不規則抗體和冷凝聚素引起血型鑒定和配血困難1例

馬祥斌　張汾　邢杰　石秋

摘要：目的：探討在臨床輸血中疑難血型鑒定及相容配血困難的解決方法。方法：通過臨床病例分析，紅細胞ABO正反血型鑒定，吸收試驗、放散試驗、不規則抗體篩查、直接抗人球蛋白試驗，凝聚胺法、抗人球蛋白卡法交叉配血，正確鑒定ABO血型和交叉配血。結果：冷凝聚素和不規則抗體的存在，給臨床血型確定和交叉配血帶來很大的難度。結論：在臨床輸血中，患者體內的冷凝聚素增多可引起ABO血型鑒定正反不符，不規則抗體引起交叉配血困難，特別是ABO不完全抗體，嚴重干擾輸血相容配合和輸血安全;對于疑難血型鑒定標本，應有針對性選擇不同的方法加以驗證，以防誤報;對于不規則抗體篩查陽性的配血病人，應采用抗體篩查、放散吸附等處理措施，核實可能存在的不完全自身抗體，采用可靠地配血方法，相容性配合血液成分，確保臨床用血安全有效。

關鍵詞：冷凝聚素 不規則抗體 血型鑒定 相容性配血

冷凝聚素是自身抗體的一種，正常人血清中冷凝聚效價不超過1：16^〔1〕.在某些病理或特殊因素的誘導下，冷凝聚素的效價增高，導致血型鑒定困難;自身不規則血型抗體的存在，同樣導致ABO血型正反定型不符，同時也影響交叉配血。直接影響臨床輸血治療的及時性、有效性和輸血安全。現將我院1例含有冷凝聚素和不規則血型抗體患者的血型鑒定及輸血相容配血過程報告如下：

1.臨床病例資料

患者男性，77歲，農民，漢族，既往無手術史、輸血史，因咳嗽、胸悶、喘累、氣促在社區治療四天（用藥不詳）無效，于2020年10月2日以“慢性阻塞性肺病并加重”收入呼吸與危重癥科，重度貧血，后轉入血液科治療。實驗室檢查見：HBG66.4g/L，RBC1.87*10¹²/L，尿隱血+，尿蛋白+，T-BILL42.7nmol/L，D-BILL16.7umol/L，I-BIL26umol/L，LDH896U/L，CPAb（IgM）+，血液抗凝呈沙粒狀，離心血漿為紅色。血型鑒定正反不符，正定型為B型，反定型為O型。懷疑患者血清中存在冷凝聚素或自身抗體。需進一步作血型血清學相關檢查。

2.血型血清學相關檢查

2.1試劑和儀器

2.1.1試劑 抗A抗B單克隆血清（上海血液生物醫藥有限責任公司 批號20190101）反定型紅細胞（長春博迅生物技術有限公司批號20200721）ABO正反定型卡（北京九強生物技術股份有限公司批號GE0120191213）不規則抗體篩查紅細胞（長春博迅生物技術有限公司批號20200803）抗人球蛋白微柱凝膠卡（長春博迅生物技術有限公司批號20200606）凝聚胺試劑（珠海貝索生物技術有限公司批號119062）

2.1.2儀器 愛康Aigel300，TDZ4-WS離心機，FYQ微柱孵育器 45°C恒溫水浴箱。

2.2血型鑒定 常規血型鑒定，離心抗凝標本，按Aigel300操作程序上機自動檢測判讀，發報結果。

2.3吸收試驗 取患者壓積紅細胞鹽水洗滌3次，洗滌后的壓積紅細胞分為三份，標識123號，1份加患者血清1ml，混勻置4°C冰箱1小時，不時震蕩，離心取血清加入2號壓積紅細胞管中，重復操作至3號管，得到的血清作反定型和配血主側用。試驗目的吸收自身抗體和冷凝聚素。

2.4放散試驗 壓積紅細胞洗滌6次，1：3比例配制紅細胞懸液，置45°C水浴箱30分鐘，不時振搖，離心取上清液（放散液），紅細胞作正定型和交叉配血次側用。實驗目的，去除紅細胞上吸附干擾物質和致敏的不完全抗體。

2.5間接和直接抗人球蛋白試驗 用微柱凝膠抗人球蛋白卡，按操作說明執行。

2.6輸血相容試驗 用凝聚胺法和抗人球蛋白卡法進行交叉配血試驗。

3.結果

3.1常規血型鑒定結果見表1，處理前正反定型不符，經放散吸收處理后患者血型為B型。

3.2血型血清學實驗結果見表2.患者不規則抗體篩查陽性，直接抗人球蛋白陽性，血清中有高效價冷凝聚素，患者血清中含有抗B-IgG抗體。

3.3患者處理前和吸收放散處理后的樣本與B型、O型供血樣本用凝聚胺和抗人球蛋白卡法交叉配血都不相容。

4.討論

4.1冷凝聚素是人體內產生的抗自身紅細胞的嗜異性冷抗體，抗體為IgM類，在體外室溫下可與自身紅細胞或ABO系統及其他血型紅細胞發生非特異性凝聚反應;一般健康人血清中含量少，凝集效價小于1：16，高效價冷凝聚素在某些病理情況下如自身免疫性貧血、腫瘤、細菌支原體感染、EB病毒感染等可誘導產生^〔2〕。

4.2不規則抗體是指不符合血型命名原則，抗A、抗B以外的血型抗體，抗體為IgG類，又稱為意外抗體，是引起輸血溶血反應的主要因素之一^〔3〕。不規則抗體的產生主要原因：機體免疫功能異常、惡性腫瘤、輸血、妊娠、燒傷、器官骨髓移植、細菌感染、藥物影響等，不規則抗體是引起機體自身溶血性貧血的主要原因。

4.3本例患者血清中有高效價冷凝聚素，致血液離體自凝，常規血型鑒定正反不符;不規則抗體陽性，直接抗人球蛋白陽性，紅細胞被抗B-IgG抗體致敏，引起患者自身溶血。

4.4有自凝現象的標本，進行血型鑒定和交叉配血時要高度警覺重視，必需進一步進行血型血清學試驗，利用吸收放散等方式，去除冷凝聚素或自身抗體等干擾因素^〔4〕，用不同的檢測方法，準確判斷患者血型，檢測出患者可能存在的意外抗體，選擇合適的配血方法，保證臨床輸血安全。

4.5本例患者血型為B型，不規則抗體陽性，直接抗人球蛋白陽性，患者血清中有抗B-IgG抗體，可判斷該患者為自身免疫溶血性貧血。與B型O型供血者用凝聚胺和抗人球蛋白卡法交叉配血都不相容。依據輸血安全原則，次患者不宜異體輸血。

參考文獻：

[1]劉景漢，蘭烔采.臨床輸血學〔M〕.人民衛生出版社：2011.

[2]楊世明，張勇萍，潘小莉.冷凝聚素綜合征的血清學特征及檢測方法探討[J].細胞與分子免疫學雜志，2006，22（4）：54-543.

〔3〕王憬惺，嚴力行.輸血技術〔M〕.人民衛生出版社，2013.

〔4〕任偉，陳慧欣，韓杰.ABO血型正反定型不一致原因分析及解決策略〔J〕.臨床血液學雜志，2016，29（4）：289-291.346D3776-91A6-4529-A8C4-F2612466EBF5