月月青化學成分研究

張盼 封云倩 劉紅云 羅國勇

摘要 [目的]闡明民族藥月月青的化學成分。[方法]通過利用Sephadex LH-20、MCI gel、硅膠等多種柱色譜方法以及制備薄層法對月月青地上部分進行分離純化，根據波譜數據并結合文獻比對解析化學結構。[結果]從月月青中分離得到8個化合物，分別鑒定為植醇、丹皮酚、聚戊烯醇、1-十二醇、黑麥草內酯、單棕櫚酸甘油酯、大黃素甲醚-8-O-β-D-葡萄糖苷、大黃素-8-O-β-D-葡萄糖苷。[結論]所有化合物均為首次從該植物中分離得到。

關鍵詞 月月青;分離純化;化學成分;波譜技術

中圖分類號 R284.1? 文獻標識碼 A? 文章編號 0517-6611（2022）07-0173-03

doi：10.3969/j.issn.0517-6611.2022.07.040

開放科學（資源服務）標識碼（OSID）：

Study on the Chemical Constituents of Itea ilicifolia

ZHANG Pan， FENG Yun-qian， LIU Hong-yun et al

（College of Pharmacy， Guizhou University of Traditional Chinese Medicine， Guiyang， Guizhou 550025）

Abstract [Objective]To study the chemical constituents of Itea ilicifolia. [Method]Sephadex LH-20， MCI gel， silica gel column chromatography methods coupled with preparative thin-layer method were used to separate and purify compounds from the aerial part of Itea ilicifolia， and the chemical structure was elucidated based on spectral data and comparison with literature data. [Result]8 compounds were finally obtained and identified as phytol， paeonol， polyprenol ， 1-dodecanol， loliolide， glyceryl monopalmitate， physclon-8-O-β-D-glucopyranoside， emodin-8-O-β-D-glucopyranoside， respectively. [Conclusion] All compounds are identified from this plant for the first time.

Key words Itea ilicifolia;Separation and purification;Chemical constituents;Spectroscopic technique

月月青，別名為長穗狗骨、牛尾巴菜等，是虎耳草科鼠刺屬植物冬青葉鼠刺（Itea ilicifolia Oliv.），其性平，具清熱止咳、滋補肝腎等功效，在民間常用于勞虛咳嗽、咽喉干痛、目赤、跌打損傷、扭傷等疾病的治療[1]。月月青具有巖生、旱生、喜鈣及喜光的生態適應性，為喀斯特地貌的典型優勢樹種，廣泛分布在湖北西部、陜西南部、貴州以及四川部分等地

區，資源豐富[2-3]。目前，關于月月青化學成分的研究較少，從中鑒定的化學成分類型主要包括黃酮類、木脂素類和烷醇類等[4-6]。其中，3-甲酰基-2-芳基苯并呋喃類成分iteafuranal A表現出顯著的抗氧化[5]和抗肝癌活性[7]。為進一步明確月月青的化學組成，并為后續活性先導結構的發現奠定基礎，筆者對月月青枝葉部分的乙醇提取物開展化學成分研究。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1

儀器。Bruker Avance Neo 400M 核磁共振波譜儀（德國Bruker公司，TMS為內標）;N-1300D 旋轉蒸發儀（東京理化器械株式會社）;ME204102電子天平（上海梅特勒-托利多儀器有限公司）;ZF-1三用紫外分析儀（鄭州良表儀器設備有限公司）;HDG -9240A電熱鼓風干燥箱（上海一恒科學儀器有限公司）;DK-98-Ⅱ電子調溫萬用電爐（天津天泰儀器有限公司）。

1.1.2

試劑。Sephadex LH 20 凝膠（GE Healthcare Bio Sciences AB 公司）;MCI樹脂（日本三菱化學株式會社）;柱層析硅膠和GF254薄層層析硅膠（青島海洋化工有限公司）;10%硫酸乙醇顯色劑;所有溶劑均為工業級，使用前均經過蒸餾處理。

1.1.3 試材。

試驗藥材于2019 年11月采自貴州省務川仡佬族苗族自治縣紅絲鄉土內村。植物標本由貴州中醫藥大學藥學院王志威副教授鑒定為虎耳草科冬青葉鼠刺（Itea ilicifolia Oliv.），標本現收藏于貴州中醫藥大學苗醫藥重點實驗室。

1.2 方法

取干燥的月月青枝葉粗粉25.0 kg，常溫下以20 L 95% EtOH浸提3次，每次7 d。過濾，合并3次提取液，減壓回收乙醇得到總浸膏2.0 kg。總浸膏分散于2 L水中，依次以石油醚（3 L×3）、乙酸乙酯（3 L×3）、正丁醇（3 L×3）進行萃取，減壓條件下分別回收溶劑得石油醚部位（P，17.0 g）、乙酸乙酯部位（E，900.0 g）、正丁醇部位（B，200.0 g）。

乙酸乙酯部位經硅膠柱層析，以石油醚/乙酸乙酯進行梯度洗脫（1∶0→0∶1），得到8個亞組分E1～E8。組分E1（5.4 g）經反復硅膠柱層析得化合物1（12.0 mg）和化合物2（7.0 mg）。組分E2（9.2 g）先后經硅膠柱色譜、凝膠柱色譜（二氯甲烷/甲醇1∶1）以及制備薄層色譜得化合物3（18.0 mg）和4（10.9 mg）。組分E5（7.0 g）經MCI柱色譜，得7個亞組分E5A～E5G。其中，組分E5B溶液放置一定時間后析出白色固體，即化合物5（9.5 mg）。E5C（677.1 mg）經反復硅膠柱層析后，薄層制備得化合物6（4.3 mg）。組分E7（3.9 g）以二氯甲烷/甲醇（15∶1）經硅膠柱色譜后得到11個亞組分E7D1～E7D11，其中，組分E7D6溶液放置后析出黃色顆粒物，即化合物7（5.0 mg）。組分E7D9溶液經放置后析出黃色片狀物，即化合物8（19.5 mg）。

2 結果與分析

從月月青中分主得到8個化合物，其結構如圖1所示。所有化合物均為首次從該植物中分離得到。

2.1 化合物1

黃色油狀物;1H NMR（ MHz，CDCl 3）δ 5.40（1H，tq，J=7.0，1.3 Hz，H-2），4.15（2H，d，J=6.9 Hz，H-1），1.99（2H，dt，J=8.6，5.6 Hz，H-4），1.66（3H，d，J=1.4 Hz，H-20），1.52（1H，dt，J=13.3，6.7 Hz，H-15），0.86（6H，J=6.6 Hz，H-16/17），0.85（3H，d，J=6.6 Hz，H-18），0.84（3H，d，J=6.5 Hz，H-19）;13C NMR（151 MHz，CDCl 3）δ 140.47（C-3），123.16（C-2），59.55（C-1），40.01（C-4），39.49（C-14），37.55（C-10），37.48（C-8），37.41（C-12），36.78（C-6），3293（C-7），32.82（C-11），28.12（C-15），25.26（C-5），2494（C-13），24.61（C-9），22.87，22.77（C-16，C-17），1989，19.86（C-18，C-19），16.32（C-20）。以上數據與文獻[8]報道的數據基本一致，故將該化合物鑒定為植醇。

2.2 化合物2

粉色油狀物;1H NMR（600 MHz，CDCl 3）δ 12.75（1H，s，2-OH），7.63（1H，d，J=8.9 Hz，H-6），6.44（1H，dd，J=8.8，2.5 Hz，H-5），6.42（1H，d，J=2.5 Hz，H-3），3.84（3H，s，4-OCH 3），2.56（3H，s，—COCH 3）;13C NMR（151 MHz，CDCl 3）δ 202.73（—COCH 3），166.28（C-2），16544（C-4），132.44（C-6），114.06（C-1），107.81（C-5），100.98（C-3），55.72（4-OMe），26.37（—COCH 3）。以上數據與文獻[9]報道的數據基本一致，故將該化合物鑒定為丹皮酚。

2.3 化合物3

白色油狀物;1H NMR（600 MHz，CDCl 3）δ 544（1H，td，J=7.2，1.6 Hz，CH），5.15-5.08（11H，m，CH），4.09（2H，d，J=7.1 Hz，CH 2OH），2.10～1.97（40H，m），1.74（3H，d，J=1.2 Hz），1.68（21H，d，J=3.1 Hz），1.60（12H，t，J=3.8 Hz）;13C NMR（151 MHz，CDCl 3）δ 140.04，136.23，135.52，135.43，135.39，135.35，135.12，135.04，13140，125.17，125.14，125.08，125.03，124.67，124.60，12455，124.41，124.38，124.28，59.17，39.91，39.88，32.38，32.36，32.33，32.14，26.92，26.83，26.79，26.55，26.52，2646，25.84，23.61，23.58，23.51，17.83，16.14。以上數據與文獻[10]報道的數據基本一致，故將該化合物鑒定為聚戊烯醇。

2.4 化合物4

白色粉末狀固體;1H NMR（600 MHz，CDCl 3）δ 3.64（2H，t，J=6.6 Hz，H-1），1.56（2H，m，H-2），125（18H，s，H-3～H-11），0.88（3H，t，J=7.0 Hz，H-12）;13C NMR（151 MHz，CDCl 3）δ 63.49（C-1），33.19（C-2），32.30（C-3），30.07～29.81（C-5～C-9），29.73（C-4），26.11（C-10），23.06（C-11），14.48（C-12）。以上數據與文獻[11]報道的數據基本一致，故將該化合物鑒定為1-十二醇。

2.5 化合物5

白色晶體;1H NMR（600 MHz，MeOH-d 4）δ 5.75（1H，s，H-7），4.22（1H，p，J=3.4 Hz，H-3），2.42（1H，dt，J=13.5，2.7 Hz，H-4β），1.99（1H，dt，J=14.4，2.7 Hz，H-2β），1.76（3H，s，H-11），1.75（1H，overlap，H-4α），1.53（1H，dd，J=14.4，3.7 Hz，H-2α），1.47（3H，s，H-9），1.28（3H，s，H-10）;13C NMR（151 MHz，MeOH-d 4）δ 185.70（C-6），174.45（C-8），113.33（C-7），88.97（C-5），67.25（C-3），47.97（C-2），46.43（C-4），37.19（C-1），31.01（C-10），2743（C-11），26.96（C-9）。以上數據與文獻[12]報道的數據基本一致，故將該化合物鑒定為黑麥草內酯。

2.6 化合物6

白色粉末;1H NMR（600 MHz，CDCl 3）δ 4.21（1H，dd，J=11.6，4.5 Hz，H-1a），4.15（1H，dd，J=11.7，6.2 Hz，H-1b），3.93（1H，ddd，J=10.3，6.0，4.3 Hz，H-2），370（1H，dd，J=11.4，4.0 Hz，H-3a），3.60（1H，dd，J=11.5，5.7 Hz，H-3b），2.35（2H，t，J=7.6 Hz，H-2′），1.65～1.61（2H，m，H-15′），1.34～1.26（24H，m，H-3′～H-14′），0.88（3H，t，J=7.0 Hz，H-16′）;13C NMR（151 MHz，CDCl 3）δ 17451（C-1′），70.43（C-2），65.32（C-1），63.48（C-3），3431（C-2′），32.08（C-3′），29.85～29.28（C-4′～C-13′），25.07（C-14′），22.84（C-15′），14.27（C-16′）。以上數據與文獻[13]報道的數據基本一致，故將該化合物鑒定為單棕櫚酸甘油酯。

2.7 化合物7

黃色顆粒物;1H NMR（600 MHz，DMSO-d 6）δ 13.08（1H，s，1-OH），7.49（1H，d，J=1.0 Hz，H-4），7.36（1H，d，J=2.5 Hz，H-5），7.18（2H，m，H-217），5.17（1H，d，J=7.7 Hz，H-1′），5.13（1H，d，J=5.3 Hz，—OH），5.12（1H，d，J=4.9 Hz，—OH），5.11（1H，d，J=5.2 Hz，—OH），4.68（1H，t，J=5.7 Hz，6′-OH），3.96（3H，s，6-OCH 3），3.76～3.71（1H，m，H-6′a），3.50～3.42（3H，m，H-2′/3′/6′b），3.33（overlap，H-4′），3.18（1H，td，J=8.7，5.3 Hz，H-5′），2.41（3H，s，3-CH 3）;13C NMR（151 MHz，DMSO-d 6）δ 186.49（C-9），181.94（C-10），164.74（C-6），161.72（C-8），160.71（C-1），147.15（C-3），136.37（C-10α），132.09（C-4α），124.27（C-2），119.39（C-4），114.49（C-9α），114.46（C-8α），10734（C-7），106.50（C-5），100.62（C-1′），77.45（C-5′），76.61（C-3′），73.25（C-2′），69.79（C-4′），60.78（C-6′），56.10（6-OCH 3），21.42（3-CH 3）。以上數據與文獻[14]報道的數據基本一致，故將該化合物鑒定為大黃素甲醚-8-O-β-D-葡萄糖苷。

2.8 化合物8

黃色片狀物;1H NMR（600 MHz，DMSO-d 6）δ 13.16（1H，s，1-OH），11.25（1H，s，6-OH），7.45（1H，brs，H-4），7.27（1H，d，J=2.4 Hz，H-5），7.15（1H，s，H-2），6.99（1H，d，J=2.4 Hz，H-7），5.11（1H，d，J=5.3 Hz，—OH），508（1H，d，J=5.3 Hz，—OH），5.07（1H，d，J=4.6 Hz，—OH），5.05（1H，d，J=7.6 Hz，H-1′），4.61（1H，t，J=5.8 Hz，6′-OH），371（1H，ddd，J=11.9，5.3，2.1 Hz，H-6′a），354～3.47（1H，m，H-6′b），3.45～3.36（2H，m，H-2′/3′），3.33（overlap，H-4′），3.23（1H，dd，J=9.3，5.2 Hz，H-5′），2.39（3H，s，3-CH 3）;13C NMR（151 MHz，DMSO-d 6）δ 186.74（C-9），182.42（C-10），164.44（C-6），162.01（C-8），161.36（C-1），147.21（C-3），136.79（C-10a），132.38（C-4a），124.48（C-2），11955（C-4），114.75（C-8a），113.62（C-9a），10859（C-5/7），101.04（C-1′），77.58（C-3′），7669（C-5′），73.55（C-2′），69.73（C-4′），60.85（C-6′），21.69（3-CH 3）。以上數據與文獻[15]報道的數據基本一致，故將該化合物鑒定為大黃素-8-O-β-D-葡萄糖苷。

3 結論與討論

對月月青的枝葉部分開展化學成分研究，從中共分離鑒定8個化合物，包括醇類3個（植醇、聚戊烯醇、1-十二醇）、酚類3個（丹皮酚、大黃素甲醚-8-O-β-D-葡萄糖苷、大黃素-8-O-β-D-葡萄糖苷）、倍半萜1個（黑麥草內酯）和脂肪酸酯1個（單棕櫚酸甘油酯）。所有化合物均為首次從月月青中分離得到，進一步明確和拓展月月青的化學成分組成。此外，通過文獻調研發現，聚戊烯醇能增強認知能力，可用于腦部位的疾病[16];大黃素甲醚-8-O-β-D-葡萄糖苷可以誘導宮頸癌細胞凋亡[17];植物醇、丹皮酚和黑麥草內酯均表現出抗炎潛力[18-20]。該研究的發現有助于闡明月月青民間用途的科學內涵，為該藥用資源的高效合理利用奠定堅實基礎。

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