多囊蛋白和纖維囊蛋白在肺癌組織中的定位分布

賴 群，楊慧欣，郝書弘，胡春梅，居欣月，唐 艷*

(吉林大學第二醫院 1.腫瘤血液科；2.乳腺外科，吉林 長春130041)

多囊蛋白-1(PC1)是一種受體樣膜蛋白，含有4302個氨基酸(aa)，一個大的細胞外N末端，11個跨膜結構域和一個細胞內C末端;多囊蛋白-2(PC2)是一種由968 個aa組成的陽離子通道，含六個跨膜結構和細胞內N-和C-末端，并能與PC1形成通道復合體和流量傳感器[1]。常染色體隱性多囊腎病(ARPKD)是由多囊腎肝病1(PKHD1)基因突變引起的，PKHD1編碼纖維囊蛋白(fibrocystin)，它也是一種大蛋白(4074 aa)，具有一個長的細胞外N-末端、一個跨膜結構域和一個細胞質C-末端[2]。除了腎，多囊蛋白在其他非腎臟組織也廣泛表達[3],Hu等在大鼠細支氣管纖毛中也檢測到多囊蛋白和纖維囊蛋白表達[4]。本文探討PC1、PC2和fibrocystin在正常肺組織、肺癌組織中的定位分布，報道如下。

1 材料與方法

1.1 一般資料在知情同意的原則下，本實驗所采用的肺癌(腺癌)及癌旁肺組織石蠟包埋標本從吉林大學第二醫院病理科獲得并經病理診斷證實。

1.2 方法羊抗PC1(SC-130554)、羊抗PC2(SC-10377)均購自Santa Cruz Biotechnology公司；Fibrocytin單克隆抗體來自Xing-Zhen Chen實驗室保存[4]；二抗系Chemicon International公司產品。ABC免疫組化檢測試劑盒購自Vector Laboratories，對二甲胺基偶氮苯(DAB)顯色試劑、蘇木素等均為Abcam公司產品。采用免疫組織化學ABC法，按試劑盒說明書指導步驟進行操作。

2 結果

2.1 PC1、PC2、fibrocystin蛋白在癌旁正常肺組織的表達

通過對癌旁支氣管上皮組織中PC1、PC2、fibrocystin蛋白免疫組化染色檢查，結果顯示：PC1在支氣管淺層上皮細胞的游離面(腔面)著色呈深染，伴胞漿少量著色，提示PC1主要表達于支氣管表淺上皮的游離面胞膜。PC2主要著色于支氣管淺層上皮細胞的胞漿，提示PC2主要表達于支氣管淺層上皮的胞質。Fibrocystin蛋白在支氣管淺層上皮細胞的游離面或纖毛側呈深染，且在基底面和側面也有表達，并伴胞漿著色，表明它在胞膜及胞質均有表達(圖1)。

圖1 癌旁支氣管上皮組織中多囊蛋白和fibrocystin蛋白的表達定位(×400)

2.2 PC1、PC2、fibrocystin蛋白在肺癌的表達

在肺癌組織，PC1、PC2、fibrocystin蛋白免疫組化染色結果顯示：PC1在肺癌細胞的胞膜及胞漿均著色，胞膜呈深染，提示PC1主要表達于肺癌細胞的胞膜。PC2主要著色于肺癌細胞的胞漿，少量胞膜著色且色淺，提示PC2主要表達于肺癌細胞的胞質。Fibrocystin蛋白在胞膜及胞漿均著色，提示它在肺癌細胞胞膜和胞質均存在(圖2)。

圖2 肺癌組織中多囊蛋白和fibrocystin蛋白的表達定位(×400)

3 討論

到目前為止，對多囊蛋白PC1、PC2和fibrocytin的研究主要是在多囊腎病(PKD)的背景下進行的。Guillaume等發現在胎兒和剛出生階段，PC1在肺中的表達高于腎；而成人階段在肺中的表達低于腎[5]。PC1、PC2和fibrocystin都定位于腎上皮的初級纖毛，而PC1定位于細胞膜(質膜)，PC2則位于內質網膜，fibrocystin定位腎初級纖毛的基底體、質膜和細胞質中[6]。三種囊蛋白在大鼠支氣管纖毛表達，存在于支氣管管腔側上皮，即運動纖毛細胞，PC1在細胞膜上表達，PC2定位于靜息細胞的內質網(胞質)，而有絲分裂細胞的紡錘體和中間體上均可檢測到多囊蛋白，并且fibrocystin在整個細胞周期的中心體上均有表達[4]。本研究結果顯示：在成人肺支氣管上皮淺層細胞，PC1主要位于游離面胞膜，PC2主要胞質表達，fibrocystin既表達于游離面胞膜，又在基底面和胞漿等表達。

Gargalionis等描述了結直腸腺癌及癌旁組織的多囊蛋白定位特點：在正常腸黏膜上皮，PC1主要表達在表皮細胞，而在癌細胞則主要是胞漿著色；PC2在淺層和隱匿的正常上皮細胞和腫瘤細胞中僅為胞質表達[7]。本研究在肺癌旁組織支氣管上皮的結果與上述正常腸黏膜上皮的表達相似，組織標本來自肺腺癌，肺癌組織定位結果顯示PC1為胞膜和胞漿表達，PC2主要胞漿著色，也與上述結直腸腺癌組織的結果基本符合。在肺癌組織中，PC1、PC2和fibrocystin均陽性表達，且明顯大于其在正常組織的著色強度和著色范圍，考慮可能與這些多囊蛋白參與腫瘤形成機制相關[7]。