血清胃泌素前體釋放肽在慢性腎臟病中的臨床意義與診斷價值

趙傳燕, 劉昌華, 畢光宇, 陳 蕊, 高 波, 伍 剛,周 剛, 徐 軍, 牟洪賓

(江蘇省蘇北人民醫院 腎內科, 江蘇 揚州, 225001)

胃泌素釋放肽(GRP)是一種含27個氨基酸的生物活性肽，可促進胃泌素的釋放，主要存在于人的神經系統、胃腸道和呼吸道中[1]。但GRP在血清中不穩定(半衰期約為 2 min)，所以很難檢測。血清胃泌素前體釋放肽(proGRP)是GRP的前體，相較于GRP更穩定，是一種生物活性蛋白，可刺激腫瘤細胞增殖，目前已被廣泛應用于小細胞肺癌的臨床評估和檢測中[2]。相關研究[3]發現腎衰竭患者的血清proGRP水平升高，但少有研究指出血清proGRP與腎臟病相關檢測指標的關聯性。本研究探討慢性腎臟病(CKD)患者的血清proGRP表達水平及其與腎臟病檢測指標的相關性，并分析不同透析方式對血清proGRP水平的影響，現報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

回顧性選取2019年1—3月在江蘇省蘇北人民醫院腎內科住院的259例CKD患者作為研究對象。根據改善全球腎臟病預后組織(KDIGO)指南，采用慢性腎臟病流行病學合作研究(CKD-EPI)公式計算估算腎小球濾過率(eGFR)。按照eGFR將未接受透析治療的167例CKD患者分為 5組，其中CKD1期組(eGFR≥90 mL/min)17例、CKD2期組(eGFR為60～<90 mL/min)25例、CKD3期組(eGFR為30～<60 mL/min)37例、CKD4期組(eGFR為15～<30 mL/min)21例、CKD5期組(GFR<15 mL/min)67例; 按照透析方式將接受透析治療的92例CKD患者(均為CKD5期)分為血液透析組55例、腹膜透析組37例。另選取31名健康成人體檢者納入對照組。排除標準: 可能影響血清proGRP水平的惡性腫瘤(如卵巢癌、肺癌和胃腸道癌)患者，合并水腫、胸腔積液、腹水或嚴重心臟功能不全、嚴重營養不良的患者。本研究經江蘇省蘇北人民醫院倫理委員會審核批準。

1.2 方法

使用普通真空采血管采集所有受試者清晨空腹靜脈血3 mL, 3 000 轉/min離心10 min, 分離血清收集于-20 ℃凍存待測。記錄并比較各組受試者性別、年齡和血清肌酐(SCr)、proGRP、尿酸、胱抑素C、白蛋白、β2微球蛋白、血紅蛋白指標水平。proGRP采用雅培i2000化學發光儀檢測, SCr采用貝克曼AU480生化分析儀檢測，試劑為各儀器配套試劑及質控品。依據CKD-EPI公式計算eGFR: eGFR=141×min[SCr(mg/dL)/k或1)]α×max[SCr(mg/dL)/k或1]-1.209×0.993年齡× 1.018(女性)，其中k為0.7(女性)或0.9(男性),α為-0.329(女性)或-0.411(男性), min指取SCr/k或1中的最小值, max指取SCr/k或1中的最大值[4]。

一是企業污染物排放監測數據作假。根據環境保護部督查組的反饋，2017年1月以來，很多地方的企業環境監測數據造假，有的通過監測軟件造假，有的通過檢測設備造假，有的采取檢測方式作假。由于基層環境保護部門監管的專業性不強，在現場發現不了問題，所以2017年初企業數據作假的現象反彈。

1.3 統計學處理

采用SPSS 21.0統計軟件處理數據，計量資料呈偏態分布用[M(P25,P75)]表示，組間比較采用非參數檢驗(Kruskal-Wallis單因素ANOVA分析)，相關性分析采用Spearman相關分析, 2組間比較采用兩樣本 Mann-WhitneyU檢驗，以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1 一般資料和血清proGRP、腎臟病標志物水平比較

血清proGRP是近年來用于輔助診斷小細胞肺癌(SCLC)的生物學標志物，也被用于判斷SCLC的療效和預后[5-6]。相關報道[7]稱, 84.56%腎衰竭患者的proGRP水平高于正常參考值。DAI Z等[8]發現，腎功能不全的SCLC患者的血清proGRP水平高于腎功能正常的SCLC患者或單純CKD患者；進一步分析不同腎病組后發現，CKD組血清proGRP水平顯著升高，而腎實質未受損的其他腎臟疾病組則未升高，說明血清proGRP水平升高與腎功能受損有關，且隨著Scr的升高和eGFR的下降, proGRP呈升高趨勢。

表1 各組一般資料和血清proGRP、腎臟病標志物水平比較[M(P25, P75)][n(%)]

2.2 血清proGRP與腎臟病標志物水平相關性分析

ROC曲線顯示，血清proGRP預測CKD患者eGFR<60 mL/min發生(進展到CKD3期)的曲線下面積(AUC)為0.945, 當血清proGRP最佳截斷值為67.20 pg/mL時，靈敏度為84.1%, 特異度為100.0%, 見圖1。

表2 血清proGRP與腎臟病標志物水平的相關性分析

2.3 血清proGRP預測CKD患者eGFR<60 mL/min發生的ROC曲線

Spearman相關分析顯示，血清proGRP與SCr(r=0.910)、尿素氮(r=0.881)、尿酸(r=0.641)、胱抑素C(r=0.919)、血β2微球蛋白(r=0.855)均呈顯著正相關(P<0.01), 與eGFR(r=-0.917)、血清白蛋白(r=-0.297)和血紅蛋白(r=-0.623)均呈顯著負相關(P<0.01)。見表2。

圖1 血清proGRP預測CKD患者eGFR<60 mL/min發生的ROC曲線

2.4 血液透析組與腹膜透析組年齡、Scr、proGRP比較

腹膜透析組患者年齡小于血液透析組, Scr水平高于血液透析組，差異有統計學意義(P<0.05); 2組患者血清proGRP水平比較，差異無統計學意義(P=0.671)。見表3。

水性丙烯酸酯防水涂料具有優良的防水、耐久、耐熱和耐腐蝕性。這種涂料產生的涂膜延性、彈性均優于其他防水涂料，并且能夠適應涂料基層的變形開裂。而且其溫度適應性強，并且可以調制成各種色彩，使其具有隔熱和裝飾效果[4]。這類涂料主要應用于各類建筑中的防水工程，如鋼筋混凝土、輕骨料混凝土、瀝青和油氈、金屬表面、外墻、衛生間、地下室、冷庫等，也可用作防水層的維修等。

表3 血液透析與腹膜透析患者比較[M(P25, P75)]

3 討 論

CKD3期組、CKD4期組、CKD5期組血清proGRP、SCr、尿素氮、尿酸、胱抑素C和β2微球蛋白水平均高于對照組, eGFR、白蛋白和血紅蛋白水平均低于對照組，差異有統計學意義(P<0.05); CKD4期組、CKD5期組血清proGRP、SCr、尿素氮、胱抑素C和β2微球蛋白水平均高于CKD3期組, eGFR、白蛋白和血紅蛋白水平均低于CKD3期組，差異有統計學意義(P<0.05); CKD5期組血清proGRP、SCr、尿素氮、胱抑素C和β2微球蛋白水平均高于CKD4期組, eGFR、血紅蛋白水平均低于CKD4期組，差異有統計學意義(P<0.05)。見表1。

每次飼喂時以羊自動停止采食，槽內有少許剩料為原則，水桶每天早晚2次換水，保證充足飲水，連續每天記錄每日采食行為、采食量及采食時間。

DUMESNY C等[9]研究表明，健康成人腎中特別是亨利氏環的升支細胞中可檢測出GRP mRNA。與其他激素(如血管加壓素、胰高血糖素和降鈣素)一樣，GRP作為胃腸道肽，可通過從腎小管中的受體重新吸收腎小管中的Na+-K+-2Cl-共轉運蛋白來介導電解質平衡。腎小管重吸收受損并導致體內電解質失衡時，會刺激胃腸道肽，使血液中proGRP水平升高。腎臟是分泌proGRP的主要器官, proGRP可自由通過腎小球基底膜[10]。因此，在腎損傷早期，血清proGRP水平主要受電解質失衡和胃腸道分泌物的影響。當腎衰竭進展至中晚期時，腎小球基底膜受到嚴重破壞，proGRP無法穿過內皮細胞和腎臟基底膜，導致腎小球對proGRP通透性下降而使其積累于血液循環，故血清proGRP濃度上升[11]。隨著腎小球基底膜損傷嚴重程度的增加，血清proGRP水平逐漸升高。CKD患者血清proGRP水平升高的主要原因可能與排泄障礙及代謝紊亂有關[12]。腎功能不全時，腎臟的自主分泌也可能導致proGRP水平升高[3]。

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相關研究[13]顯示, CKD患者伴有一些生物學指標的改變。本研究發現，血清proGRP與尿素氮、尿酸、胱抑素C、血β2微球蛋白呈顯著正相關，與血清白蛋白、血紅蛋白呈顯著負相關，這可能是由于CKD患者出現蛋白質丟失，肝臟等代償性合成某些蛋白質而影響血清proGRP水平, CKD患者存在腎性貧血，血清proGRP升高伴隨腎功能的減退，與UELAND T等[14]研究結論相符。本研究還發現，當血清proGRP最佳截斷值為67.20 pg/mL時，預測患者進展到CKD3期的靈敏度為84.1%, 特異度為100.0%。相關研究[15]發現，當proGRP最佳截斷值為290.91 pg/mL時，其鑒別SCLC與CKD5期的特異度達98.4%, 臨床上可據此進行鑒別診斷。

CKD5期進展至腎臟替代治療階段，血液透析對小分子尿毒癥毒素的清除作用更強，但對中大分子毒素的清除作用不及腹膜透析[16], 有研究[17]發現患者進行血液透析后，血清proGRP水平顯著下降，說明血液透析能清除部分proGRP。相關研究[18-19]指出, proGRP除與SCLC有關，還在其他腫瘤(如胃癌、甲狀腺癌、骨腫瘤等)患者以及心力衰竭患者中表達升高，甚至在炎癥狀態下表達水平也升高。本研究存在一定局限性: 首先，本研究樣本量較小，且未明確尿量是否影響血清proGRP水平; 其次，本研究為橫斷面研究, proGRP通過腎小管中的受體介導電解質平衡的機制需要進一步研究; 最后，本研究未統計SCLC患者的proGRP水平。

綜上所述, CKD患者的血清proGRP水平相較于健康人群有所升高，且隨著CKD分期的增加而逐漸升高，故血清proGRP水平可用于評估CKD病情的嚴重程度。血清proGRP與血清肌酐、尿素氮、尿酸、胱抑素C和血β2微球蛋白呈正相關，與eGFR、血清白蛋白和血紅蛋白呈負相關。若采用血清proGRP輔助診斷SCLC, 臨床應同時檢測患者腎功能，以分辨是否為CKD引起的血清proGRP水平升高。