結(jié)核性漿膜炎圖文報(bào)告中淋巴細(xì)胞百分比與ADA、LDH、總蛋白的相關(guān)性分析

王海鮮 吳茅

結(jié)核性漿膜炎是最常見的肺外結(jié)核，且近幾年發(fā)病率逐漸升高。早期臨床癥狀不典型，難以根據(jù)積液生化常規(guī)及臨床表現(xiàn)診斷。目前結(jié)核性漿膜炎的診斷金標(biāo)準(zhǔn)是結(jié)核桿菌的培養(yǎng)及病理組織的活檢，但兩者的診斷陽性率均較低，且耗時(shí)長。近年來，隨著細(xì)胞圖文報(bào)告形態(tài)學(xué)的研究，發(fā)現(xiàn)漿膜積液中淋巴細(xì)胞比例的升高在結(jié)核性漿膜炎診斷中具有重要價(jià)值。本文探討臨床診斷為結(jié)核性漿膜炎的患者積液圖文報(bào)告的淋巴細(xì)胞百分比與腺苷脫氨酶（ADA）、乳酸脫氫酶（LDH）、總蛋白的相關(guān)性。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 收集2013年1月至2019年12月本院漿膜炎伴有積液患者352例。其中臨床確診結(jié)核性積液的患者277例，排除結(jié)核性腎盂積液、關(guān)節(jié)結(jié)核性積液、結(jié)核性皮膚膿腫、結(jié)核性脊柱炎、結(jié)核性淋巴管炎及未做積液生化和圖文報(bào)告的患者，共納入221例為觀察組。按淋巴細(xì)胞比例分為觀察組1（淋巴細(xì)胞比例≤60%），觀察組2（60%＜淋巴細(xì)胞比例≤80%），觀察組3（淋巴細(xì)胞比例＞80%），另取圖文報(bào)告診斷為慢性非特異性炎癥患者75例為對照組。

1.2 方法 （1）涂片制作及圖文報(bào)告分析：取8～10 mL積液于專用帶蓋的EDTA-K2干粉抗凝管，顛倒混勻，保證樣本無凝塊。經(jīng)1,500 r/min離心10 min后，吸盡上清液，留下殘?jiān)?0～20μL，混勻后推制1～3張涂片。自然晾干，瑞特-吉姆薩染液染色，置于油鏡下在涂片體尾交界處“弓”字形分類100個(gè)有核細(xì)胞，在顯微攝像系統(tǒng)攝圖并作彩色圖文報(bào)告分析，得出淋巴細(xì)胞百分比。（2）積液生化項(xiàng)目的檢測： ADA、LDH、總蛋白的測定使用BACKMAN-COULTER 5831全自動生化儀，LDH、總蛋白采用BACKMAN配套試劑盒，ADA采用北京利德曼公司試劑盒。每個(gè)患者抽取積液5 mL，離心后取上清液按試劑說明書進(jìn)行相關(guān)項(xiàng)目檢測。各項(xiàng)指標(biāo)嚴(yán)格按照本實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化程序檢測，且每日室內(nèi)質(zhì)控均在控。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 25.0統(tǒng)計(jì)軟件。計(jì)量資料以（±s）表示，采用單因素ANOVA分析，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 結(jié)核性積液患者在不同淋巴細(xì)胞分組中的人數(shù)分布 見圖1。

圖1 結(jié)核性積液患者在不同淋巴細(xì)胞分組中的人數(shù)分布

2.2 各組積液中ADA、LDH、總蛋白檢測結(jié)果比較 結(jié)核性積液中ADA、LDH、總蛋白在各觀察組與對照組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.001），而各觀察組間比較差異無無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。（P＞0.05）。見表1。

表1 各組積液中ADA、LDH、總蛋白檢測結(jié)果比較

3 討論

肺外結(jié)核2017年我國最新標(biāo)準(zhǔn)定義為發(fā)生在肺組織、氣管、支氣管和胸膜以外器官的結(jié)核［1］。近10年，肺外結(jié)核比例從29.8%增加至31.4%，在肺外結(jié)核患者中，胸膜結(jié)核增幅更大［2］。ALBERTO等［3］研究顯示，當(dāng)胸腔積液ADA水平≥40 U/L，且胸腔積液中淋巴細(xì)胞比例≥50%時(shí)，對結(jié)核性胸膜炎診斷的敏感度為89%、特異度為92.7%。作者前期研究也表明，常規(guī)胸腹水細(xì)胞圖文報(bào)告中淋巴細(xì)胞比例＞80%的臨床診斷陽性率符合率為78.8%［4］。這些研究均揭示了結(jié)核性積液的細(xì)胞特性，給該疾病的診斷提供新的研究思路。

結(jié)核性漿膜炎的發(fā)病機(jī)制是結(jié)核菌感染引起機(jī)體遲發(fā)性超敏反應(yīng)，在此基礎(chǔ)上，結(jié)核菌的結(jié)核蛋白進(jìn)入漿膜腔引起漿膜炎癥反應(yīng)，導(dǎo)致淋巴細(xì)胞分化增殖，漿膜 CD4+T細(xì)胞選擇性增多，繼而引起 ADA升高［5］。且該酶的活性與淋巴細(xì)胞的激活、分化與增殖有明顯的相關(guān)性［6］。YUAN等研究表明參與核酸代謝的ADA酶活性隨侵犯組織核酸代謝增高而增高［7］。LDH是一種含鋅的糖酵解酶，存在于機(jī)體所有組織細(xì)胞的胞質(zhì)內(nèi)，因此當(dāng)機(jī)體組織受損時(shí)，積液中LDH 活性增加［8］，是臨床觀察肝臟功能或心肌損傷等人體炎癥反應(yīng)的參考指標(biāo)。肺炎、肺結(jié)核、結(jié)核性漿膜炎會造成組織壞死，血清及周圍組織中的LDH進(jìn)入漿膜腔導(dǎo)致積液中LDH升高。LDH數(shù)值越高，表示炎癥越嚴(yán)重。本資料結(jié)果表明，結(jié)核性漿膜炎時(shí)，LDH在積液中含量比慢性非特異性炎癥患者升高，組織的受損程度高于慢性非特異性炎癥，但是升高的程度和淋巴細(xì)胞的比例無相關(guān)性，間皮細(xì)胞和巨噬細(xì)胞比例和LDH酶活性無相關(guān)性。

漿膜腔積液中的漏出液是血漿滲透壓降低或血管內(nèi)壓力增高等因素形成的非炎癥性積液，常見疾病為充血性心力衰竭、肝硬化和腎病綜合征等。滲出液是毛細(xì)血管壁的通透性改變等因素所致，常見疾病為惡性腫瘤、結(jié)核性疾病、細(xì)菌感染等［9］。臨床上一般以總蛋白含量30 g/L作為滲出液和漏出液的界定值，當(dāng)胸腔積液中的總蛋白含量＞30 g/L時(shí)，稱為滲出液。胡慶剛等研究表明總蛋白以40.7 g/L為截?cái)嘀担\斷結(jié)核性胸腹水的靈敏度為89.0%，特異度為81.8%［10］。本資料結(jié)果表明，結(jié)核性漿膜炎蛋白濃度高于慢性非特異性炎癥患者，考慮可能是由于肺結(jié)核為炎癥反應(yīng)，局部炎癥反應(yīng)相對較重，導(dǎo)致漿膜腔積液中蛋白滲出增多所致，但總蛋白的升高和淋巴細(xì)胞的百分比無相關(guān)，從而說明局部炎癥的嚴(yán)重程度跟淋巴細(xì)胞比例并無相關(guān)性。

綜上所述，結(jié)核性漿膜炎的患者積液中ADA、LDH、總蛋白的含量明顯升高，但其升高程度與淋巴細(xì)胞所占百分比的高低無相關(guān)性。如淋巴細(xì)胞百分比明顯升高同時(shí)伴ADA或LDH或總蛋白升高，則結(jié)核性漿膜炎診斷的陽性率會明顯提高。