外植體30 s，無菌水沖洗3 次，再用5% NaClO 浸泡外植體5 min，無菌水沖洗3 次。外植體接種到不同激素（玉米素ZT 和赤霉素GA3）配比的芽誘導培養基中[5]，見表1。接種后置于培養室內光照培養，光照時間為10~12 h/d，光照強度為2 000 lx，培養室溫度25 ±2 ℃[6]。

1.2 芽萌發誘導 每種處理接種60 個外植體于芽萌發誘導培養基中，誘導培養基均以MS 培養基為基本培養基（見表1），培養35 d 后，統計其萌芽率[7]。

表1 芽萌發誘導培養基 /（mg/L）

1.3 叢生芽誘導 經過芽萌發培養后，切取脫毒嫩芽，接種到叢生芽誘導培養基，誘導培養基均以MS 培養基為基本培養基（見表2）。每種處理接種30 個外植體；35 d后統計其平均株高、平均葉片數及增殖系數[8]。平均株高=苗的總高度/苗的總數平均葉片數=葉片總數/苗的總數增殖系數=增殖后的幼芽數/接種的外植體數

表2 叢生芽誘導培養基 /（mg/L）

1.4 生根誘導 叢生芽分切為的單芽，接種到生根培養基，誘導培養基均以MS培養基為基本培養基（見表3）。每種處理接種30 個外植體；35 d 后統計其平均根數、平均根長、平均株高及生根率。平均根數=生根總數/接種外植體數平均根長=根的總長度/根的總數生根率=（生根的外植體數/接種的外植體數）×100%

表3 生根誘導培養基 /（mg/L）

2 結果與分析

2.1 外源激素對中油桃4 號誘導芽萌發的影響 本試驗的9 種芽萌發誘導培養基對中油桃4 號芽萌發的影響差異較大。表4 可見，經9 種處理組合培養基誘導后，都能夠促使中油桃4 號初代外植體萌芽，但以在處理中M6 的萌芽率最高，達到87%，隨著ZT 濃度的增加，萌發率逐漸呈降低趨勢，當ZT在適當的濃度時，GA3對芽萌發的誘導影響較小。

表4 外源激素對中油桃4 號芽萌發誘導的影響

2.2 外源激素對中油桃4 號誘導叢生芽的影響 在MS 培養基中添加不同濃度GA3、ZT 對中油桃4 號帶芽莖段進行增殖培養，培養35 d后的統計結果見表5。

表5 外源激素對中油桃4 號叢生芽誘導的影響

腋芽萌發后再加入GA3（0.5 mg/L）和ZT（3.0 mg/L）的Z2 處理中，中油桃4 號的長勢最好，增殖系數最高可達4.37，高于其他處理。在繼代兩次后統計不同培養基上芽增殖率中發現，ZT 的濃度不易過高，過高影響腋芽的增殖。將叢生芽分割反復進行繼代，能夠獲得大量的無菌苗，可以滿足大批量的規模化生產。

2.3 外源激素對中油桃4 號誘導生根的影響 從表6 可見，9 種處理組合均可誘導中油桃4 號帶芽莖段生根，在MS 為基本培養基的處理組合中，綜合而言，在所有處理組合中以處理S5 的效果最好，其主根粗壯、須根較多，培養苗整體長勢較壯，生根率達到了63%。因此，中油桃4 號最適生根培養基的組成為MS+2,4-D（1.5 mg/L）。

表6 外源激素對中油桃4 號生根誘導的影響

3 結論與討論

本研究對影響中油桃4 號的離體快繁的激素進行分析，初步篩選出芽萌發、叢生芽及生根誘導的培養基配方。最適芽萌發培養基MS+ZT（2.5 mg/L）+GA3（0.5 mg/L）；叢生芽誘導最佳增殖培養基為MS+GA3（3.0 mg/L）+ZT（0.5 mg/L）；最適生根培養基MS+2,4-D（1.5 mg/L）。

同時發現光照度對中油桃4 號增殖培養是影響組培苗光合作用和生長的內在因素。光照為3 000 lx時，增殖系數和平均芽長均最高，植株生長健壯；光照度為0 lx 時，雖然增殖系數較高，但組培苗出現嚴重的徒長、畸形現象，不利于不定芽的生長。