我國(guó)部分地區(qū)病死畜禽無(wú)害化處理中心病原滅活情況調(diào)查

李 鵬，王 娟，趙肖璟，王 棟，任穎超，張喜悅，曾繁鋼，陳小強(qiáng)，蔣正軍，蔡麗娟，王君瑋

（1.中國(guó)動(dòng)物衛(wèi)生與流行病學(xué)中心，山東青島 266032；2.內(nèi)蒙古興安盟動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，內(nèi)蒙古興安盟 137400；3.扎賚特旗動(dòng)物疫病預(yù)防控制與檢疫中心，內(nèi)蒙古興安盟 137600）

根據(jù)《農(nóng)業(yè)部關(guān)于印發(fā)<病死及病害動(dòng)物無(wú)害化處理技術(shù)規(guī)范>的通知》（農(nóng)醫(yī)發(fā)〔2017〕25 號(hào)）有關(guān)無(wú)害化處理技術(shù)要點(diǎn)及我國(guó)無(wú)害化處理產(chǎn)業(yè)發(fā)展情況，我國(guó)現(xiàn)有無(wú)害化處理中心采用的技術(shù)工藝主要包括化制法、高溫法、酸解法、碳化焚燒法和生物發(fā)酵法[1]。為了解這些方法的病死畜禽無(wú)害化處理病原滅活情況，根據(jù)農(nóng)業(yè)農(nóng)村部畜牧獸醫(yī)局工作安排，2020 年對(duì)11 個(gè)省級(jí)行政區(qū)的52 個(gè)病死畜禽無(wú)害化處理中心（以下簡(jiǎn)稱(chēng)“無(wú)害化處理中心”）開(kāi)展問(wèn)卷調(diào)查和抽樣檢測(cè)。抽樣涉及處理終端產(chǎn)物、儲(chǔ)存地點(diǎn)、運(yùn)輸車(chē)輛等環(huán)節(jié)，檢測(cè)豬瘟病毒（CSFV）、豬繁殖與呼吸綜合征病毒（PRRSV）、口蹄疫病毒（FMDV）、非洲豬瘟病毒（ASFV）等4 種病毒核酸污染狀況，并對(duì)部分陽(yáng)性樣品進(jìn)行病原活性驗(yàn)證，以期掌握病死畜禽無(wú)害化處理終端產(chǎn)物中病毒核酸存在狀況和病原活性狀況，以及因環(huán)境等外部因素導(dǎo)致終端產(chǎn)物污染病原情況，分析終端產(chǎn)物傳播疫病的風(fēng)險(xiǎn)。

1 材料與方法

1.1 調(diào)查范圍

項(xiàng)目組對(duì)山東、河南、四川、湖南、河北、遼寧、廣東、廣西、江蘇、江西、福建等11 個(gè)?。ㄗ灾螀^(qū)）的52 個(gè)無(wú)害化處理中心（采用化制法39 個(gè)、發(fā)酵法11 個(gè)、碳化法1 個(gè)、酸解法1 個(gè)）開(kāi)展了現(xiàn)場(chǎng)調(diào)查和樣品采集，對(duì)樣品進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)室病毒核酸檢測(cè)，并對(duì)陽(yáng)性樣品進(jìn)行了病原活性驗(yàn)證。

1.2 樣品采集

從處理終端產(chǎn)物、產(chǎn)物儲(chǔ)存場(chǎng)所、轉(zhuǎn)運(yùn)工具、產(chǎn)物運(yùn)輸車(chē)以及生產(chǎn)車(chē)間等不同環(huán)節(jié)，共采集樣品916 份（表1），低溫冷藏運(yùn)輸至實(shí)驗(yàn)室開(kāi)展檢測(cè)驗(yàn)證。

表1 病死畜禽無(wú)害化處理中心各環(huán)節(jié)樣品分布 單位：份

1.3 病毒核酸檢測(cè)

采用PCR 法或熒光定量PCR 法，對(duì)樣品進(jìn)行CSFV、PRRSV、FMDV、ASFV 4 種病毒核酸檢測(cè)。

1.4 病原活性檢測(cè)

為驗(yàn)證核酸檢測(cè)陽(yáng)性樣品的病原活性，由國(guó)家口蹄疫參考實(shí)驗(yàn)室（蘭州獸醫(yī)研究所）、國(guó)家非洲豬瘟參考實(shí)驗(yàn)室（中國(guó)動(dòng)物衛(wèi)生與流行病學(xué)中心外來(lái)病中心）及中國(guó)動(dòng)物衛(wèi)生與流行病學(xué)中心相關(guān)職能監(jiān)測(cè)室，對(duì)核酸陽(yáng)性樣品（包括出料口、終端產(chǎn)物、儲(chǔ)存環(huán)節(jié)、轉(zhuǎn)運(yùn)工具樣品）采用組織細(xì)胞培養(yǎng)法進(jìn)行病毒活性驗(yàn)證試驗(yàn)。

1.5 問(wèn)卷調(diào)查

根據(jù)前期文獻(xiàn)研究[2-7]制作電子調(diào)查問(wèn)卷，共發(fā)放調(diào)查問(wèn)卷52 份，發(fā)放問(wèn)卷全部收回。調(diào)查問(wèn)卷分三部分內(nèi)容：第一部分為企業(yè)基礎(chǔ)信息，涉及企業(yè)地理信息、資質(zhì)、監(jiān)管、業(yè)務(wù)及運(yùn)行情況；第二部分為處理工藝及產(chǎn)品信息，涉及處理工藝、工藝參數(shù)、處理產(chǎn)能、病死動(dòng)物來(lái)源與收集、無(wú)害化處理產(chǎn)物儲(chǔ)存與銷(xiāo)售、場(chǎng)區(qū)消毒及無(wú)害化處理補(bǔ)貼情況；第三部分為企業(yè)自評(píng)，涉及無(wú)害化處理中心場(chǎng)區(qū)布局、生產(chǎn)管理、人員管理、消毒制度等內(nèi)容。

2 結(jié)果與分析

2.1 問(wèn)卷調(diào)查

2.1.1 處理工藝 52 家無(wú)害化處理中心中，75%采用化制法，21%采用發(fā)酵法，2%采用酸解法，2%采用碳化法。此外，部分企業(yè)建有多條生產(chǎn)線，同時(shí)使用干法化制與生物發(fā)酵工藝、高溫化制與硫酸分解工藝、干法化制與直接焚燒工藝等。本次調(diào)查以實(shí)際運(yùn)行生產(chǎn)線為無(wú)害化處理中心分類(lèi)依據(jù)。

2.1.2 風(fēng)險(xiǎn)因素

2.1.2.1 病死動(dòng)物來(lái)源 無(wú)害化處理中心處理的病死動(dòng)物及動(dòng)物產(chǎn)品來(lái)源于規(guī)模飼養(yǎng)場(chǎng)、散養(yǎng)戶、屠宰場(chǎng)以及執(zhí)法罰沒(méi)等環(huán)節(jié)，其中95%的處理中心接收規(guī)模飼養(yǎng)場(chǎng)病死動(dòng)物，93%的處理中心接收散養(yǎng)戶病死動(dòng)物，78%的處理中心接收屠宰場(chǎng)病死動(dòng)物及動(dòng)物產(chǎn)品，80%的處理中心接收?qǐng)?zhí)法罰沒(méi)病死動(dòng)物及動(dòng)物產(chǎn)品等。

“你不知道嗎？”女人笑笑，“我接近他的目的就是為了讓你和他老婆拆伙。既然任務(wù)已經(jīng)完成，我當(dāng)然不會(huì)再留在他的身邊?！?/p>

2.1.2.2 病死動(dòng)物種類(lèi) 所有無(wú)害化處理中心均處理病死生豬，其中一半以上的企業(yè)還處理病死牛、羊和禽類(lèi)，還有將近半數(shù)的企業(yè)處理野生動(dòng)物、毛皮動(dòng)物等其他動(dòng)物及動(dòng)物產(chǎn)品。

2.1.2.3 病死動(dòng)物收集運(yùn)輸 93%的無(wú)害化處理中心自行收集病死畜禽，32%的企業(yè)接收政府收集的病死畜禽，29%的企業(yè)接收養(yǎng)殖戶自送的病死畜禽；17%的企業(yè)有政府配備病死畜禽收集車(chē)輛，88%的企業(yè)自備病死畜禽收集車(chē)輛，10%的企業(yè)還會(huì)租賃車(chē)輛開(kāi)展病死畜禽收集工作；93%的病死畜禽收集車(chē)輛為密閉式貨車(chē)，剩余7%為開(kāi)放式貨車(chē)。

2.1.2.4 終端產(chǎn)物儲(chǔ)存 44%的無(wú)害化處理中心將肉骨粉貯存在密閉環(huán)境（庫(kù)房），其余56%的企業(yè)貯存在半封閉環(huán)境（車(chē)間）；85%的企業(yè)采用封裝方式貯存肉骨粉，剩余15%的企業(yè)采用散放方式貯存肉骨粉；54%的企業(yè)采用人工封裝方式包裝肉骨粉，其余46%的企業(yè)采用機(jī)械封裝方式包裝肉骨粉。

2.1.2.5 廠區(qū)和生產(chǎn)區(qū)布局 15%的無(wú)害化處理中心設(shè)立了病死畜禽運(yùn)輸車(chē)輛專(zhuān)用入口、內(nèi)部通道及洗消設(shè)施，其余企業(yè)則混用同一入口、車(chē)輛消毒設(shè)施及生產(chǎn)通道，生產(chǎn)區(qū)內(nèi)的不同生產(chǎn)環(huán)節(jié)之間未實(shí)現(xiàn)完全隔離，投料間、處理車(chē)間、儲(chǔ)存間之間，或者有通道相連，或者共用空間，人員和工具在污區(qū)和凈區(qū)間交叉流動(dòng)。

2.1.2.6 終端產(chǎn)物類(lèi)型與銷(xiāo)售 無(wú)害化處理產(chǎn)物分為肉骨粉、油脂、動(dòng)物蛋白氨基酸原液、骨炭等。終端產(chǎn)物大多銷(xiāo)售至有機(jī)肥產(chǎn)業(yè)，部分銷(xiāo)售至化工行業(yè)。通過(guò)本次問(wèn)卷調(diào)查，以及與高校相關(guān)專(zhuān)業(yè)老師、無(wú)害化處理行業(yè)人員交流和網(wǎng)絡(luò)信息查閱，仍然有無(wú)害化處理的肉骨粉進(jìn)入飼料產(chǎn)業(yè)的情況。

2.2 病毒核酸檢測(cè)

2.2.1 總體情況 檢測(cè)結(jié)果顯示：916 份樣品中，共有301 份檢出病毒核酸陽(yáng)性，占32.86%。其中，ASFV 核酸陽(yáng)性257 份，占28.06%；CSFV 核酸陽(yáng)性61 份，占6.66%；FMDV 核酸陽(yáng)性16 份，占1.75%；PRRSV 核酸陽(yáng)性1 份，占0.11%（表2）。由結(jié)果可以看出，無(wú)害化處理中心終端產(chǎn)物和環(huán)境中這4 種病毒都有一定的陽(yáng)性檢出，其中ASFV核酸陽(yáng)性檢出率最高，說(shuō)明ASFV 污染較嚴(yán)重。

表2 4 種病毒核酸陽(yáng)性檢出情況

2.2.2 無(wú)害化處理中心病毒核酸陽(yáng)性分布情況由表3 數(shù)據(jù)分析，36.54%（19/52）無(wú)害化處理中心的終端產(chǎn)物樣品、67.31%（35/52）無(wú)害化處理中心的產(chǎn)物儲(chǔ)存場(chǎng)所樣品中，檢出ASFV 核酸陽(yáng)性，說(shuō)明ASFV 核酸污染面較廣；其他3 種病毒核酸陽(yáng)性污染的無(wú)害化處理中心較少，說(shuō)明這3 種病毒污染面得到有效控制或污染面較小。

表3 檢出病毒核酸陽(yáng)性在無(wú)害化處理中心數(shù)量分布 單位：個(gè)

表4 不同環(huán)節(jié)樣品中病毒核酸陽(yáng)性樣品分布情況

2.2.4 不同處理工藝陽(yáng)性樣品分布情況 39 個(gè)采用化制法的處理中心終端產(chǎn)物中，43.30%（48/97）的樣品為病毒核酸陽(yáng)性，11 個(gè)采用發(fā)酵法的處理中心終端產(chǎn)物中，73.91%（17/23）的樣品為病毒核酸陽(yáng)性（表5），表明化制法和發(fā)酵法存在病原污染風(fēng)險(xiǎn)；而采用碳化法和酸解法的處理中心終端產(chǎn)物樣品，未發(fā)現(xiàn)核酸陽(yáng)性，表明以上兩種處理法能夠徹底破壞病毒核酸。

表5 化制法和發(fā)酵法處理終端產(chǎn)物樣品中病毒核酸陽(yáng)性樣品分布情況 單位：份

2.3 病原活性檢測(cè)

將出料口、終端產(chǎn)物、產(chǎn)物轉(zhuǎn)運(yùn)工具及產(chǎn)物儲(chǔ)存環(huán)境樣品中的104 份病毒核酸陽(yáng)性樣品（80份ASFV 核酸陽(yáng)性、10 份FMDV 核酸陽(yáng)性、13 份CSFV 核酸陽(yáng)性、1 份PRRSV 核酸陽(yáng)性），采用細(xì)胞培養(yǎng)法進(jìn)行病毒分離培養(yǎng)后，經(jīng)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)，均未發(fā)現(xiàn)活病毒，表明經(jīng)過(guò)上述工藝無(wú)害化處理后，病死動(dòng)物中的這4 種病毒被完全滅活，達(dá)到了無(wú)害化處理目的。

2.4 風(fēng)險(xiǎn)因素分析

根據(jù)上述調(diào)查結(jié)果分析，無(wú)害化處理中心仍存在動(dòng)物病原外泄的風(fēng)險(xiǎn)。風(fēng)險(xiǎn)因素具體包括：第一，無(wú)害化處理中心作為病死動(dòng)物集中處理場(chǎng)所，病原種類(lèi)繁雜，關(guān)聯(lián)養(yǎng)殖場(chǎng)戶多，且目前絕大多數(shù)無(wú)害化處理中心車(chē)輛洗消設(shè)施建設(shè)和運(yùn)行尚不規(guī)范，病原經(jīng)未有效消毒的車(chē)輛和人員從無(wú)害化處理中心擴(kuò)散到養(yǎng)殖場(chǎng)的風(fēng)險(xiǎn)會(huì)長(zhǎng)期存在。第二，處理前的病死動(dòng)物和處理后的終端產(chǎn)物之間未采取嚴(yán)格的隔離措施，因而存在終端產(chǎn)物被活病原二次污染的風(fēng)險(xiǎn)。第三，若終端產(chǎn)物在被動(dòng)物病原污染的情況下被用作陸生動(dòng)物飼料，會(huì)造成疫病擴(kuò)散，讓無(wú)害化處理目標(biāo)失效。

3 建議

3.1 規(guī)范無(wú)害化處理中心建設(shè)

制定出臺(tái)無(wú)害化處理中心建設(shè)與管理相關(guān)技術(shù)規(guī)范。目前，我國(guó)僅有《病死及病害動(dòng)物無(wú)害化處理技術(shù)規(guī)范》，規(guī)定了除發(fā)酵法以外的無(wú)害化處理技術(shù)規(guī)范，但在無(wú)害化處理中心建設(shè)、管理、運(yùn)維方面仍未有基于生物安全管控的可參照標(biāo)準(zhǔn)。多數(shù)無(wú)害化處理中心根據(jù)同行經(jīng)驗(yàn)或設(shè)備廠家意見(jiàn)進(jìn)行建設(shè)，以致場(chǎng)區(qū)和生產(chǎn)區(qū)布局，以及人員車(chē)輛通道設(shè)計(jì)等方面存在缺陷。同時(shí)，一些無(wú)害化處理中心存在車(chē)間衛(wèi)生狀況差、人員混崗等管理問(wèn)題，進(jìn)一步加大了致病病原泄露風(fēng)險(xiǎn)。

建議國(guó)家盡快出臺(tái)無(wú)害化處理中心建設(shè)、管理、運(yùn)維技術(shù)規(guī)范體系，特別是輻射面廣的無(wú)害化處理中心建設(shè)布局和管理技術(shù)規(guī)范；指導(dǎo)無(wú)害化處理中心科學(xué)設(shè)計(jì)功能區(qū)、生產(chǎn)區(qū)各環(huán)節(jié)、場(chǎng)區(qū)通道等的布局；建立和落實(shí)生物安全管理制度，降低無(wú)害化處理中心因場(chǎng)區(qū)生物安全缺陷而導(dǎo)致的致病病原外泄風(fēng)險(xiǎn)。

3.2 加強(qiáng)無(wú)害化處理中心日常監(jiān)管

本次調(diào)查發(fā)現(xiàn)，無(wú)害化處理中心均建立了生產(chǎn)記錄制度，對(duì)病死畜禽收集、處理、產(chǎn)物銷(xiāo)售等工作內(nèi)容進(jìn)行記錄、存檔，并能夠保存兩年以上，但仍存在無(wú)害化處理中心病毒核酸污染嚴(yán)重的情況，反映出無(wú)害化處理中心生產(chǎn)和人員管理制度及生產(chǎn)消毒措施等方面仍存在較大短板。

建議加強(qiáng)對(duì)無(wú)害化處理中心日常生產(chǎn)的指導(dǎo)與監(jiān)管，針對(duì)生產(chǎn)制度執(zhí)行、工作人員管理及廠區(qū)消毒措施等方面開(kāi)展生物安全指導(dǎo)，督導(dǎo)企業(yè)嚴(yán)格按照無(wú)害化處理技術(shù)規(guī)范要求進(jìn)行操作，在采樣監(jiān)測(cè)病死動(dòng)物的同時(shí)抽檢環(huán)境樣品，降低因無(wú)害化處理中心日常生產(chǎn)管理不到位導(dǎo)致的動(dòng)物病原泄露風(fēng)險(xiǎn)。

3.3 加強(qiáng)無(wú)害化處理產(chǎn)物監(jiān)管

根據(jù)國(guó)家《飼料原料目錄》關(guān)于肉骨粉的相關(guān)規(guī)定，禁止將無(wú)害化處理得到的肉骨粉作為肉骨粉飼料進(jìn)入動(dòng)物養(yǎng)殖環(huán)節(jié)。但據(jù)了解，仍有少量終端產(chǎn)物銷(xiāo)售至飼料行業(yè)。建議國(guó)家進(jìn)一步組織研究無(wú)害化處理產(chǎn)物資源化利用技術(shù)規(guī)范和方式路徑，制定相關(guān)管理制度，嚴(yán)格查處無(wú)害化處理肉骨粉飼料化非法利用問(wèn)題，杜絕因無(wú)害化處理產(chǎn)物使用而導(dǎo)致的動(dòng)物疫病傳播風(fēng)險(xiǎn)（包括反芻動(dòng)物肉骨粉進(jìn)入反芻動(dòng)物食物鏈的風(fēng)險(xiǎn)）。

4 結(jié)論

調(diào)查發(fā)現(xiàn)，化制法、發(fā)酵法、碳化法、酸解法均可滅活A(yù)SFV、CSFV、FMDV 和PRRSV 4 種病毒，但由于存在廠區(qū)和生產(chǎn)區(qū)布局不盡科學(xué)，管理措施不夠規(guī)范等問(wèn)題，部分無(wú)害化處理中心自出料口到產(chǎn)物運(yùn)輸車(chē)等環(huán)節(jié)均存在病毒核酸污染情況，進(jìn)而存在終端產(chǎn)物被病原二次污染，或者病原隨產(chǎn)物運(yùn)輸車(chē)擴(kuò)散出去的風(fēng)險(xiǎn)。故建議畜牧獸醫(yī)部門(mén)進(jìn)一步規(guī)范無(wú)害化處理中心建設(shè)，強(qiáng)化日常監(jiān)管和無(wú)害化處理產(chǎn)物監(jiān)管，降低病原傳出風(fēng)險(xiǎn)。