慢性乙肝患者血清白介素-33、轉(zhuǎn)化生長因子-β1水平的表達及意義*

蔣 婧，方 向

固始縣中醫(yī)院檢驗科，河南 固始 465200

慢性乙型肝炎（CHB）是患者感染乙型肝炎病毒（HBV）后未給予積極干預而形成的慢性肝臟損傷，隨著病情發(fā)展可導致肝纖維化、肝硬化，甚至肝癌，對患者生命安全構(gòu)成威脅。目前，臨床在抗HBV治療中無法徹底清除HBV，僅可抑制HBV復制及增殖，且HBV感染患者疾病的轉(zhuǎn)歸與機體免疫功能間存在密切聯(lián)系［1-2］。細胞因子是機體免疫系統(tǒng)的重要組成部分，并在HBV感染中具有重要的免疫作用。白介素-33（IL-33）是孤兒受體ST2的特異性配體，也是作用較強的Th2細胞誘導劑，在腦、肺、胃、皮膚組織及肝臟中均存在大量的IL-33表達［3］。轉(zhuǎn)化生長因子-β1（TGF-β1）為多功能蛋白質(zhì)的一種，屬抗炎因子，可影響機體內(nèi)多種細胞的生長、分化及凋亡，具有較強的免疫調(diào)節(jié)作用，并認為TGF-β1水平與肝硬化間聯(lián)系密切［4］。鑒于此，本研究分析慢性乙肝患者血清IL-33、TGF-β1水平表達及意義，以為臨床評估CHB病情提供參考，現(xiàn)將結(jié)果報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2018年5月—2020年2月固始縣中醫(yī)院收治的100例CHB患者作為研究對象，其中男56例，女44例，年齡23～68歲，平均年齡（45.59±3.67）歲。依據(jù)患者病情分為CHB輕度組（36例）、CHB中度組（34例）、CHB重度組（30例），并依據(jù)乙型肝炎病毒e抗原（HBeAg）陰陽性分為HBeAg陰性組71例，HBeAg陽性組29例。所有患者均符合《慢性乙型肝炎防治指南（2015版）》［5］中疾病相關診斷標準，病例資料完整。參與本研究前未行抗病毒及免疫調(diào)節(jié)治療，且6個月內(nèi)未行保肝治療。自愿參與，簽署知情同意書。排除原發(fā)性肝癌、自身免疫性肝炎、藥物性肝炎等其他肝部疾病。伴有其他系統(tǒng)嚴重感染。依從性差，無法完成本次研究者。另選取同期于醫(yī)院行健康體檢的32例志愿者作為對照組，男19例，女13例，年齡22～69歲，平均年齡（45.40±3.82）歲。本研究獲醫(yī)院醫(yī)學倫理委員會批準。兩組患者性別、年齡等一般資料具有可比性（P＞0.05）。

1.2 方法

采集5 mL清晨空腹肘靜脈血置于EDTA試管中，將其置于離心機內(nèi)以3 000 r/min速度，離心半徑為10 cm，離心處理15 min后留取上層血清，對其進行編號后置于-72℃低溫冰箱中保存待檢。采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）檢測HBV血清標志物，另采用德國羅氏公司生產(chǎn)的MODULARP 800型全自動生化分析儀檢測肝功能，包括天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）、直接膽紅素（DBIL）、總膽紅素（TBIL）水平，采用ELISA檢測血清IL-33及TGF-β1水平。檢測所使用的試劑均由武漢伊萊瑞特生物科技有限公司提供，所有操作均嚴格遵循試劑盒要求進行。

1.3 觀察指標

比較對照組及各病情程度下CHB患者IL-33及TGF-β1水平。另比較HBeAg陰性組及HBeAg陽性組患者IL-33及TGF-β1水平。

1.4 統(tǒng)計學方法

采用SPSS 22.0軟件進行統(tǒng)計分析。計量資料以均數(shù)±標準差（±s）表示，組間比較采用t檢驗。計數(shù)資料用例數(shù)和百分比（%）表示，組間比較采用χ2檢驗。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 四組患者IL-33及TGF-β1水平

相比于對照組，CHB重度、中度、輕度組IL-33及TGF-β1水平均較高，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），見表1。

表1 四組患者IL-33及TGF-β1水平（±s） ng/L

表1 四組患者IL-33及TGF-β1水平（±s） ng/L

a表示與對照組相比，P＜0.05。

組別CHB輕度組（n=36）CHB中度組（n=34）CHB重度組（n=30）對照組（n=32）IL-33 11.78±6.52a 12.03±6.11a 16.58±9.67a 5.13±1.02 TGF-β1 395.20±39.86a 482.71±69.79a 886.29±25.94a 293.46±25.81

2.2 兩組患者IL-33及TGF-β1水平

兩組患者IL-33及TGF-β1水平比較，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），見表2。

表2 兩組患者IL-33及TGF-β1水平（±s） ng/L

表2 兩組患者IL-33及TGF-β1水平（±s） ng/L

組別HBeAg陽性組（n=29）HBeAg陰性組（n=71）t值P值IL-33 16.08±1.33 15.57±0.94 1.880 0.063 TGF-β1 590.08±294.46 538.49±173.85 0.881 0.380

3 討論

目前，臨床對于乙型肝炎的發(fā)病機制暫無明確定義。HBV感染不會直接對肝細胞造成損傷，而是經(jīng)誘導機體T細胞介導的特異性細胞免疫反應在清除HBV的同時引發(fā)的肝細胞損害，實驗室檢查可見血清中ALT及TBIL等指標明顯上升。正常情況下Th1/Th2型免疫反應處于動態(tài)平衡，若Th1/Th2及Th17/Treg類細胞因子發(fā)生失衡時，可對患者臨床轉(zhuǎn)歸造成嚴重影響［6-7］。

本研究結(jié)果顯示，相比于對照組，CHB重度、中度、輕度組IL-33及TGF-β1水平均較高，HBeAg陽性及陰性組IL-33及TGF-β1水平比較有可比性，表明IL-33及TGF-β1水平與CHB病情嚴重程度呈正相關，病情越重，IL-33及TGF-β1水平越高，且二者在肝纖維化進程及肝組織炎癥活動中具有較好的協(xié)同作用。IL-33是IL-1家族成員中的一種可直接作用于Th2細胞，從而促進白介素-4（IL-4）、白介素-5（IL-5）、白介素-13（IL-13）等Th2型細胞因子分泌，并通過自然殺傷細胞（NK）及自然殺傷性T細胞（NKT）而增強Th1型細胞因子的表達。此外，IL-33的特異性受體為ST2，分為sST2及跨模性ST2（ST2L）兩種，其中ST2L可選擇性表達于Th2型細胞表面，當機體發(fā)生病毒感染時，IL-33可作為前炎癥細胞因子釋放至細胞外與靶細胞表面的ST2L相結(jié)合，并激活下游信號轉(zhuǎn)導分子，影響IL-4、IL-5、IL-13等細胞因子生成及分泌，使得Th1/Th2免疫應答發(fā)生失衡，若向Th2傾斜，則可促進炎性反應發(fā)生，導致感染呈現(xiàn)慢性化改變［8］。TGF-β1生物學效應較為廣泛，不同培養(yǎng)條件及細胞種類下，TGF-β1呈現(xiàn)出抑制與刺激的雙重作用。TGF-β1還可作為一種關閉免疫應答及炎性反應的型號，因其具有抑制促炎細胞因子的功能，可在一定程度上拮抗淋巴細胞反應。研究顯示［9-10］，TGF-β1為公認的纖維化關鍵介導因子，是促進器官纖維化的細胞因子，由于TGF-β1可活化肝星狀細胞，促進纖維細胞生成，加快膠原基因表達。

綜上所述，CHB患者血清IL-33、TGF-β1水平隨著患者病情嚴重程度的增加而上升，在CHB疾病發(fā)展過程中，血清IL-33、TGF-β1起到重要作用，二者相互影響、相互調(diào)節(jié)及制約，為病情判斷及預后評估提供有利依據(jù)。